一种三唑磷分子印迹静电纺丝层析试纸条的组建方法技术

技术编号:23098103 阅读:39 留言:0更新日期:2020-01-14 20:23
本发明专利技术涉及一种三唑磷分子印迹静电纺丝层析试纸条的组建方法,结合静电纺丝、分子印迹及免疫层析试纸检测技术,用静电纺丝法在NC膜上制备分子印迹T线(检测限),羊抗小鼠IgG作为C线(质控线),通过三唑磷半抗原偶联小鼠IgG偶联异硫氰酸荧光素(THBu‑IgG‑FITC)荧光探针与目标物三唑磷直接竞争分子印迹结合位点而产生的荧光变化,建立三唑磷分子印迹静电纺丝层析荧光检测技术。本发明专利技术提供的三唑磷吸附功能材料具有较高的选择性,采用虚拟模板可解决模板渗漏问题,可以代替生物抗体应用于免疫层析技术当中;该吸附功能材料具有较高的稳定性、较长的使用寿命和较强的抗恶劣环境的能力,克服了传统生物抗体制备周期长、易失活、成本高等缺点。

【技术实现步骤摘要】
一种三唑磷分子印迹静电纺丝层析试纸条的组建方法
本专利技术涉及食品安全检测
,具体而言,涉及一种三唑磷分子印迹静电纺丝层析试纸条的组建方法。
技术介绍
三唑磷(Triazophos)是一种中毒、广谱有机磷杀虫剂,在谷物、水果和蔬菜上广泛使用。由于三唑磷化学稳定性好、半衰期长,使其在环境中极易残留,对环境和人类健康造成潜在危害。自2016年12月31日,我国明令禁止在蔬菜上使用三唑磷。目前三唑磷的检测技术主要有确证技术和免疫分析技术,但这些方法通常存在仪器昂贵、分析时间长、抗体制备困难等诸多缺陷。因此,设计合成具有特异性强、稳定性好、制备成本低的仿生识别材料,建立灵敏、简单、快速、稳定、廉价的检测方法具有重要的现实意义。免疫层析试纸检测技术是一种将单克隆抗体技术、免疫标记技术及免疫层析技术等多种方法结合起来的固相标记免疫检测技术,应用于抗原、抗体和半抗原的定性、半定量和定量检测。其使用方便、快速、特异强、成本低、制作简单,不需要专业人员和大型昂贵仪器,成为最常用的免疫分析方法之一。但通常的免疫层析需要使用抗体,而抗体的使用存在成本高本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种三唑磷分子印迹静电纺丝层析试纸条的组建方法,其特征在于,包括以下步骤:/n层析试纸条的组建:首先,用样品垫处理液(0.5%吐温-0.02M pH 7.2PB缓冲液)对样品垫进行处理,然后干燥切条;接着,用划膜仪将二抗(羊抗小鼠IgG)以1μL/cm的流速划在NC膜上,37℃下干燥;随后对试纸条进行组装:因为T线需使用静电纺丝喷丝在铝箔上(NC膜不导电),在C线下方5mm处将NC膜裁断,剪裁1mm宽的铝箔放置在裁断处,将上下两条NC膜及中间的铝箔粘贴在黑色荧光专用背板上,T线与C线间距5mm,然后在NC膜上下两侧依次粘贴吸水垫和样品垫,两垫与NC膜间均各覆盖1mm;/n静电纺丝法在NC膜...

【技术特征摘要】
1.一种三唑磷分子印迹静电纺丝层析试纸条的组建方法,其特征在于,包括以下步骤:
层析试纸条的组建:首先,用样品垫处理液(0.5%吐温-0.02MpH7.2PB缓冲液)对样品垫进行处理,然后干燥切条;接着,用划膜仪将二抗(羊抗小鼠IgG)以1μL/cm的流速划在NC膜上,37℃下干燥;随后对试纸条进行组装:因为T线需使用静电纺丝喷丝在铝箔上(NC膜不导电),在C线下方5mm处将NC膜裁断,剪裁1mm宽的铝箔放置在裁断处,将上下两条NC膜及中间的铝箔粘贴在黑色荧光专用背板上,T线与C线间距5mm,然后在NC膜上下两侧依次粘贴吸水垫和样品垫,两垫与NC膜间均各覆盖1mm;
静电纺丝法在NC膜上制备分子印迹T线:
(1)静电纺丝溶液的配制,首先配制CA电纺基质溶液:称取一定量的CA粉末,加入到丙酮中配置成120mg/ml的CA-丙酮溶液,在50℃水浴下震荡溶解5h,直到CA彻底溶解;然后配制三唑酮分子印迹分散液:称取一定量的MIPs聚合物,加入到丙酮中配置成20mg/ml的MIPs分散液,常温下超声分散50min,直至...

【专利技术属性】
技术研发人员:佘永新洪思慧王淼曹振何亚荟王静
申请(专利权)人:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
类型:发明
国别省市:北京;11

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