一种高载量琼脂糖层析介质及其制备方法技术

本发明专利技术涉及本发明专利技术提供了一种高载量琼脂糖层析介质，其特征在于，该介质由壳层和内核组成，其中壳层部分共价键合了线性大分子，如葡聚糖等，壳层部分和内核部分均偶联配基，配基种类包括金属离子、疏水配基、离子交换基团和蛋白等。本发明专利技术还包括一种制备这种高载量琼脂糖层析介质的方法。以金属螯合层析介质为例，与常规介质相比，采用该方法制备的介质对组氨酸标签(His-tagged)重组蛋白的载量是常规介质的2.5倍左右。这种高载量琼脂糖层析介质在生物分离纯化领域具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说是涉及一种高载量琼脂糖层析介质及其制备方法，及其在纯化蛋白和其他生物大分子纯化领域的应用。
技术介绍
蛋白分离纯化是蛋白质科学与产品工程领域的关键因素之一，在来源复杂、结构与性质各异的蛋白质及相关生物活性物质领域，如何实现高效分离纯化是研究者们一直致力解决的问题。层析介质是层析技术的最基本组成部分，其结构与性质是影响蛋白最终分离纯化效果最关键的因素之一。随着基因工程蛋白学、蛋白质工程学、疫苗工程学等学科及其应用领域的不断发展，大规模高效蛋白分离纯化对高通量层析技术提出了更高的要求，介质需要具有更高的载量，即在相同甚至更少的用量下分离纯化更多的目标蛋白。以金属螯合层析为例。金属螯合层析又称为固定化金属离子亲和层析，是20世纪70年代中期发展起来的一种层析方法。其分离原理主要是根据蛋白质表面的组氨酸、色氨酸、半胱氨酸等，能与Ni2+、Cu2+和Co2+等金属离子特异性地发生相互作用，从而对蛋白实现良好分离(如文献1：KaraA,OsmanB,YavuzH,etal.Immobilizationof-AmylaseonC本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高载量琼脂糖层析介质，其特征在于：该介质是以琼脂糖为基质的一种壳/核复合型结构，其中壳层经化学键合了葡聚糖，内核不含葡聚糖。介质的壳层和内核均螯合了配基，壳层和内核这两部分的配基密度差异化。

【技术特征摘要】
1.一种高载量琼脂糖层析介质，其特征在于：
该介质是以琼脂糖为基质的一种壳/核复合型结构，其中壳层经化学键合了葡聚糖，内核不含葡聚糖。介质的壳层和内核均螯合了配基，壳层和内核这两部分的配基密度差异化。
2.一种高载量琼脂糖层析介质的制备方法，其特征在于，包含以下几个步骤：
S1：采用一端活性一端惰性的异双官能团活化剂活化琼脂糖基质，使琼脂糖基质上连有惰性基团；
S2：活化惰性基团，通过调控惰性基团的活化程度，调控葡聚糖的接入程度，形成一种连有葡聚糖的壳/核复合结构，且壳层厚度和内核大小均可控；
S3：以这种连有葡聚糖的壳/核复合结构为基质，依次进行活化和偶联反应，制备高载量层析介质。活化这种连有葡聚糖的壳/核复合结构，再依次与螯合剂反应、螯合金属离子，制备金属螯合介质。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤S1中，所述琼脂糖基质，其琼脂糖浓度范围2％-15％。
4.如权利要求2所述的方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵岚，黄永东，巩方玲，马光辉，苏志国，
申请(专利权)人：中科森辉微球技术苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32