一种基于共焦拉曼免疫时域分辨荧光的动物血液检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于共焦拉曼免疫时域分辨荧光的动物血液检测方法，该方法是在微流控共焦拉曼免疫时域分辨荧光检测仪上实现的，该方法包括初始化及自聚焦、共焦拉曼光谱信息获取、免疫时域分辨荧光光谱信息获取、综合光谱数据后处理四个步骤。本发明专利技术的有益效果是，光路的共焦设计可有效提高空间分辨率，可对血液中的微小区域分子进行探测；长荧光寿命免疫标记为多次时域分辨采样提供了基础；条纹相机传感器光谱仪实现单次激光诱导荧光多次采集；共焦拉曼与多幅时域荧光提供综合光谱信息，提高物种血液鉴别能力。

【技术实现步骤摘要】
一种基于共焦拉曼免疫时域分辨荧光的动物血液检测方法
本专利技术涉及一种血液检测方法,尤其涉及一种采用微流控共焦拉曼免疫时域分辨荧光光谱的血液检测方法，适用于海关对出口的珍稀动物血液进行检测鉴别，属于光电探测领域。
技术介绍
在海关进出口各类商品中，各国对血液制品的进出口大都采取严格的管控措施。由于动物，尤其是重要的珍稀动物，其血液成分中含有珍稀物种的遗传特性等重要的生物信息，一旦外流将影响国家的生物安全，因此禁止出口。但不法分子往往在普通动物血液制品中偷带珍稀动物血液，所以急需特制的仪器设备进行检测，以区别普通动物与珍稀动物，以及珍稀动物的类别，以制止血液走私违法犯罪行为，保障国家的生物安全。珍稀动物血液的快速检测与鉴别是件困难的事情，因为有些动物的血液的基因差异极小，其外在的光学特性极其相近，往往种间差异与种内差异都处一同一量级。为此，急需找到一种可行的方法。一种有效分析工具为共焦拉曼技术，它可将拉曼泵浦激光聚焦至一极小区域，覆盖若干个生物大分子，并拾取分子振动引起的拉曼频移，从而对探测对象的分子构成进行有效识别；另一种强有力本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于共焦拉曼免疫时域分辨荧光的动物血液检测方法，该方法是在微流控共焦拉曼免疫时域分辨荧光光谱血液检测仪上实现的，所述检测仪由三维电动平台(1)、显微物镜(2)、双色片(3)、光纤耦合镜(5)、荧光接收光纤(6)、荧光光谱仪(7)、条纹相机传感器(8)、数字延迟发生器(9)、紫外激光扩束镜(10)、紫外低重频脉冲激光器(11)、主控制器(12)、无线网络收发器(13)、废液罐(16)、拉曼物镜(31)、拉曼光谱仪(33)、拉曼光纤(34)、拉曼耦合镜(35)、拉曼双色片(37)、拉曼扩束镜(38)、拉曼激光器(39)、瑞利滤光片(40)、自聚焦模组(41)及自动进样系统组成；其特征在于所...

【技术特征摘要】
1.一种基于共焦拉曼免疫时域分辨荧光的动物血液检测方法，该方法是在微流控共焦拉曼免疫时域分辨荧光光谱血液检测仪上实现的，所述检测仪由三维电动平台(1)、显微物镜(2)、双色片(3)、光纤耦合镜(5)、荧光接收光纤(6)、荧光光谱仪(7)、条纹相机传感器(8)、数字延迟发生器(9)、紫外激光扩束镜(10)、紫外低重频脉冲激光器(11)、主控制器(12)、无线网络收发器(13)、废液罐(16)、拉曼物镜(31)、拉曼光谱仪(33)、拉曼光纤(34)、拉曼耦合镜(35)、拉曼双色片(37)、拉曼扩束镜(38)、拉曼激光器(39)、瑞利滤光片(40)、自聚焦模组(41)及自动进样系统组成；其特征在于所述的方法包括以下步骤：
1)初始化及自聚焦
将珍稀动物待测血液注入血液管，将螯合标记物注入试剂管；将自动进样台的电动推进器、检测细管、血液管、血液接头组装好；将试剂进样台的试剂推进器、试剂管、试剂接头、Y形管组装好；将中间接头联接好检测细管与Y形管；将Y形管与废液罐接好；然后将整个自动进样系统安装于三维电动平台上；
主控制器发出指令启动电动推进器，以一定的速度推动血液管中的待测血液通过血液接头流入检测细管，并通过中间接头流入Y形管；主控制器发出指令启动试剂推进器，以一定的速度推动试剂管中的螯合标记物与检测细管中的待测血液在Y形管中相遇混合，产生免疫反应后，生成荧光标记位点，得到标记血液，从Y形管出口流出；
主控制器发出指令，启动数字延迟发生器；数字延迟发生器按设置的延迟T，发出两个触发脉冲，先后启动紫外低重频脉冲激光器和条纹相机传感器；主控制器发出指令，使条纹相机传感器工作于单帧曝光模式，并设置曝光时间Es；
紫外低重频脉冲激光器发出的紫外脉冲激光扩束聚焦至Y形管出口区域，产生的后向信号经光纤耦合镜耦合进入荧光光谱仪，到条纹相机传感器进行光电转换；条纹相机传感器将采集到的光谱信号传送到主控制器；主控制器计算该光谱信号的总强度I，即光谱曲线包围的总面积；
主控制器发出指令，控制三维电动平台沿XYZ三个轴进行步进微动调整，在每个位置，数字...

【专利技术属性】
技术研发人员：万雄，王泓鹏，袁汝俊，
申请(专利权)人：中国科学院上海技术物理研究所，
类型：发明
国别省市：上海;31