匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片制造技术

本实用新型专利技术公开了一种匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片，包括芯片底板和芯片盖板，所述芯片盖板上开设有用于添加检测样本的加样口，微流控芯片对应所述加样口具有滤血垫片，所述芯片底板上依次开设有用于容纳所述滤血垫片的滤血垫腔、与所述滤血垫腔相连通的反应腔以及超疏水阀道，所述芯片盖板对应所述超疏水阀道开设有排气孔，所述滤血垫片上封闭有抗人红细胞抗体，所述反应腔中包被有Eu标记单克隆抗体和XL665标记单克隆抗体。本实用新型专利技术的微流控芯片采用HTRF检测技术，适合快速床旁检测，且微流控芯片实现全血一步加样检测功能，大大缩短检测时间，操作简便，检测时间短，成本低，灵敏度高，线性范围宽，体积小，便于携带，可批量生产。

【技术实现步骤摘要】
匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片
本技术属于医疗器械体外诊断
，具体涉及一种利用液相时间分辨荧光能量共振转移技术实现快速定量检测生物标志物的匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片。
技术介绍
液相时间分辨荧光能量共振转移技术（HTRF）结合了荧光共振能量转移（FRET）技术和时间分辨荧光（TRF）技术。该技术利用了具有穴状结构的铕（Eu）元素的螯和标记物作为供体（Donor）和XL665荧光分子作为受体（Acceptor），实现Eu穴状化合物的供体与XL665受体之间的荧光共振能量转移（FRET）。在荧光共振能量转移中，受体发射荧光的波长等同与供体的激发荧光的波长。因为Eu的荧光衰减周期较长，所以含Eu的供体会诱导XL665受体长时间地发射荧光，受体激发后产生的荧光便能持续较长时间，这样通过时间分辨就可以区分那些短寿命的自身散射的荧光背景，分离出FRET信号。利用HTRF技术实现生物标志物检测有诸多优势。HTRF做为匀相检测技术，只有发生免疫反应的复合物才能被检测到。因此，HTRF技术在整个检测过程中都不需要繁琐的清洗工序，操作简单，容易实现微型化检测。其次，HTRF技术能轻松消除背景干扰信号，使得检测信号背景低，干扰小，检测灵敏度高。微流控芯片床旁诊断检测技术是近十年发展起来的快速检测技术。由于微流控技术拥有样本流动控制、芯片封闭、管道微小、可控性强等特点，使得微流控芯片POCT检测技术的检测灵敏度和检测重复性相比于层析POCT检测技术均有不同程度提升，因此微流控芯片POCT检测技术越来越受到市场的青睐。目前的HTRF检测方法主要采用酶标孔板形式实现。孔板检测方式适合样本批量检测，且需要使用血清或血浆做为检测样本。全血样本需要先将样本离心十分钟处理再做检测。因此，孔板检测形式并不适用于对单一样本的快速检测需求。且现有HTRF检测技术不能实现全血检测，不适合单一样本进行检测。
技术实现思路
有鉴于此，为了克服现有技术中的缺陷，本技术的目的是提供了一种能够实现现场快速、准确、高灵敏定量检测的一种匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片。为了达到上述目的，本技术采用以下的技术方案：一种匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片，包括芯片底板和芯片盖板，所述芯片盖板上开设有用于添加检测样本的加样口，微流控芯片对应所述加样口具有滤血垫片，所述芯片底板上依次开设有用于容纳所述滤血垫片的滤血垫腔、与所述滤血垫腔相连通的反应腔以及位于所述反应腔尾部的超疏水阀道，所述芯片盖板对应所述超疏水阀道开设有排气孔，所述滤血垫片上封闭有抗人红细胞抗体，所述反应腔中包被有Eu标记单克隆抗体和XL665标记单克隆抗体。封闭有滤血垫片的抗人红细胞抗体的作用是将全血样本中的红细胞拦截在滤血垫片中；反应腔的作用是提供免疫反应场所。优选地，所述反应腔的宽度小于或等于所述滤血垫腔的宽度。优选地，所述反应腔的深度大于所述滤血垫腔的深度。优选地，所述反应腔和所述滤血垫腔之间还设置有过渡通道。更加优选地，所述过渡通道的深度由所述靠近所述滤血垫腔的一侧向靠近所述反应腔的一侧逐渐增大。优选地，所述超疏水阀道包括凹槽微结构，所述凹槽微结构的表面具有超疏水试剂。超疏水试剂为溶解在电子氟化液中的氟硅烷。超疏水阀道表面由超疏水试剂进行修饰，阻止样本流动，固定免疫反应体积。超疏水阀道由凹槽微结构以及覆盖在凹槽微结构表面的超疏水试剂组成，超疏水试剂以及凹槽微结构形成的超疏水表面能够实现被动式流动阻断阀，当检测样本流动至该超疏水表面时，能有效阻挡液体继续流动，从而固定免疫反应体积。更加优选地，所述凹槽微结构中每个凹槽的深度为50-200μm、宽度为100-2000μm。进一步优选地，所述凹槽为弧形凹槽。优选地，所述芯片盖板为透明材质，如玻璃或PET、PBT等透明高分子材料。优选地，所述芯片盖板和芯片底板通过超声波、激光或压力胶的方式键合。由于以上技术方案的实施，本技术的一种匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片与现有技术相比具有如下优点：本技术的微流控芯片采用HTRF检测技术，与常规的HTRF技术孔板检测方式不同，本技术的微流控芯片适合单人份快速床旁检测。另一方面，微流控芯片实现全血一步加样检测功能，大大缩短检测时间。本技术的微流控芯片操作简便，检测时间短，成本低，灵敏度高，线性范围宽，体积小，便于携带，可批量生产。附图说明为了更清楚地说明本技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本技术优选实施例1中的匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片的爆炸图；图2为图1中I部的放大图；附图中：芯片盖板-1，芯片底板-2，加样口-3，滤血垫腔-4，过渡通道-5，反应腔-6，超疏水阀道-7，凹槽-71，排气孔-8，滤血垫片-9。具体实施方式为了使本
的人员更好地理解本技术的技术方案，下面将结合本技术实施例中的附图，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本技术一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本技术保护的范围。实施例1匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片参见附图1-2所示，本实施例中的一种匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片，包括芯片底板2和芯片盖板1，芯片盖板1上开设有用于添加检测样本的加样口3，微流控芯片对应加样口3具有滤血垫片9，芯片底板2上依次开设有用于容纳滤血垫片9的滤血垫腔4、与滤血垫腔4相连通的反应腔6以及超疏水阀道7以及连通滤血垫腔4和反应腔6的过渡通道5，芯片盖板1对应超疏水阀道7开设有排气孔8，滤血垫片9上封闭有抗人红细胞抗体，反应腔6中包被有Eu标记单克隆抗体和XL665标记单克隆抗体。封闭有滤血垫片9的抗人红细胞抗体的作用是将全血样本中的红细胞拦截在滤血垫片9中；反应腔6的作用是提供免疫反应场所。如图1所示，本实施例中的反应腔6的宽度小于滤血垫腔4的宽度，反应腔6的深度大于滤血垫腔4的深度，且过渡通道5的深度由靠近滤血垫腔4的一侧向靠近反应腔6一侧逐渐增大。如图1-2所示，本实施例中的超疏水阀道7包括凹槽微结构，凹槽微结构的表面具有超疏水试剂。凹槽微结构中每个凹槽71的深度为50-200μm、宽度为100-2000μm。凹槽71为弧形凹槽71。超疏水试剂为溶解在电子氟化液中的氟硅烷。超疏水阀道7表面由超疏水试剂进行修饰，可阻止样本流动，固定免疫反应体积。超疏水试剂以及凹槽微结构形成的超疏水表面能够实现被动式流动阻断阀，当检测样本流动至该超本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片，包括芯片底板和芯片盖板，所述芯片盖板上开设有用于添加检测样本的加样口，其特征在于，微流控芯片对应所述加样口具有滤血垫片，所述芯片底板上依次开设有用于容纳所述滤血垫片的滤血垫腔、与所述滤血垫腔相连通的反应腔以及位于所述反应腔尾部的超疏水阀道，所述芯片盖板对应所述超疏水阀道开设有排气孔，所述滤血垫片上封闭有抗人红细胞抗体，所述反应腔中包被有Eu标记单克隆抗体和XL665标记单克隆抗体。/n

【技术特征摘要】
1.一种匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片，包括芯片底板和芯片盖板，所述芯片盖板上开设有用于添加检测样本的加样口，其特征在于，微流控芯片对应所述加样口具有滤血垫片，所述芯片底板上依次开设有用于容纳所述滤血垫片的滤血垫腔、与所述滤血垫腔相连通的反应腔以及位于所述反应腔尾部的超疏水阀道，所述芯片盖板对应所述超疏水阀道开设有排气孔，所述滤血垫片上封闭有抗人红细胞抗体，所述反应腔中包被有Eu标记单克隆抗体和XL665标记单克隆抗体。


2.根据权利要求1所述的一种匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片，其特征在于，所述反应腔的宽度小于或等于所述滤血垫腔的宽度。


3.根据权利要求1所述的一种匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片，其特征在于，所述反应腔的深度大于所述滤血垫腔的深度。


4.根据权利要求1所述的一种匀相时间分辨免疫荧光床旁诊断微流控芯片，其特征在于，所述反应腔和所述滤血垫腔之间还设置有过渡通道。


5.根据权利要求4所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾悦，蒋理国，
申请(专利权)人：迪亚莱博张家港生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：江苏;32