基于唾液白介素-1β以及肝细胞生长因子的牙龈炎的诊断制造技术

公开了一种用于评估人类受试者中存在牙龈炎的体外方法。该方法基于对三种生物标志物蛋白质的确定选择的构思。相应的，在受试者的唾液样本中，测量蛋白质肝细胞生长因子(HGF)以及白介素‑1β(IL‑1β)，以及C反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质中的至少一者的浓度。基于所测量的浓度，确定反映所述蛋白质的联合浓度的值。将该值与阈值进行比较，该阈值以相同的方式反映与不存在牙龈炎或牙周炎相关联的联合浓度。所述比较允许评估检测值是否指示受试者中存在牙龈炎。从而，典型地，反映联合浓度高于阈值所反映的联合浓度的测试值指示存在牙龈炎。

Diagnosis of gingivitis based on salivary interleukin-1 \u03b2 and hepatocyte growth factor

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】基于唾液白介素-1β以及肝细胞生长因子的牙龈炎的诊断
本专利技术属于口腔护理领域，并且涉及基于唾液的牙周疾病的诊断。特别地，本专利技术涉及用于确定发生牙龈炎的试剂盒以及方法。
技术介绍
牙龈炎症或牙龈炎主要通过牙菌膜或牙菌斑附着在牙齿表面引起，是一种非破坏性的牙周疾病。如果不检测和治疗，可逆性牙龈炎通常会导致牙齿周围组织(即牙周组织)的炎症，这种情况被定义为牙周炎，其不可逆并且导致组织破坏以及牙槽骨脱落(loss)，以及最终导致牙齿脱落。在牙龈疾病的发展过程中，通常会有与其相关联的临床症状以及体征，诸如牙龈肿胀，颜色由粉红色变为深红色，牙龈出血，口臭以及牙龈变得更脆弱(tender)或触痛。严重的牙周炎症应及时调查，在诸如糖尿病、HIV感染、血小板减少以及白血病的情况下。例如，在糖尿病患者情况下，严重的牙周疾病可能是各种糖尿病并发症的有力预测指标，包括肾病、中风、短暂性脑缺血发作、心绞痛、心肌梗塞和心力衰竭。因此，早期以及准确诊断牙周疾病，从健康的角度看很重要。为了这个目的，特别是在牙龈炎阶段的诊断是被期待的。在一般牙科实践中，牙周疾病的诊断仍然较差(MorganRG(2001)。BritDentJ191：436-41)，导致相对较低的治疗干预率和大量未经治疗的病例。当前的诊断依赖于牙科专业人员对口腔组织(颜色、肿胀、探查出血程度、探查龈袋深度，以及口腔X射线造成的骨脱落)进行不精确的主观临床检查。这些常规方法耗时，以及所使用的某些技术(龈袋深度、X射线)反映了历史事件，诸如过去的疾病活动，而不是当前的疾病活动或对进一步疾病的敏感性。因此，期望更客观、更快、准确、诊断更易于使用，其优选也可以由非专业人员执行。从而，期待测量现有疾病活动，以及可能的受试者对进一步的牙周疾病的敏感性。长期以来，唾液或口腔液长期以来被提倡作为口腔和一般疾病的诊断液，以及随着微型生物传感器(也称为“芯片上的实验室”)的出现，用于快速椅旁测试的即时诊断获得了更大的科学和临床兴趣(Lee等人,Salivarydiagnostics.OrthodCraniofacRes,12(3)(2009),pp.206–211)。特别是对于牙周疾病的检测，与组织炎症和分解相关的炎症性生物标志物可能会由于邻近而容易地在唾液中中止，这表明唾液具有用于牙周疾病检测的强大潜力。的确，这个领域因此引起了明显的兴趣以及提出了令人鼓舞的结果，然而还没有确定的测试出现。先前用于唾液生物标志物即时测试发展的限制包括缺少适用于诊疗助手应用的技术以及无法分析各个样本中的多种生物标志物。同样，在这样的测试中包括哪些多种生物标志物的选择没有在文献中得到充分的解决，也没有在实际测试中实施。这些挑战被讨论在Ji&Choi,FrontCellInfectMicrobiol.2015；5:65。生物标志物代表了支持临床表现的生物学指标，并且因而是诊断牙周疾病临床结果的客观测量。最终，经过验证的生物标志物可以被用于评估未来疾病的风险，在最早阶段识别疾病，识别对初始治疗的反应，以及允许实施预防策略。当前用于诊断牙龈炎的方法包括估计龈袋深度，探测时的出血水平和牙龈指数。这是劳动密集型过程，牙医不会对每个患者和/或每次就诊都执行，以及消费者无法执行(自我诊断)。期望提供一种更简单的过程，以及特别的仅需要从受试者，并且可能通过受试者他或她自己获得少量唾液样本的过程。期望将这种样本输入体外诊断设备中，该设备将允许基于测量值对唾液样本进行分类，从而其可以返回对受试者患有牙龈炎的可能性的指示。
技术实现思路
为了更好地解决前述需求，本专利技术一方面涉及一种用于评估人受试者中牙龈炎的存在的体外方法，该方法包括检测来自所述人受试者的唾液样品中所述蛋白质的浓度：肝细胞生长因子(HGF)，白介素-1β(IL-1β)，以及C反应蛋白质(CRP)好＝和血红蛋白质(Hb)中的至少一者；确定反映所述蛋白质的联合浓度的测试值；将测试值与阈值进行比较，该阈值以相同的方式反映与不存在牙龈炎或牙周炎相关联的联合浓度，从而评估测试值是否指示所述受试者中存在牙龈炎。在另一方面，本专利技术提供了在人类受试者的唾液样本中使用蛋白质肝细胞生长因子(HGF)、白介素-1β(IL-1β)、以及C-反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质(Hb)中的至少一者，作为评估所述受试者中存在牙龈炎的生物标志物。典型的，评估是根据所述样品中所述蛋白质的浓度进行的。在另一方面，本专利技术在于一种用于诊断人类受试者中牙龈炎的系统，该系统包括：-检测设备，能够以及适于在人类患者的唾液样本中检测蛋白质HGF，IL-1β，以及CRP和Hb中的至少一者；以及-处理器，能够以及适于从所述蛋白质的经确定的浓度中确定受试者是否患有牙龈炎。系统可选地包含到用户界面、特别是图形用户界面的数据连接，该图形用户界面能够呈现信息，优选地还能够输入信息，该界面是系统的一部分或远程界面；可选地，前述项目中的一个或更多，特别是处理器能够“在云中”运行，即，不是在固定机器上，而是通过基于互联网的应用的手段。在还另一方面，本专利技术提供了一种用于检测人类患者唾液样本中至少三种牙龈炎生物标志物的试剂盒，所述试剂盒包含一种或更多，典型是三种检测试剂，用于检测HGF，IL-1β，以及CRP和Hb中的一者。典型的，使用三种或更多检测试剂，每种检测试剂结合不同的生物标志物。在一个实施例中，第一检测试剂能够结合肝细胞生长因子(HGF)，第二检测试剂能够结合白介素-1β(IL-1β)，以及第三检测试剂能够结合C反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质(Hb)中的一者。又一方面，本专利技术提供了一种体外方法，用于确定在从第一时间点t1到第二时间点t2的时间间隔内人类受试者的牙龈炎状态的变化，该方法包括：在t1时在至少一个从所述受试者获得的唾液样本中、以及在t2时在至少一个从所述受试者获得的唾液样本中检测蛋白质：肝细胞生长因子(HGF)，白介素-1β(IL-1β)，以及C反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质(Hb)中的至少一者的浓度，并比较所述浓度，由此任一浓度、两个浓度或全部三个浓度的差异反映出状态变化。在另一方面，本专利技术提供一种诊断人类患者是否患有牙龈炎的方法，包括在人类患者的唾液样本中检测蛋白质：肝细胞生长因子(HGF)，白介素-1β(IL-1β)，以及C-反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质(Hb)中的至少一者，以及根据所述样本中所述蛋白质的浓度来评估患者中是否存在牙龈炎。可选地，该方面的方法包括治疗患者牙龈炎的进一步步骤。在又一方面，本专利技术提供了一种检测遭受牙龈炎患者中的蛋白质：肝细胞生长因子(HGF)，白介素-1β(IL-1β)，以及C-反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质(Hb)中的至少一者的方法，包括：(a)从人类患者获取唾液样本；以及(b)通过使唾液样本与一种或多种能够结合所述蛋白质的检测试剂接触、并检测每种蛋白质与所述一种或多种检测试剂之间的结合，来检测样本中是否存在肝细胞生长因子(HG本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于评估人类受试者中存在牙龈炎的体外方法，包括在来自所述人类受试者的唾液样本中检测以下蛋白质的浓度：肝细胞生长因子(HGF)，白介素-1β(IL-1β)，以及C-反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质(Hb)中的至少一者；确定反映针对所述蛋白质测量的联合浓度的测试值；将所述测试值与阈值进行比较，从而评估所述测试值是否指示所述受试者中存在牙龈炎，所述阈值以相同的方式反映与不存在牙龈炎或牙周炎相关联的联合浓度。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170524 EP 17172749.8;20180115 EP 18151607.11.一种用于评估人类受试者中存在牙龈炎的体外方法，包括在来自所述人类受试者的唾液样本中检测以下蛋白质的浓度：肝细胞生长因子(HGF)，白介素-1β(IL-1β)，以及C-反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质(Hb)中的至少一者；确定反映针对所述蛋白质测量的联合浓度的测试值；将所述测试值与阈值进行比较，从而评估所述测试值是否指示所述受试者中存在牙龈炎，所述阈值以相同的方式反映与不存在牙龈炎或牙周炎相关联的联合浓度。


2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述阈值基于针对在一个或多个参考样本中的蛋白质所确定的浓度，每个样本与不存在牙龈炎或牙周炎相关联。


3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述阈值基于样本集合中的所述蛋白质的浓度，所述样本集合包括来自不存在牙龈炎或牙周炎的受试者的样本以及来自患有牙龈炎的受试者的样本。


4.根据前述权利要求中任一项的方法，其中，检测到的所述蛋白质由HGF、IL-1β以及CRP组成。


5.根据权利要求1-3中任一项的方法，其中，检测到的所述蛋白质由HGF、IL-1β以及Hb组成。


6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，将所确定的浓度值算术处理为0到1之间的数字。


7.一种将人类受试者唾液样本中的以下蛋白质作为评估所述受试者中存在牙龈炎的生物标志物的用途：肝细胞生长因子(HGF)，白介素-1β(IL-1β)，以及C-反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质(Hb)中的至少一者。


8.一种用于检测人类患者的唾液样本中的至少三种针对牙龈炎的生物标志物的试剂盒，所述试剂盒包含一种或多种检测试剂，用于检测肝细胞生长因子(HGF)，白介素-1β(IL-1β)，以及C-反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质(Hb)中的一者。


9.根据权利要求8所述的试剂盒，其中，所述一种或多种检测试剂包括至少三种检测试剂，第一检测试剂用于检测肝细胞生长因子(HGF)，第二检测试剂用于检测白介素-1β(IL-1β)，以及第三检测试剂用于检测C-反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质(Hb)中的一者。


10.根据权利要求8或权利要求9所述的试剂盒，其中，所述一种或多种检测试剂被包含在固体支持件上。

【专利技术属性】
技术研发人员：G·库伊杰曼，M·A·范哈特斯坎普，M·K·J·德加格，A·H·里迈勒，P·普雷肖，J·J·泰洛尔，
申请(专利权)人：皇家飞利浦有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL