一种检测试剂盒在制备用于婴幼儿喘息性疾病的检测试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测试剂盒在制备用于婴幼儿喘息性疾病的检测试剂盒中的应用，包括以下步骤：通过检测TGF‑β1的试剂盒检测待测物血浆中TGF‑β1的含量，通过检测IL‑2、IL‑4、IL‑5和IL‑13的试剂盒检测待测物血浆中IL‑2、IL‑4、IL‑5和IL‑13的含量；当血浆中IL‑4、IL‑5、IL‑13比例升高，而IL‑2比例下降，造成Th1/Th2失衡，则为喘息性疾病患者；当TGF‑β1含量相比于正常人升高，则喘息性疾病患者存在气道重塑的高危因素。本发明专利技术通过检测血浆中TGF‑β1、IL‑2、IL‑4、IL‑5和IL‑13的含量，判断Th1/Th2是否失衡，进行确定是否为婴幼儿喘息性疾病患者，其检测方法灵敏度高，简单可靠。

Application of a test kit in the preparation of a test kit for asthmatic diseases of infants

【技术实现步骤摘要】
一种检测试剂盒在制备用于婴幼儿喘息性疾病的检测试剂盒中的应用
本专利技术涉及医学
，尤其涉及一种检测试剂盒在制备用于婴幼儿喘息性疾病的检测试剂盒中的应用。
技术介绍
喘息是婴幼儿最常见的呼吸道症状，近1/3儿童在3岁之前至少有过一次喘息发作，6岁时有近一半的儿童有过喘息发作，最终高达40％的儿童可发展为支气管哮喘。目前对婴幼儿喘息性疾病概念和分类尚不统一，包括毛细支气管炎、喘息性支气管炎、哮喘等多种疾病。根据婴幼儿喘息的病因及转归，2008年中华医学会儿科学分会呼吸学组制定了《儿童支气管哮喘诊断与防治指南》，将5岁以下儿童喘息分成3种临床表型：(1)早期一过性喘息；(2)早期起病的持续性喘息(指3岁前起病)；(3)迟发性喘息/哮喘。第1、2种类型的小儿喘息只能通过回顾性分析才能做出鉴别。由此可见，婴幼儿喘息与哮喘密切相关，喘息婴幼儿中存在哮喘儿童。哮喘是儿童最常见的慢性呼吸道疾病，严重危害儿童的身心健康。近年来其发病率及患病率在全球范围内呈上升趋势，据报告，全球11.6％的6至7岁儿童存在哮喘症状。根据2010年完成的我国第三次城市儿童哮喘流行病学调查，我国城市儿童哮喘的平均患病率已达3.02％，其中，婴幼儿和学龄前儿童的总患病率分别为1.77％和4.15％，能够得到合理治疗的患儿不足30％，一些不及时和不适当的治疗最终导致这些患儿在成年后发展为成年性哮喘，给家庭和社会带来了巨大的精神和经济负担。因此，从喘息的学龄前儿童中把可能发展为哮喘的患儿识别出来，早期进行有效干预十分必要。然而，目前婴幼儿喘息性疾病的发病机制尚未清楚。与其他年龄组相比，学龄前儿童(年龄≤5岁)有较高的哮喘发病率，据统计，学龄前喘息儿童于急诊科就诊的年增长率在23～42‰，相比之下6到70岁年龄组的年增长率为15‰。学龄前儿童的喘息占用了大量医疗资源，也给人们带来了诊断方面的挑战。在发展中国家，学龄前儿童喘息常被误诊为肺炎进行治疗，导致这个年龄组死亡率增加，这些被诊断为复发性肺炎的患儿往往在后来被诊断为哮喘。在过去的15年中，许多基于纵向症状的分类虽然对婴幼儿喘息流行病学起到了一定的帮助，Castro-Rodriguez及同事使用Tucson出生队列，根据喘息发作的年龄、频率，父母的哮喘史，与感冒无关的喘息，湿疹，过敏性鼻炎以及外周血EOS计数提出了哮喘预测指数(theasthmapredictiveindex，API)，分别使用严格和不严格的指标以更好的预测其6岁时的结局，结果显示在6～13岁时有哮喘症状者中，不严格指标阳性的儿童有59％、严格指标阳性的儿童为76％，严格指标阴性的儿童95％以上在6～13岁时不发生哮喘。我国2008年制定的《儿童支气管哮喘诊断与防治指南》[6]，也提出了哮喘预测指数以预测3岁内喘息儿童发展为持续性哮喘的危险性，包括在过去1年内喘息≥4次，具有1项主要危险因素或2项次要危险因素，主要危险因素指：(1)父母有哮喘病史，(2)经医生诊断的特应性皮炎，(3)有吸入变应原致敏的依据；次要危险因素：(1)有食物变应原过敏的依据，(2)外周血EOS≥4％，(3)与感冒无关的喘息。然而，由于婴幼儿喘息性疾病的发病机制尚未清楚，其与哮喘发病机制关系的研究也较少，缺乏前瞻性的可靠生物标志及预测因素作为确定哮喘发生的标准，使得API在临床应用存在一定的局限性，这也使从喘息婴幼儿中识别出有可能发展成为哮喘的儿童变得非常困难。哮喘由免疫、遗传和环境因素等共同作用引起。哮喘的本质是多种炎性细胞(包括EOS、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞)、气道结构细胞(气道平滑肌细胞、上皮细胞等)及其分泌的细胞组分(细胞因子、粘附分子、趋化因子等)共同参与的慢性气道炎症，气道重塑(airwayremodeling)以慢性气道炎症为发生基础。反复多次喘息的婴幼儿发展为哮喘可能性更大，喘息婴幼儿生命早期已存在气道炎症，甚至已发生气道重塑，不管是特应性体质的喘息患儿还是非特应性体质的喘息患儿，都存在类似哮喘的气道病理改变，但其发生机制尚未完全清楚。目前可用于哮喘气道炎症评估的方法有：痰液的气道炎症标志物检测、呼出气一氧化氮(fractionalexhalednitricoxide，FENO)浓度测定、支气管肺泡灌洗及支气管粘膜活检，后两者是评估和诊断哮喘气道炎症和气道重塑的金标准，但均为侵袭性检查，临床使用受到限制；前两者为无创性检查，其中FENO测定的敏感性和特异性已得到证实，但目前在国内尚未广泛应用，且6岁以下儿童对呼气流速的控制能力欠缺，应用有一定的限制。辅助T细胞分为1型辅助T细胞(Th1)和2型辅助T细胞(Th2)，Th1诱导细胞免疫，Th2诱导体液免疫。通常认为，Th1/Th2平衡，当状态倾向于Th1时，细胞免疫变得过强，容易引起风湿性关节炎等自身免疫性相关的疾病，倾向于Th2时，体液免疫变得过强，容易陷入癌症、免疫缺陷、皮肤炎、过敏症状、肾炎、感染症等疾病。IL-2为代表性的Th1细胞因子，能促进所有亚型T细胞的增殖及产生细胞因子，增强NK细胞胞毒活性。IL-5与EOS的活化、气道炎症、气道高反应性(airwayhyperresponsiveness，AHR)及IgE的合成密切相关。IL-13在哮喘炎症过程中起主导作用，它可以单独介导并引起哮喘，与气道的炎症反应和免疫调节有关。转化生长因子-β1(transforminggrowthfactor-β1，TGF-β1)具有强大的促炎及抗炎作用，被认为是哮喘气道炎症和气道重塑中最重要的炎性介质。IL-2、IL-4、IL-5、IL-13、TGF-β1及IgE作为哮喘发病过程中重要的因子，通过错综复杂的机制及相互作用参与了哮喘免疫学发病机制、气道炎症及气道重塑的发生发展，目前尚未显现这些因子与婴幼儿喘息性疾病之间的关系。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种检测试剂盒在制备用于婴幼儿喘息性疾病的检测试剂盒中的应用，该检测试剂盒以外周血为检测对象，检测灵敏度高，应用广泛。其检测方法简单可行。为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种检测试剂盒在制备用于婴幼儿喘息性疾病的检测试剂盒中的应用，用于婴幼儿喘息性疾病的检测试剂盒包括检测IL-2、IL-4、IL-5和IL-13含量的试剂盒；所述检测IL-2、IL-4、IL-5和IL-13含量的试剂盒为美国Millipore公司的MILLIPLEXMAPhumanTh17MagneticBeadPanel试剂盒；所述检测试剂盒的应用方法包括以下步骤：S1、通过检测IL-2、IL-4、IL-5和IL-13含量的试剂盒检测待测血浆中IL-2、IL-4、IL-5和IL-13的含量；S2、当血浆中IL-4、IL-5、IL-13比例升高，或IL-2比例下降，造成Th1/Th2失衡，则为喘息性疾病患者。上述的应用，进一步的，所述检测试剂盒还包括检测TGF-β1含量的试剂盒；所述检测TGF-β1含量的试剂盒为美国R&D公司HumanTGF-β1ELISA试剂盒。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测试剂盒在制备用于婴幼儿喘息性疾病的检测试剂盒中的应用，其特征在于，所述用于婴幼儿喘息性疾病的检测试剂盒包括检测IL-2、IL-4、IL-5和IL-13含量的试剂盒；/n所述检测IL-2、IL-4、IL-5和IL-13含量的试剂盒为美国Millipore公司的MILLIPLEXMAP human Th17 Magnetic Bead Panel试剂盒；/n所述检测试剂盒的应用方法包括以下步骤：/nS1、通过检测IL-2、IL-4、IL-5和IL-13含量的试剂盒检测待测血浆中IL-2、IL-4、IL-5和IL-13的含量；/nS2、当血浆中IL-4、IL-5、IL-13比例升高，或IL-2比例下降，造成Th1/Th2失衡，则为喘息性疾病患者。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测试剂盒在制备用于婴幼儿喘息性疾病的检测试剂盒中的应用，其特征在于，所述用于婴幼儿喘息性疾病的检测试剂盒包括检测IL-2、IL-4、IL-5和IL-13含量的试剂盒；
所述检测IL-2、IL-4、IL-5和IL-13含量的试剂盒为美国Millipore公司的MILLIPLEXMAPhumanTh17MagneticBeadPanel试剂盒；
所述检测试剂盒的应用方法包括以下步骤：
S1、通过检测IL-2、IL-4、IL-5和IL-13含量的试剂盒检测待测血浆中IL-2、IL-4、IL-5和IL-13的含量；
S2、当血浆中IL-4、IL-5、IL-13比例升高，或IL-2比例下降，造成Th1/Th2失衡，则为喘息性疾病患者。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测试剂盒还包括检测TGF-β1含量的试剂盒；所述检测TGF-β1含量的试剂盒为美国R&D公司HumanTGF-β1ELISA试剂盒。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述应用方法还包括：
S3、通过检测TGF-β1含量的试剂盒检测喘息性疾病患者血浆中TGF-β1的含量，当TGF-β1含量较未患病时升高，则喘息性疾病患者存在气道重塑的高危因素。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述通过检测TGF-β1含量的试剂盒检测待...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑湘榕，余小河，豆波，何苗，朱彦潼，
申请(专利权)人：郑湘榕，
类型：发明
国别省市：湖南;43