【技术实现步骤摘要】
一种新城疫病毒抗体磁免疫化学发光检测试剂盒及其应用
本专利技术属于免疫学检测领域,特别地,涉及一种新城疫病毒抗体磁免疫化学发光检测试剂盒及其应用。
技术介绍
新城疫病毒(NDV),有些地方称之为禽副粘病毒I型(APMV-1),为副粘病毒科的腮腺炎病毒数。NDV的基因组是一条全程15156kb的单链负股RNA,分子量在5.2×106~5.6×106之间,可编码6种特异性结构蛋白。病毒颗粒具有双层包膜结构,该包膜由受感染机体细胞外膜的脂类与病毒的糖蛋白结合而衍生得到的。病毒颗粒内含一多盘绕的竹状衣壳,囊膜表面的糖蛋白具有血凝素和神经酰胺酶活性。新城疫俗称“鸡瘟”,新城疫病毒的强毒株引起多种禽类急性、高接触性、致死性传染病。由于其传播快、死亡率高,给禽养殖业带来毁灭性打击,造成非常严重的影响,国际兽疫局(OIE)将新城疫列为A类传染病,我国农业部也将其列为动物的一类疫病和优先防控的动物重大疫病之一。目前,我国大多数畜禽养殖场都进行了新城疫病毒疫苗的免疫接种,为了了解ND免疫状况,经常采用ND抗体水平来检测禽类的免疫 ...
【技术保护点】
1.一种新城疫病毒抗体磁免疫化学发光检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒含有酶标抗IgY抗体、磁标新城疫病毒抗原和发光底物液;/n所述磁标新城疫病毒抗原能与血清中的新城疫病毒抗体特异性结合;所述酶标抗IgY抗体的抗体部分能与血清中的新城疫病毒抗体结合,所述酶标抗IgY抗体的酶部分能与所述发光底物液中的发光底物发生反应,使所述发光底物发光;/n所述试剂盒用于定量检测禽类动物血清中的新城疫病毒抗体。/n
【技术特征摘要】
1.一种新城疫病毒抗体磁免疫化学发光检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒含有酶标抗IgY抗体、磁标新城疫病毒抗原和发光底物液;
所述磁标新城疫病毒抗原能与血清中的新城疫病毒抗体特异性结合;所述酶标抗IgY抗体的抗体部分能与血清中的新城疫病毒抗体结合,所述酶标抗IgY抗体的酶部分能与所述发光底物液中的发光底物发生反应,使所述发光底物发光;
所述试剂盒用于定量检测禽类动物血清中的新城疫病毒抗体。
2.如权利要求1所述的新城疫病毒抗体磁免疫化学发光检测试剂盒,其特征在于,所述酶标抗IgY抗体为碱性磷酸酶标抗IgY抗体,所述发光底物液中的发光底物为3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷。
3.如权利要求1所述的新城疫病毒抗体磁免疫化学发光检测试剂盒,其特征在于,所述酶标抗IgY抗体为辣根过氧化物酶标抗IgY抗体,所述发光底物液中的发光底物为3-氨基苯二甲酰肼。
4.如权利要求1所述的新城疫病毒抗体磁免疫化学发光检测试剂盒,其特征在于,所述磁标新城疫病毒抗原为核壳结构;所述核壳结构的内核为超顺磁性纳米颗粒,所述核壳结构的外壳为新城疫病毒抗原和新城疫病毒抗原位点之外的封闭蛋白;所述超顺磁性纳米颗粒与所述新城疫病毒抗原和封闭蛋白通过共价结合和疏水作用连接。
5.如权利要求1所述的新城疫病毒抗体磁免疫化学发光检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还含有标准品溶液、样本稀释液和浓缩洗涤液。
6.如权利要求2所述的新城疫病毒抗体磁免疫化学发光检测试剂盒,其特征在于,所述碱性磷酸酶标抗IgY抗体通过以下方法制备得到,包括以下步骤:
(1)将活化剂加入到碱性磷酸酶中,使所述碱性磷酸酶上引入马来酰亚胺基团,得到活化的碱性磷酸酶;
(2)将还原剂加入到抗IgY抗体中,使所述抗IgY抗体中的二硫键断开,从而暴露出具有活性的巯基,得到具有活性巯基的抗IgY抗体,将该具有活性巯基的抗IgY抗体与步骤(1)得到的活化的碱性磷酸酶进行混合,在2℃-4℃条件下,使所述活化的碱性磷酸酶与所述具有活性巯基的抗IgY抗体发生偶联反应,再依次加入马来酰亚胺溶液和乙醇胺溶液,终止偶联反应,即得到碱性磷酸酶标抗IgY抗体;
或者将N-琥珀酰亚胺基-S-乙酰硫基乙酸酯加入到抗IgY抗体中,使...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨海,计梦琴,杨宝凤,张德军,成诗琦,
申请(专利权)人:华中科技大学,武汉纳达康生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:湖北;42
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