The invention discloses a compound amplification system for identifying whether the body fluid to be tested is non blood, menstrual blood or peripheral blood and a primer combination used. The primer combination consists of 12 DNA molecules shown in sequences 1 to 12 in the sequence table. Using this primer combination to construct a complex amplification system, we can identify the body fluid to be tested as non blood, menstrual blood or peripheral blood, and the accuracy is high. The invention provides accurate scientific basis for defining the nature of a case, convicting and sentencing, etc., and has important application value.
【技术实现步骤摘要】
一种鉴定待测体液为非血液、月经血还是外周血的复合扩增体系及其使用的引物组合
本专利技术属于法医技术学领域,具体涉及一种鉴定待测体液为非血液、月经血还是外周血的复合扩增体系及其使用的引物组合。
技术介绍
通过鉴别案发现场体液斑迹的组织来源,可推断样本组织来源及其真实犯罪活动,从而为案件定性及现场重建提供重要信息,为法庭科学提供重要的科学证据。案件现场常见的体液包括外周血、月经血、唾液、精液、阴道分泌液等。其中,外周血和月经血虽然均含有大量红细胞,但与外周血相比,月经血中还含有大量的子宫内膜碎片、子宫颈粘液和阴道分泌物等混合物。现场血液类检材是属于外周血还是月经血是非常重要的法庭科学问题,往往对案件定性及重建案发现场、提供法庭证据具有十分重要的意义;尤其是针对性侵案件、女性失踪案以及某些伤害案中,女性受害者称因受暴力攻击出现血尿,在这种情况下,需要确定尿液中的血细胞来源是否存在月经血污染。因此,月经血与外周血的两种血液类体液间的鉴别区分仍是法医学体液鉴别的重点及难点。传统的血痕鉴定方法主要是生化和免疫学分析法,即利用血液 ...
【技术保护点】
1.引物组合,包括引物组合甲和引物组合乙;/n引物组合甲包括引物1、引物2、引物3和引物4;/n引物1为序列表中的序列1所示的单链DNA分子;/n引物2为序列表中的序列2所示的单链DNA分子;/n引物3为序列表中的序列3所示的单链DNA分子;/n引物4为序列表中的序列4所示的单链DNA分子;/n引物组合乙包括引物5、引物6、引物7和引物8;/n引物5为序列表中的序列5所示的单链DNA分子;/n引物6为序列表中的序列6所示的单链DNA分子;/n引物7为序列表中的序列7所示的单链DNA分子;/n引物8为序列表中的序列8所示的单链DNA分子。/n
【技术特征摘要】
1.引物组合,包括引物组合甲和引物组合乙;
引物组合甲包括引物1、引物2、引物3和引物4;
引物1为序列表中的序列1所示的单链DNA分子;
引物2为序列表中的序列2所示的单链DNA分子;
引物3为序列表中的序列3所示的单链DNA分子;
引物4为序列表中的序列4所示的单链DNA分子;
引物组合乙包括引物5、引物6、引物7和引物8;
引物5为序列表中的序列5所示的单链DNA分子;
引物6为序列表中的序列6所示的单链DNA分子;
引物7为序列表中的序列7所示的单链DNA分子;
引物8为序列表中的序列8所示的单链DNA分子。
2.权利要求1中所述引物组合甲。
3.权利要求1中所述引物组合乙。
4.如权利要求1所述引物组合、权利要求2所述引物组合甲或权利要求3所述引物组合乙,其特征在于:所述引物组合、所述引物组合甲或所述引物组合乙还包括引物组合丙;
引物组合丙包括引物9、引物10、引物11和引物12;
引物9为序列表中的序列9所示的单链DNA分子;
引物10为序列表中的序列10所示的单链DNA分子;
引物11为序列表中的序列11所示的单链DNA分子;
引物12为序列表中的序列12所示的单链DNA分子。
5.一种复合扩增体系,包括权利要求1或4所述引物组合、或、权利要求2或4所述引物组合甲、或、权利要求3或4所述引物组合乙。
6.如权利要求5所述复合扩增体系,其特征在于:
引物1、引物2、引物3和引物4在所述复合扩增体系中的浓度为0.01μM;
引物5和引物6在所述复合扩增体系中的浓度为4.0μM;
引物7和引物8在所述复合扩增体系中的浓度为5.0μM;
引物9和引物10在所述复合扩增体系中的浓度为0.2μM;
引物11和引物12在所述复合扩增体系中的浓度为1.0μM。
7.试剂盒甲、试剂盒乙或试剂盒丙;
含有权利要求1或4所述引物组合的试剂盒甲;所述试剂盒甲用于鉴定待测体液为非血液、月经血还是外周血;
含有权利要求2或4所述引物组合甲的试剂盒乙;所述试剂盒乙用于鉴定待测体液为血液还是非血液;
含有权利要求3或4所述引物组合乙的试剂盒丙;所述试剂盒丙用于鉴定待测血液为月经血还是外周血。
8.X1)或X2)或X3):
X1)权利要求1或4所述引物组合、或、权利要求5或6所述复合扩增体系在鉴定待测体液为非血液、月经血还是外周血中的应用;
X2)权利要求2或4所述引物组合甲、或、权利要求5或6所述复合扩增体系在鉴定待测体液为血液还是非血液中的应用;
X3)权利要求3或4所述引物组合乙、或、权利要求5或6所述复合扩增体系在鉴定待测血液为月经血还是外周血中的应用。
9.S1)或S2)或S3):
S1)一种鉴定待测体液为非血液、月经血还是外周血的方法,包括如下步骤:以待测体液的cDNA为模板,分别采用引物对1、引物对2、引物对3和引物对4进行PCR扩增,得到PCR扩增产物;引物对1由权利要求1中引物1和引物2组成;引物对2由权利要求1中引物3和引物4组成;引物对3由权利要求1中引物5和引物6组成;引物对4由权利要求1中引物7和引物8组成;然后进行如下判断:
如果采用引物对1得到的PCR扩增产物中含有大小为243bp的DNA片段,采用引物对2得到的PCR扩增产物中含有大小为159bp的DNA片段,采用引物对3得到的PCR扩增产物中含有大小为126bp的DNA片段,采用引物对4得到的PCR扩增产物中含有大小为272bp的DNA片段,则该待测体液为或疑似为月经血;
如果采用引物对1得到的PCR扩增产物中含有大小为243bp的DNA片段,采用引物对2得到的PCR扩增产物中含有大小为159bp的DNA片段,采用引物对3得到的PCR扩增产物中不含有大小为126bp的DNA片段,采用引物对4得到的PCR扩增产物中不含有大小为272bp的DNA片段,则该待测体液为或疑似为外周血;
如果采用引物对1得到的PCR扩增产物中不含有大小为243bp的DNA片段,采用引物对2得到的PCR扩增产物中不含有大小为159bp的DNA片段,采用引物对3得到的PCR扩增产物中不含有大小为126bp的DNA片段,采用引物对4得到的PCR扩增产物中不含有大小为272bp的DNA片段,则该待测体液为或疑似为非血液;
S2)一种鉴定待测体液为血液还是非血液的方法,包括如下步骤:以待测体液的cDNA为模板,分别采用引物对1和引物对2进行PCR扩增,得到PCR扩增产物;然后进行如下判断:
如果采用引物对1得到的PCR扩增产物中含有大小为243bp的DNA片段,采用引物对2得到的PCR扩增产物中含有大小为159bp的DNA片段,则待测体液为或疑似为血液;
如果采用引物对1...
【专利技术属性】
技术研发人员:赵一霞,孙启凡,季安全,胡胜,
申请(专利权)人:公安部物证鉴定中心,
类型:发明
国别省市:北京;11
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