The invention relates to the technical field of food detection, in particular to a method for detecting tetracycline antibiotic residues in eggs based on SERS, taking silver nano sol particles as active enhancement substrate, extracting acetone extract from eggs, electrostatic enrichment and Raman spectrum detection to obtain SERS spectrum; comparing acetone egg extract without tetracycline and acetone extract with antibiotics The best position of Raman peak was found out as the quantitative peak. The method for detecting tetracycline antibiotic residues in eggs based on SERS provided by the invention is simple, fast, easy to detect in real time, and can carry out quantitative analysis, which is of great significance for strict control of antibiotic pollution in foods.
【技术实现步骤摘要】
基于SERS检测鸡蛋中四环素类抗生素残留的方法
本专利技术涉及食品检测
,特别是涉及一种基于SERS检测鸡蛋中四环素类抗生素残留的方法。
技术介绍
我国是家禽养殖大国,2005年禽蛋年总产量已达28795万吨,位居世界首位,其中鸡蛋由于营养丰富、易被吸收、口感良好、价格便宜而深受消费者喜爱。鸡蛋占绝大部分禽蛋市场,而90%以上的鸡蛋都是由农户和小企业生产的,尽管目前无公害食品蛋鸡饲养允许使用的治疗药物受到严格限制,但实际生产中,为降低疫病风险,滥用误用抗生素现象十分严重,同时通过环境和食物链的作用致使药物残留问题也日益加剧。四环素、土霉素、金霉素以及多西环素均为四环素类兽医专用药,在各类动物疾病的预防和治疗中具有良好的应用价值。农业部235号公告《动物性食品中兽药最高残留限量》规定产蛋鸡不得添加。四环素类抗生素对革兰阳性菌和革兰阴性菌均有较好的防治作用,该类药物与喹诺酮类药物均属于目前应用最为广泛的兽用抗生素。四环素类药物可在动物体内残留,并随食品进入人体,危害人体健康,尤其是对儿童的牙齿损害最大。目前,测定该类抗生素药物残留的主要方法有微生物法、酶联检测免疫技术、高效液相色谱法、液相色谱-质谱法、气相色谱-质谱检测技术等。然而,微生物法和酶联检测免疫技术操作繁琐、灵敏度低、耗时(>2h);精确检测一般采用GB/T5009.116-2003畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定(高效液相色谱法)方法,但需用到液相色谱仪等大型仪器,不适合快速检测,而且检测比较费时间;同时,对于复杂的多组分体系 ...
【技术保护点】
1.基于SERS检测鸡蛋中四环素类抗生素残留的方法,所述的四环素类抗生素包括土霉素、四环素或金霉素,其特征在于,包括以下步骤:/n(1)活性增强基底的制备/n采用传统的微波加热方法制备银纳米溶胶颗粒,即在微波加热条件下,利用柠檬酸三钠还原硝酸银制备银溶胶,反应一段时间后,当银纳米溶胶的颜色由红色变为灰绿色时,停止加热并将银纳米溶胶取出,自然冷却至室温,于4℃保存备用;吸取10μL银纳米溶胶均匀附于丝网印刷电极的碳工作电极上,烘箱内60℃烘干,重复镀制三次,制成0.5 cm×0.5 cm银纳米镀膜作为 SERS 活性增强基底;/n(2)鸡蛋提取液样品的制备/n取鸡蛋破壳,置于均质机内充分作用均匀,取5g均匀蛋液置于50mL离心管内,再加入5g无水硫酸钠和10mL丙酮,涡旋3min,超声10min,5000r/min离心5min,取上清液得鸡蛋提取液样品;/n(3)静电富集和拉曼光谱检测/n将步骤(1)制成的活性增强基底置入步骤(2)得到的鸡蛋提取液样品,对丝网印刷电极施加电压,所述的施压频率为30次/秒,使得抗生素分子富集和吸附在丝网印刷电极的表面,置于拉曼光谱样品池中,调节拉曼光谱仪器 ...
【技术特征摘要】
1.基于SERS检测鸡蛋中四环素类抗生素残留的方法,所述的四环素类抗生素包括土霉素、四环素或金霉素,其特征在于,包括以下步骤:
(1)活性增强基底的制备
采用传统的微波加热方法制备银纳米溶胶颗粒,即在微波加热条件下,利用柠檬酸三钠还原硝酸银制备银溶胶,反应一段时间后,当银纳米溶胶的颜色由红色变为灰绿色时,停止加热并将银纳米溶胶取出,自然冷却至室温,于4℃保存备用;吸取10μL银纳米溶胶均匀附于丝网印刷电极的碳工作电极上,烘箱内60℃烘干,重复镀制三次,制成0.5cm×0.5cm银纳米镀膜作为SERS活性增强基底;
(2)鸡蛋提取液样品的制备
取鸡蛋破壳,置于均质机内充分作用均匀,取5g均匀蛋液置于50mL离心管内,再加入5g无水硫酸钠和10mL丙酮,涡旋3min,超声10min,5000r/min离心5min,取上清液得鸡蛋提取液样品;
(3)静电富集和拉曼光谱检测
将步骤(1)制成的活性增强基底置入步骤(2)得到的鸡蛋提取液样品,对丝网印刷电极施加电压,所述的施压频率为30次/秒,使得抗生素分子富集和吸附在丝网印刷电极的表面,置于拉曼光谱样品池中,调节拉曼光谱仪器的参数设置,获得SERS光谱;
所述的拉曼光谱仪器的参数设置如下:光谱仪激光功率2mW,激光波长785nm,扫描光谱范围100-3200cm-1,选择波段为150-1800cm-1,信号相对强度范围为4000-25000,积分时间10s,积分平均2次;对测量数据进行记录待分析;
(4)含有四环素类抗生素的丙酮溶液的SERS检测
制作工作标曲,分别使用标准溶液制备成土霉素、四环素、金霉素标准溶液0.2、0.4、0.8...
【专利技术属性】
技术研发人员:苑旭洲,施建刚,李晓燕,
申请(专利权)人:山东恒诚检测科技有限公司,
类型:发明
国别省市:山东;37
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