一种剑尾鱼仔鱼细胞系及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种剑尾鱼仔鱼细胞系，其通过原代培养和传代培养构建得到，本发明专利技术还提供了剑尾鱼仔鱼细胞系在水产动物病毒分离和在环境污染物监测中的应用。本发明专利技术对剑尾鱼仔鱼进行细胞培养，初步确定了细胞的培养条件，进行了染色体分析，检测了细胞对多种水生动物病毒的敏感性，并对抗生素类环境污染物利福平对细胞的诱导效应进行了研究，该细胞系的建立为后期水生动物病毒的研究及细胞系作为体外毒理学细胞模型应用于环境污染物的毒理学相关研究奠定了基础。

A cell line of swordtail larvae and its construction and Application

The invention discloses a swordtail larval cell line, which is obtained by primary culture and subculture construction, and also provides the application of swordtail larval cell line in aquatic animal virus separation and environmental pollution monitoring. The invention conducts cell culture for swordtail larvae, preliminarily determines the cell culture conditions, conducts chromosome analysis, detects the sensitivity of cells to a variety of aquatic animal viruses, and studies the induction effect of rifampin, an environmental pollutant of antibiotics, on cells. The establishment of the cell line is the study of aquatic animal viruses in later stage and the cell line is used as the in vitro toxicology fine line The application of cellular model in the toxicology of environmental pollutants laid the foundation.

【技术实现步骤摘要】
一种剑尾鱼仔鱼细胞系及其构建方法和应用
本专利技术涉及一种细胞系及其构建方法和应用，具体涉及一种剑尾鱼仔鱼细胞系及其构建方法和应用，属于医学生物

技术介绍
剑尾鱼(Xiphophorushelleri，swordtailfish)是热带亚热带小型鱼类，分类学地位为硬骨鱼纲(Osteichthyes)、鳉形目(Cyprinodontiformes)、胎鳉科(Poeciliidae)、剑尾鱼属(Xiphophorus)。剑尾鱼体型小、胎生、繁殖周期短、便于实验室内饲养管理，且具有对多种农药、重金属等毒物较敏感等特征，是水环境监测、毒理性试验及水生动物病毒检测的理想试验水生动物。鱼类细胞作为其鱼体组织的细胞模型，广泛应用于生物医学研究领域及环境污染物的检测及毒性研究，为研制相关鱼类疫苗以及环境污染物检测研究奠定了基础。鱼类细胞作为科研材料较活鱼样本有着不可忽视的优点(于淼等2003)：(1)实验成本较低，实验鱼的养殖需要添加大体积的养殖设备和增氧设备等，培养鱼类细胞只需为细胞添加必要的培养基及血清，无需投入大量的人力物力，节约了实验本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种剑尾鱼仔鱼细胞系，其特征在于，剑尾鱼仔鱼细胞系SFF，于2019年8月16日保藏于中国武汉,武汉大学，中国典型培养物保藏中心，保藏登记编号为CCTCC NO:C2019161。/n

【技术特征摘要】
1.一种剑尾鱼仔鱼细胞系，其特征在于，剑尾鱼仔鱼细胞系SFF，于2019年8月16日保藏于中国武汉,武汉大学，中国典型培养物保藏中心，保藏登记编号为CCTCCNO:C2019161。


2.一种权利要求1所述的剑尾鱼仔鱼细胞系的构建方法，其特征在于，步骤如下：
1)取刚出生的剑尾鱼仔鱼于75％乙醇中消毒5～10s，以PBS漂洗干净后剪碎，加入消化液A，混合均匀后均匀涂布到培养瓶中，并将培养瓶倒置培养箱中倒置干贴6～8h，然后向培养瓶中加入完全培养液正置继续培养10～15h，添加完全培养液继续培养2～5天，得到原代细胞；
2)待原代细胞铺满单层后，清除完全培养液，以PBS清洗2～3次，加入胰酶消化细胞，加入完全培养液，吹打悬起细胞，进行传代培养，得到剑尾鱼仔鱼细胞系。


3.根据权利要求2所述的一种剑尾鱼仔鱼细胞系的构建方法，其特征在于，步骤1)中所述消化液A为含有0.1％的胶原酶Ⅰ(w/v)和5％胎牛血清(w/v)的DMEM/F-12培养液。


4.根据权利要求2所述的一种剑尾鱼仔鱼细胞系的构建方法，其特征在于，所述完全培养液为胎牛血清、剑尾鱼脑细胞培养24～48h后的过滤液、碱性成纤维样生长因子、表皮生长因子、青霉素、链霉素、两性霉素B、DMEM/F-12培养液的混合液。


5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：王英英，王庆，曾伟伟，李凯彬，李莹莹，尹纪元，石存斌，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院珠江水产研究所，
类型：发明
国别省市：广东;44