一种荷丹片中多种有效成分的含量测定方法技术

本发明专利技术涉及荷丹片中多种有效成分的含量测定方法，包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备：取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于容量瓶中，加甲醇溶解定容，得到对照品溶液；(2)供试品溶液的制备：取荷丹片，粉碎，置于容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量离心，移取上清液至容量瓶中，加甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液；(3)测定方法：吸取混合对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中有效成分的含量；色谱条件：色谱柱C18、流速0.1‑0.6mL/min；柱温20‑60℃，以甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。

A method for the determination of several effective components in Hedan tablets

The invention relates to a method for determining the content of various effective components in Hedan tablets, which comprises the following steps: (1) preparation of reference solution: take an appropriate amount of each standard of Hedan tablets, weigh accurately, put them into volumetric flasks respectively, add methanol to dissolve and fix the volume, and obtain the reference solution; (2) preparation of test solution: take Hedan tablets, smash them, put them into volumetric flasks, add an appropriate amount of methanol, and put them at the place of ultrasound After cooling, use methanol to fix the volume to the scale line, close the plug and shake well, take a proper amount of centrifugation, transfer the supernatant to the volumetric flask, add methanol to fix the volume to the scale and mix well, then the test solution will be obtained; (3) determination method: suck the mixed reference solution and test solution, inject them into the high performance liquid chromatograph, get the chromatogram, and calculate the content of effective components in the test sample according to the chromatogram; color Spectrum conditions: column C18, flow rate 0.1-0.6ml/min, column temperature 20-60 \u2103, formic acid aqueous solution as mobile phase a, acetonitrile as mobile phase B, gradient elution.

【技术实现步骤摘要】
一种荷丹片中多种有效成分的含量测定方法
本专利技术属于药学领域，涉及药品质量的测定方法，具体涉及一种荷丹片中多种有效成分的含量测定方法。
技术介绍
荷丹片为中成药。为理血剂，具有化痰降浊，活血化瘀之功效。主治高脂血症属痰浊挟瘀证候者。荷丹片由荷叶，丹参，山楂，番泻叶，补骨脂(盐炒)等中药原料加工制成。荷丹片质量标准收载于2015版《中国药典》，药典中质量标准仅对复方中的荷叶碱进行了含量测定。然而中药药效的产生是多种化学成分协同作用的结果，因此中药的质量控制也应选择多个化学成分作为检测指标。荷丹片成分较为复杂，单一成分作为指标成分具有一定的局限性。因此，对荷丹片进行多成分含量测定显得尤为重要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种荷丹片中多种有效成分的含量测定方法。本专利技术所述的有效成分包括：补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚。本专利技术所述的含量测定方法，包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成每1mL含有适量补骨脂苷(PO)、异补骨脂苷(IPO)、金丝桃苷(Hyp)、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷(Qug)、异槲皮苷(IQ)、番泻苷B(SeB)、紫云英苷(Ast)、番泻苷A(SeA)、迷迭香酸(RoA)、紫草酸(LiA)、丹酚酸B(SaB)、荷叶碱(Nuc)、丹酚酸A(SaA)、补骨脂素(P)、异补骨脂素(IP)、丹酚酸C(SaC)、大黄酸(Rhe)、新补骨脂异黄酮(Neo)、补骨脂宁(Cor)、隐丹参酮(Cry)、补骨脂酚(Bak)的对照品储备液；取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚对照品储备液至容量瓶中，甲醇定容，混匀，得到混合对照品储备液；(2)供试品溶液的制备取荷丹片，粉碎，置于容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量离心，移取上清液至容量瓶中，加甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液；(3)色谱条件吸取混合对照品储备液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中有效成分的含量；色谱条件：色谱柱C18、流速0.1-0.6mL/min；柱温20-60℃，以甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。其中，(1)对照品溶液的制备：取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成每1mL含有补骨脂苷(PO)2.058mg、异补骨脂苷(IPO)2.290mg、金丝桃苷(Hyp)1.988mg、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷(Qug)2.014mg、异槲皮苷(IQ)2.152mg、番泻苷B(SeB)1.082mg、紫云英苷(Ast)1.102mg、番泻苷A(SeA)0.224mg、迷迭香酸(RoA)1.064mg、紫草酸(LiA)1.228mg、丹酚酸B(SaB)2.144mg、荷叶碱(Nuc)1.012mg、丹酚酸A(SaA)1.120mg、补骨脂素(P)0.999mg、异补骨脂素(IP)2.072mg、丹酚酸C(SaC)0.348mg、大黄酸(Rhe)0.990mg、新补骨脂异黄酮(Neo)1.004mg、补骨脂宁(Cor)1.044mg、隐丹参酮(Cry)1.080mg、补骨脂酚(Bak)1.338mg的对照品储备液；取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚对照品储备液适量至10mL容量瓶中，甲醇定容，混匀，得浓度分别为：137.0μg/mL、78.23μg/mL、133.6μg/mL、165.4μg/mL、75.59μg/mL、6.372μg/mL、24.78μg/mL、8.212μg/mL、16.04μg/mL、16.73μg/mL、211.5μg/mL、53.81μg/mL、35.04μg/mL、21.42μg/mL、31.64μg/mL、5.907μg/mL、22.48μg/mL、4.030μg/mL、0.891μg/mL、13.29μg/mL、9.904μg/mL的混合对照品储备液。其中，(2)供试品溶液的制备：取荷丹片，粉碎，称取约0.5g，精密称定，置于10-50mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理10-25min，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量离心，精密移取上清液5mL至10mL容量瓶中，加25-100％甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液。优选的，(2)供试品溶液的制备：取荷丹片，粉碎，称取约0.5g，精密称定，置于25mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理15min，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量14000rpm离心10min，精密移取上清液5mL至10mL容量瓶中，加50％甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液。其中，(3)测定方法中，色谱条件：采用色谱柱ACQUITYBEHC18、流速0.3mL/min；柱温40℃，以甲酸水溶液和乙腈作为流动相，进行梯度洗脱。梯度洗脱过程如下：优选的，本专利技术所述的含量测定方法，包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成每1mL含有补骨脂苷(PO)2.058mg、异补骨脂苷(IPO)2.290mg、金丝桃苷(Hyp)1.988mg、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷(Qug)2.014mg、异槲皮苷(IQ)2.152mg、番泻苷B(SeB)1.082mg、紫云英苷(Ast)1.102mg、番泻苷A(SeA)0.224mg、迷迭香酸(RoA)1.064mg、紫草酸(LiA)1.228mg、丹酚酸B(SaB)2.144mg、荷叶碱(Nuc)1.012mg、丹酚酸A(SaA)1.120mg、补骨脂素(P)0.999mg、异补骨脂素(IP)2.072mg、丹酚酸C(SaC)0.348mg、大黄酸(Rhe)0.990mg、新补骨脂异黄酮(Neo)1.004mg、补骨脂宁(Cor)1.044mg、隐丹参酮(Cry)1.080mg、补骨脂酚(Bak)1.338mg的对照品储备液；取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.荷丹片中多种有效成分的含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)对照品溶液的制备/n取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成每1mL含有适量补骨脂苷(PO)、异补骨脂苷(IPO)、金丝桃苷(Hyp)、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷(Qug)、异槲皮苷(IQ)、番泻苷B(SeB)、紫云英苷(Ast)、番泻苷A(SeA)、迷迭香酸(RoA)、紫草酸(LiA)、丹酚酸B(SaB)、荷叶碱(Nuc)、丹酚酸A(SaA)、补骨脂素(P)、异补骨脂素(IP)、丹酚酸C(SaC)、大黄酸(Rhe)、新补骨脂异黄酮(Neo)、补骨脂宁(Cor)、隐丹参酮(Cry)、补骨脂酚(Bak)的对照品储备液；/n取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚对照品储备液至容量瓶中，甲醇定容，混匀，得到混合对照品储备液；/n(2)供试品溶液的制备/n取荷丹片，粉碎，置于容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量离心，移取上清液至容量瓶中，加甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液；/n(3)测定方法/n吸取混合对照品储备液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中有效成分的含量；/n色谱条件：色谱柱C18、流速0.1-0.6mL/min；柱温20-60℃，以甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。/n...

【技术特征摘要】
1.荷丹片中多种有效成分的含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)对照品溶液的制备
取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成每1mL含有适量补骨脂苷(PO)、异补骨脂苷(IPO)、金丝桃苷(Hyp)、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷(Qug)、异槲皮苷(IQ)、番泻苷B(SeB)、紫云英苷(Ast)、番泻苷A(SeA)、迷迭香酸(RoA)、紫草酸(LiA)、丹酚酸B(SaB)、荷叶碱(Nuc)、丹酚酸A(SaA)、补骨脂素(P)、异补骨脂素(IP)、丹酚酸C(SaC)、大黄酸(Rhe)、新补骨脂异黄酮(Neo)、补骨脂宁(Cor)、隐丹参酮(Cry)、补骨脂酚(Bak)的对照品储备液；
取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚对照品储备液至容量瓶中，甲醇定容，混匀，得到混合对照品储备液；
(2)供试品溶液的制备
取荷丹片，粉碎，置于容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量离心，移取上清液至容量瓶中，加甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液；
(3)测定方法
吸取混合对照品储备液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中有效成分的含量；
色谱条件：色谱柱C18、流速0.1-0.6mL/min；柱温20-60℃，以甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。


2.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，(1)对照品溶液的制备：取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成每1mL含有补骨脂苷(PO)2.058mg、异补骨脂苷(IPO)2.290mg、金丝桃苷(Hyp)1.988mg、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷(Qug)2.014mg、异槲皮苷(IQ)2.152mg、番泻苷B(SeB)1.082mg、紫云英苷(Ast)1.102mg、番泻苷A(SeA)0.224mg、迷迭香酸(RoA)1.064mg、紫草酸(LiA)1.228mg、丹酚酸B(SaB)2.144mg、荷叶碱(Nuc)1.012mg、丹酚酸A(SaA)1.120mg、补骨脂素(P)0.999mg、异补骨脂素(IP)2.072mg、丹酚酸C(SaC)0.348mg、大黄酸(Rhe)0.990mg、新补骨脂异黄酮(Neo)1.004mg、补骨脂宁(Cor)1.044mg、隐丹参酮(Cry)1.080mg、补骨脂酚(Bak)1.338mg的对照品储备液；
取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚对照品储备液适量至10mL容量瓶中，甲醇定容，混匀，得浓度分别为：137.0μg/mL、78.23μg/mL、133.6μg/mL、165.4μg/mL、75.59μg/mL、6.372μg/mL、24.78μg/mL、8.212μg/mL、16.04μg/mL、16.73μg/mL、211.5μg/mL、53.81μg/mL、35.04μg/mL、21.42μg/mL、31.64μg/mL、5.907μg/mL、22.48μg/mL、4.030μg/mL、0.891μg/mL、13.29μg/mL、9.904μg/mL的混合对照品储备液。


3.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，(2)供试品溶液的制备：
取荷丹片，粉碎，称取约0.5g，精密称定，置于10-50mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理10-25min，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量离心，精密移取上清液5mL至10mL容量瓶中，加25-100％甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液。


4.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，(2)供试品溶液的制备：
取荷丹片，粉碎，称取约0.5g，精密称定，置于25mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理15min，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量14000rpm离心10min，精密移取上清液5mL至10mL容量瓶中，加50％甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液。


5.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，(3)测定方法中，色谱条件：采用色谱柱ACQUITYBEHC18、流速0.3mL/min；柱温40℃，以甲酸水溶液和乙腈作为流动相，进行梯度洗脱。


6.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，(3)测定方法中，色谱条件，梯度洗脱过程如下：





7.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)对照品溶液的制备
取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成每1mL含有补骨脂苷(PO)2.058mg、异补骨脂苷(IPO)2.290mg、...

【专利技术属性】
技术研发人员：王跃飞，丁佳敏，王丹妮，曾英姿，安少凯，赵磊，
申请(专利权)人：南昌济顺制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江西;36