一种枸橼酸钠原料和/或含枸橼酸钠的药物中杂质的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种枸橼酸钠原料和/或含枸橼酸钠的药物中杂质的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：1)对照品溶液的制备；2)供试品溶液的制备；3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪。本发明专利技术检测方法，各色谱峰之间的分离度高，相互之间无干扰，可以同时实现对异柠檬酸钠、顺‑乌头酸、反‑乌头酸、柠康酸酐、衣康酸的准确检测，且操作简便，容易控制，检测成本低，并具有良好的线性关系、专属性、精密度、稳定性、灵敏度和重复性，回收率高，检测结果准确可靠，为监控含枸橼酸钠药物中杂质的含量提供了一种行之有效的检测方法，进一步保证了含枸橼酸钠产品的质量和患者的用药安全。

A method for the determination of impurities in raw materials and / or drugs containing sodium citrate

The invention provides a method for detecting impurities in sodium citrate raw materials and / or drugs containing sodium citrate, which adopts high performance liquid chromatography to detect, and the operation steps are as follows: 1) preparation of reference solution; 2) preparation of test solution; 3) absorption of reference solution and injection of test solution into liquid chromatograph respectively. The detection method of the invention has the advantages of high separation between various color peaks, no interference with each other, accurate detection of sodium isocitrate, cis-aconitic acid, trans-Aconitic acid, citric anhydride and itaconic acid at the same time, simple operation, easy control, low detection cost, good linearity, specificity, precision, stability, sensitivity and repeatability High yield, accurate and reliable detection results provide an effective detection method for monitoring the content of impurities in drugs containing sodium citrate, further ensuring the quality of products containing sodium citrate and drug safety of patients.

【技术实现步骤摘要】
一种枸橼酸钠原料和/或含枸橼酸钠的药物中杂质的检测方法
本专利技术属于化学中的分析检测领域，具体涉及一种枸橼酸钠原料和/或含枸橼酸钠的药物中杂质的检测方法。
技术介绍
药物中的杂质是影响药物纯度的主要因素，如果药物中所含杂质超过质量标准规定的限量要求，极有可能造成药物的外观性状、理化参数发生改变，甚至影响药物的稳定性，使药物活性降低而毒副作用增加，严重危害药物的产品质量和患者的用药安全；同时，药物中杂质的来源非常广泛，既可能来源于生产过程引入，也可能来源于贮藏过程的降解，其中，生产过程中的原料不纯以及制剂产品的稳定性是很重要的一个来源。连续性肾脏替代治疗(CRRT)主要用于危重症患者并发，急性肾衰竭时的抢救，为采用每天连续24或接近24h的一种连续性血液净化疗法以替代肾脏功能的技术。在血液净化过程中，体外循环的良好抗凝时保证治疗顺利进行的关键，枸橼酸钠抗凝具有良好的体外循环抗凝作用，又可避免出血并发症的发生，还具有改善滤过膜生物相容性等优，在肾替代治疗领域的应用日趋广泛。由于在CRRT治疗时需补充大量的置换液，枸橼酸钠抗凝置换液需要大量的使用，因此枸橼酸钠制剂中的杂质控制是产品使用安全的重要保证。枸橼酸钠具有生物降解性，枸橼酸钠经自然界大量的水稀释后，部分变成枸橼酸，二者共存于同一体系中。枸橼酸在水中经氧、热、光、细菌以及微生物的作用，很容易发生降解，降解为乌头酸(顺-乌头酸、反-乌头酸)，乌头酸二次降解为衣康酸、宁康酸酐。枸橼酸钠生产原料的制备方法主要有：柠檬酸+氢氧化钠法、柠檬酸+纯碱法、柠檬酸+小苏打法等方法，而生产用起始原料柠檬酸多采用发酵工艺生产，柠檬酸存在失去一个H2O而成顺乌头酸，再结合一个H2O转化为异柠檬酸的转化过程。因此，无论是原料引入还是制剂的降解，枸橼酸钠原料及其产品中均存在异柠檬酸钠、顺-乌头酸、反-乌头酸、柠康酸酐、衣康酸等多种杂质。然而，目前未见有枸橼酸钠中杂质含量的相关报道，自然也就无法从原料开始控制枸橼酸钠中杂质的引入以及储存过程中枸橼酸钠杂质的产生。为了进一步保证含枸橼酸钠的产品质量和患者的用药安全，有必要对枸橼酸钠原料以及生产的制剂产品质量进行监控，特别是，需要专利技术一种新方法，对枸橼酸钠原料以及产品中的杂质含量进行检测。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种枸橼酸钠原料和/或含枸橼酸钠的药物中杂质的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：1)对照品溶液的制备：取枸橼酸钠杂质对照品，加水溶液溶解，即得；2)供试品溶液的制备：取待测样品，加水溶液溶解，即得；3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以磷酸二氢钾溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，A：B的体积比为(90～100)：(10：0)。进一步地，步骤1)所述枸橼酸杂质对照品为异柠檬酸钠、顺-乌头酸、反-乌头酸、柠康酸酐和/或衣康酸，所述对照品溶液中每1ml含对照品各5～25μg，优选10μg。进一步地，步骤2)所述待测样品为枸橼酸钠原料或含枸橼酸钠的药物，待测样品与水溶液的质量体积比为5～15mg：1ml，优选10mg：1ml。进一步地，所述水溶液为流动相或水。进一步地，步骤3)所述磷酸二氢钾溶液浓度为0.1～1.0mol/L，优选0.5mol/L；所述磷酸二氢钾溶液用磷酸调pH值至1.0～3.0，优选2.0。进一步地，步骤3)所述色谱条件中色谱柱规格为250mm*4.6mm，5μm，优选色谱柱：WondasilC18-WR，250mm*4.6mm，5μm。进一步地，所述色谱条件中波长200～220nm，优选210nm；流速0.5～1.5ml/min，优选1.0ml/min；柱温25～35℃；进样量10～50μl，优选20μl。进一步地，步骤3)所述A：B的体积比为95：5。本专利技术还提供了一种含枸橼酸钠的原料和/或药物中杂质的含量测定方法，它是采用外标法计算，以前述方法检测得到的色谱图中色谱峰峰面积计算供试品中杂质的含量。进一步地，它是以一个浓度的对照品溶液色谱图中峰面积计算供试品中相应杂质的含量；或：先绘制系列浓度的对照品溶液色谱图中峰面积与其浓度之间的标准曲线，再用标准曲线计算供试品中相应杂质的含量。本专利技术提供了一种枸橼酸钠原料及其产品中杂质含量的新检测方法，各色谱峰之间的分离度高，相互之间无干扰，可以同时实现对异柠檬酸钠、顺-乌头酸、反-乌头酸、柠康酸酐、衣康酸的准确检测，而且，操作简便，容易控制，检测成本低，并具有良好的线性关系、专属性、精密度、稳定性、灵敏度和重复性，回收率高，检测结果准确、可靠，为监控含枸橼酸钠药物中杂质的含量提供了一种行之有效的检测方法，进一步保证了含枸橼酸钠产品质量和患者的用药安全。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1本专利技术检测条件下异柠檬酸钠对照品溶液的HPLC图图2本专利技术检测条件下顺-乌头酸对照品溶液的HPLC图图3本专利技术检测条件下反-乌头酸对照品溶液的HPLC图图4本专利技术检测条件下柠康酸酐对照品溶液的HPLC图图5本专利技术检测条件下衣康酸对照品溶液的HPLC图图6本专利技术检测条件下枸橼酸钠和异柠檬酸钠、顺-乌头酸、反-乌头酸、柠康酸酐、衣康酸混合溶液的HPLC图图7本专利技术检测条件下枸橼酸钠供试品溶液的HPLC图图8异柠檬酸钠线性曲线图图9枸橼酸钠线性曲线图图10顺-乌头酸线性曲线图图11反-乌头酸线性曲线图图12柠康酸酐酸线性曲线图图13衣康酸酐酸线性曲线图具体实施方式1、材料、试剂与仪器BS110S型电子天平购自梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司；UltiMate3000型高效液相色谱仪购自赛默飞公司，WondasilC18-WR(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱可购自岛津公司。1.2试剂及试药枸橼酸钠的批号为LRAB3326，来源于SIGMA-ALORICH；杂质异柠檬酸钠的批号为A0391392，来源于Acros；顺-乌头酸的批号为2-JLM-53-1，来源于TorontoResearchChemicals；反-乌头酸的批号为BCBS9279V，来源于SIGMA-ALORICH；柠康酸酐的批号为105-12-4，来源于CATOresearchChemicalsinc.；衣康酸的批号为BCBS8239V，来源于SIGMA-ALORICH。实施例1本专利技术检测枸橼酸钠中杂质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种枸橼酸钠原料和/或含枸橼酸钠的药物中杂质的检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：/n1)对照品溶液的制备：取枸橼酸钠杂质对照品，加水溶液溶解，即得；/n2)供试品溶液的制备：取待测样品，加水溶液溶解，即得；/n3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，色谱条件如下：/n色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以磷酸二氢钾溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，A：B的体积比为(90～100)：(10：0)。/n

【技术特征摘要】
1.一种枸橼酸钠原料和/或含枸橼酸钠的药物中杂质的检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：
1)对照品溶液的制备：取枸橼酸钠杂质对照品，加水溶液溶解，即得；
2)供试品溶液的制备：取待测样品，加水溶液溶解，即得；
3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，色谱条件如下：
色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以磷酸二氢钾溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，A：B的体积比为(90～100)：(10：0)。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤1)所述枸橼酸杂质对照品为异柠檬酸钠、顺-乌头酸、反-乌头酸、柠康酸酐和/或衣康酸，所述对照品溶液中每1ml含对照品各5～25μg，优选10μg。


3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2)所述待测样品为枸橼酸钠原料或含枸橼酸钠的药物，待测样品与水溶液的质量体积比为5～15mg：1ml，优选10mg：1ml。


4.根据权利要求1或3所述的检测方法，其特征在于：所述水溶液为流动相或水。


5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤3)所述磷酸二氢钾溶液浓度为0.1～1.0m...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘小英，崔盛，欧世荣，罗江涛，黄洪，李长生，陈红梅，
申请(专利权)人：成都青山利康药业有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51