一种荷丹片的多成分含量测定方法技术

本发明专利技术提供一种荷丹片的多成分含量测定方法，包括以下步骤：S1.对照品溶液的制备：分别精密称取丹参素、原儿茶酸、补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、金丝桃苷、番泻苷B、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚，溶解于溶剂中，得到对照品储备液；分别精密量取所述对照品储备液加溶剂稀释，得对照品溶液，备用；S2.荷丹片样品溶液的制备；S3.含量测定，采用高效液相色谱法测定。该测定方法测定了荷丹片中丹参素、原儿茶酸、金丝桃苷、番泻苷B、迷迭香酸等17种化学成分的含量，能更好的控制荷丹片的质量。

A Method for the Determination of Multicomponent Content in Hedan Tablets

The invention provides a multi-component content determination method for Hedan tablets, which includes the following steps: S1. Preparation of reference solution: precisely weighing Danshensu, protocatechuic acid, psoralen, isopsoralen, hyperoside, sennoside B, rosmarinic acid, shikonic acid, salvianolic acid B, nuciferine, salvianolic acid A, psoralen and isopsoralen, respectively. New Psoralea isoflavones, Psoralea corylifolia, Cryptotanshinone and Psoralea corylifolia phenol were dissolved in solvents to obtain reference reserve solution. The reference solution was diluted with solvent to obtain reference solution for reserve; preparation of sample solution of S2. Hedan tablet; determination of S3. content by high performance liquid chromatography. The content of 17 chemical components in Hedan tablets, such as danshensu, protocatechuic acid, hyperoside, sennoside B and rosmarinic acid, was determined by this method, which could better control the quality of Hedan tablets.

【技术实现步骤摘要】
一种荷丹片的多成分含量测定方法
本专利技术涉及医药检测领域，具体涉及一种荷丹片的多成分含量测定方法。
技术介绍
荷丹片是南昌济顺制药有限公司生产，由荷叶、丹参、补骨脂、山楂、番泻叶5味中药制备而成，具有化痰降浊，活血化瘀的功效，适用于高血脂症属痰浊夹瘀者。荷丹片质量标准收载于2015版《中国药典》，药典中质量标准仅对复方中的荷叶碱进行了含量测定。然而中药药效的产生是多种化学成分协同作用的结果，因此中药的质量控制也应选择多个化学成分作为检测指标。荷丹片成分较为复杂，单一成分作为指标成分具有一定的局限性。因此，对荷丹片进行多成分含量测定显得尤为重要。
技术实现思路
本专利技术的专利技术目的是，针对上述问题，提供一种荷丹片的多成分含量测定方法，测定了荷丹片中丹参素、原儿茶酸、金丝桃苷、番泻苷B、迷迭香酸等17种化学成分的含量，能更好的控制荷丹片的质量。为达到上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种荷丹片的多成分含量测定方法，包括以下步骤：S1.对照品溶液的制备：分别精密称取丹参素、原儿茶酸、补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、金丝桃苷、番泻苷B、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚，溶解于溶剂中，得到对照品储备液；分别精密量取所述对照品储备液加溶剂稀释，得对照品溶液，备用。S2.荷丹片样品溶液的制备取荷丹片，粉碎后精密称取，溶解于甲醇中，超声提取，离心，取上清液过滤，即得荷丹片样品溶液，备用。S3.含量测定：采用高效液相色谱法，在相同的检测条件下分别获得对照品溶液和对照品溶液的色谱图；并根据对照品溶液的浓度、对照品溶液在色谱图中的峰面积以及荷丹片样品溶液中与对照品溶液相对应成分在色谱图中的峰面积，计算荷丹片样品溶液中与对照品溶液相对应成分的含量。所述检测条件包括：色谱柱为Agilent-ZORBAXEclipsePlusC18；以体积分数0.2％甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流动相流速为0.3mL/min；柱温为25～40℃。优选的，步骤S1中，分别取丹参素、原儿茶酸、补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、金丝桃苷、番泻苷B、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚10mg，精密称定，置于10mL容量瓶中，加甲醇配制成每1mL含有丹参素1.056mg、原儿茶酸1.140mg、补骨脂苷1.004mg、异补骨脂苷1.015mg、金丝桃苷0.952mg、番泻苷B0.942mg、迷迭香酸1.004mg、紫草酸0.988mg、丹酚酸B1.007mg、荷叶碱0.939mg、丹酚酸A0.957mg、补骨脂素1.024mg、异补骨脂素0.901mg、新补骨脂异黄酮1.118mg、补骨脂宁0.983mg、隐丹参酮1.017mg、补骨脂酚0.813mg的对照品储备液。分别取丹参素、原儿茶酸、补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、金丝桃苷、番泻苷B、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚储备液适量加入50mL容量瓶定容至刻线，混匀，得浓度分别为(42.24μg/mL、11.40μg/mL、100.40μg/mL、50.75μg/mL、95.20μg/mL、9.42μg/mL、20.08μg/mL、19.76μg/mL、161.12μg/mL、75.12μg/mL、95.70μg/mL、51.10μg/mL、45.05μg/mL、5.59μg/mL、0.98μg/mL、20.34μg/mL、16.26μg/mL)的对照品溶液。优选的，步骤S2中，取荷丹片，粉碎，取约0.5g，精密称定，置25mL容量瓶中，加入适量甲醇，密塞，超声处理10min，放冷，定容至刻线，摇匀，取1mL加50％甲醇1:1稀释，混匀，14000rpm离心10min，取上清液，即得。优选的，超声处理条件为功率300W，频率40kHz。优选的，步骤S3中，所述梯度洗脱过程中，流动相A和流动相B的变化为：0-20min，流动相A95％-90％，流动相B5％-10％；20-30min，流动相A90％-80％,流动相B10％-20％；30-40min，流动相A80％-65％,流动相B20％-35％；40-60min，流动相A65％-5％,流动相B35％-95％。优选的，所述梯度洗脱过程中，流动相A和流动相B的变化为：0min，流动相A95％，流动相B5％；24min，流动相A87％,流动相B13％；30min，流动相A80％,流动相B20％；38min，流动相A70％,流动相B30％；55min，流动相A10％,流动相B90％。优选的，步骤S2中，检测波长为：0～4.6min(丹参素)，280nm；4.6～6.0min(原儿茶酸)，254nm；6.0～10.0min，280nm；10.0～24.0min(补骨脂苷、异补骨脂苷)，246nm；24.0～31min(金丝桃苷、番泻苷B)，254nm；31～32.6min(迷迭香酸)，280nm；32.6～34.0min(紫草酸)，254nm；340～36.0min(丹酚酸B、丹酚酸A、荷叶碱)，280nm；36.0～40.0min(补骨脂素、异补骨脂素)，246nm；40.0～55.0min(新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚)，254nm。由于采用上述技术方案，本专利技术具有以下有益效果：1.本专利技术所提供的测定方法，HPLC法具有灵敏度高、抗干扰强、操作简便等优点，能快速高效测定样本中成分的含量。我们采用HPLC法系统开展了荷丹片的质量控制研究，测定了荷丹片中丹参素、原儿茶酸、金丝桃苷、番泻苷B、迷迭香酸等17种化学成分的含量，能更好的控制荷丹片的质量。2.本专利技术的测定方法具有操作简便、快速，日内、日间精密度、重复性及稳定性良好，符合相关方法学的要求。说明书附图图1为本专利技术实施例1荷丹片样品溶液色谱图；图2为本专利技术实施例1对照品溶液色谱图；图中，1、丹参素；2、原儿茶酸；3、补骨脂苷；4、异补骨脂苷；5、金丝桃苷；6、番泻苷B；7、迷迭香酸；8、紫草酸；9、丹酚酸B；10、荷叶碱；11、丹酚酸A；12、补骨脂素；13、异补骨脂素；14、新补骨脂异黄酮；15、补骨脂宁；16、隐丹参酮；17、补骨脂酚具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例和附图，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。材料：本专利技术实施例使用的仪器见下表1。表1使用仪器本专利技术实施例使用试剂为：对照品：丹参素(批号：D-014-150318)，金丝桃苷(批号：J-012-150826)，番泻苷B(批号：F-004-150729)，紫草酸(批号：Z-008-150324)，荷叶碱(批号：H-042-141122)，丹酚酸A(批号：D-011-150916)，隐丹参酮(批号：Y-002-150802)，均购于成都瑞芬思生物科技有限公司；原儿茶酸(批号：W06-3-41)，迷迭香酸(批号：W10-3-3)，丹酚酸B本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.荷丹片的多成分含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.对照品溶液的制备：分别精密称取丹参素、原儿茶酸、补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、金丝桃苷、番泻苷B、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚，溶解于溶剂中，得到对照品储备液；分别精密量取所述对照品储备液加溶剂稀释，得对照品溶液，备用；S2.荷丹片样品溶液的制备：取荷丹片，粉碎后精密称取，溶解于甲醇中，超声提取，离心，取上清液过滤，即得荷丹片样品溶液，备用；S3.含量测定：采用高效液相色谱法，在相同的检测条件下分别获得对照品溶液和对照品溶液的色谱图；并根据对照品溶液的浓度、对照品溶液在色谱图中的峰面积以及荷丹片样品溶液中与对照品溶液相对应成分在色谱图中的峰面积，计算荷丹片样品溶液中与对照品溶液相对应成分的含量；所述检测条件包括：色谱柱为Agilent‑ZORBAX Eclipse Plus C18；以体积分数0.2％甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流动相流速为0.3mL/min；柱温为25～40℃。

【技术特征摘要】
1.荷丹片的多成分含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.对照品溶液的制备：分别精密称取丹参素、原儿茶酸、补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、金丝桃苷、番泻苷B、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚，溶解于溶剂中，得到对照品储备液；分别精密量取所述对照品储备液加溶剂稀释，得对照品溶液，备用；S2.荷丹片样品溶液的制备：取荷丹片，粉碎后精密称取，溶解于甲醇中，超声提取，离心，取上清液过滤，即得荷丹片样品溶液，备用；S3.含量测定：采用高效液相色谱法，在相同的检测条件下分别获得对照品溶液和对照品溶液的色谱图；并根据对照品溶液的浓度、对照品溶液在色谱图中的峰面积以及荷丹片样品溶液中与对照品溶液相对应成分在色谱图中的峰面积，计算荷丹片样品溶液中与对照品溶液相对应成分的含量；所述检测条件包括：色谱柱为Agilent-ZORBAXEclipsePlusC18；以体积分数0.2％甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流动相流速为0.3mL/min；柱温为25～40℃。2.根据权利要求1所述的荷丹片的多成分含量测定方法，其特征在于，步骤S1中，分别取丹参素、原儿茶酸、补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、金丝桃苷、番泻苷B、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚10mg，精密称定，置于10mL容量瓶中，加甲醇配制成每1mL含有丹参素1.056mg、原儿茶酸1.140mg、补骨脂苷1.004mg、异补骨脂苷1.015mg、金丝桃苷0.952mg、番泻苷B0.942mg、迷迭香酸1.004mg、紫草酸0.988mg、丹酚酸B1.007mg、荷叶碱0.939mg、丹酚酸A0.957mg、补骨脂素1.024mg、异补骨脂素0.901mg、新补骨脂异黄酮1.118mg、补骨脂宁0.983mg、隐丹参酮1.017mg、补骨脂酚0.813mg的对照品储备液；分别取所述对照品储备液加入50mL容量瓶定容...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾英姿，周万辉，安少凯，赵磊，程世娟，
申请(专利权)人：南昌济顺制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江西,36