用于联合非混合使用的含猪病原体的疫苗制造技术

本发明专利技术涉及第一疫苗和第二疫苗的组合产品，所述第一疫苗包含2型猪圆环病毒(PCV2)的非复制型免疫原和猪肺炎支原体的非复制型免疫原，所述第二疫苗包含活减毒的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒，所述组合产品用于通过第一疫苗和第二疫苗向动物的联合非混合施用而预防性治疗动物，对抗2型猪圆环病毒感染，猪肺炎支原体感染和PRRS病毒感染。本发明专利技术还涉及包含第一疫苗和第二疫苗的成套试剂盒和使用这些疫苗保护动物对抗此类感染的方法。

Vaccines containing swine pathogens for use in combination with non mixed use

The invention relates to a combination product of a first vaccine and a second vaccine, the first vaccine comprises a non replicating immunogen of a type 2 porcine circovirus (PCV2) and a non replicating immunogen of Mycoplasma hyopneumoniae, the second vaccine comprises a live attenuated porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus, and the combination product is used for joint non hybrid application of the first vaccine and the second vaccine to animals The preventive treatment of animals, against the type 2 porcine circovirus infection, Mycoplasma pneumoniae infection and PRRS virus infection. The invention also relates to a kit comprising a first vaccine and a second vaccine and a method for protecting animals against such infections using these vaccines.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于联合非混合使用的含猪病原体的疫苗专利技术的总体领域本专利技术总体涉及猪健康的领域。猪对许多致病性的微生物易感。感染的控制通常通过农场和饲料管理，用药物诸如抗病毒药物和抗生素治疗，或使用疫苗预防性治疗来完成。特别地，本专利技术涉及针对2型猪圆环病毒(PCV2或PCV-2)、猪肺炎支原体(Mycoplasmahyopneumoniae)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒和任选胞内劳森氏菌(Lawsoniaintracellularis)的疫苗，并且涉及使用此类疫苗保护动物对抗此类感染的方法。专利技术背景PCV-2与在幼猪中观察到的断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)相关。这种疾病于1991年首次在加拿大遇到。临床体征和病理学首次发表于1996年，并且包括进行性消瘦、呼吸困难、呼吸急促，和偶尔的黄疸(icterus)和黄疸病(jaundice)。Nayar等人(Can.Vet.J.Volume38,June1997)在具有PMWS的临床症状的猪中检测到猪圆环病毒，并得出结论认为，一种不同于被认为是PK-15细胞的天然栖息物的已知PCV的PCV可与PMWS相关。后来的出版物(Hamel等人，J.Virol.,72(6),5262-5267,1998；Meehan等人，J.Gen.Virol.,79,2171-2179,1998)证实了这些发现，并且提出(Meehan等人，同上)将新的致病性PCV称为PCV-2，而原始的PK-15细胞培养物分离物(Tischer等人，Nature295,64-66,1982)应该被称为PCV-1。PCV-2是一种小的(17-22nm)二十面体无包膜病毒，其含有环状单链DNA基因组。PCV-2基因组的长度为约1768bp。源自世界不同区域的PCV-2分离株似乎彼此密切相关并且显示约95％至99％的核苷酸序列同一性(Fenaux等人，J.Clin.Micorbiol.,38(7),2494-2503,2000)。PCV的ORF2编码病毒的衣壳蛋白。PCV2的ORF2基因编码约233个氨基酸的蛋白质。所有PCV-2分离株的ORF2基因共有91-100％的核苷酸序列同一性和90-100％推导的氨基酸序列同一性。猪肺炎支原体(Mhyo)是一种已知引起疾病猪地方性肺炎的细菌物种，所述猪地方性肺炎是一种影响猪的高度传染性和慢性疾病。Mhyo的尺寸小(400-1200nm)，具有小的基因组(893-920千碱基对(kb))，且缺乏细胞壁。Mhyo附着于猪肺部中的上皮细胞的纤毛。它们引起纤毛停止跳动，结块和纤毛丢失，最终导致上皮细胞死亡。这是见于患有猪地方性肺炎的猪的肺部中的病变的来源。这种损害阻碍了正常的纤毛清除，并且经常发生继发感染。这引起动物增重显著减少。以前估计美国的损失高达每年10亿美元。猪地方性肺炎在全世界流行，并且Mhyo存在于几乎每个猪群。由Mhyo在猪中存在诱导的免疫应答是缓慢且无效的。因此，这种疾病的治疗是最重要的，但仅限于抗生素，目前这些抗生素仅部分有效，因为它们没有完全消除感染。已发现疫苗降低疾病的严重程度，但没有完全预防受感染猪发生疾病。PRRS病毒于1987年首次在北美和中欧报道。PRRS病毒是一种小的包膜RNA病毒。它包含单链，正义的RNA基因组，其大小为约15千碱基。所述基因组含有九个开放阅读框。所述病毒是巢病毒目(Nidovirales)动脉炎病毒科(Arteriviridae)动脉炎病毒属(Arterivirus)的成员。PRRSV的两种原型毒株是北美毒株VR-2332和欧洲毒株Lelystad病毒(LV)。欧洲和北美PRRSV毒株引起类似的临床症状。最近在中国出现了北美基因型的高致病性毒株。此毒株HP-PRRSV比所有其他毒株毒性更强，并且在亚洲国家引起巨大损失。临床体征包括母猪的繁殖失败，诸如流产和产下死胎或木乃伊胎儿，以及耳朵和外阴的紫绀。在新生猪中，所述疾病引起呼吸窘迫，且对呼吸道感染诸如革拉泽氏病(Glässer'sdisease)的易感性增加。胞内劳森氏菌引起增殖性肠病，也称为回肠炎，这是全世界断奶后猪的常见肠道疾病。特征性病变是回肠肠隐窝中未成熟肠细胞的增殖；这些细胞通常在其顶端细胞质内含有致病细菌。在尸检时，通过1.5-2.5µm长的弧菌状细菌的可视化(特别是在肠细胞中，但是也经常在位于隐窝之间的固有层中，和在肠系膜淋巴结中的巨噬细胞内)，可以确认组织学病变为劳森氏菌阳性的。从肠细胞清除细菌导致相关增殖性病变的消退，表明细菌对隐窝的直接局部作用。在表现出疾病的动物中和仅表现出亚临床感染的动物二者中，已经使用PCR证实了这些病变中胞内劳森氏菌的存在。临床病例通常存在于生长-育肥期；在一些较老的肥育猪中，已记录到急性出血形式。针对上述鉴定的病原体的疫苗是众所周知的。用于针对PCV2感染预防性治疗动物(特别是猪)的常规疫苗可以基于作为(非复制型)免疫原的完整的灭活PCV-2病毒。此外，在本领域中已经显示ORF2编码的衣壳蛋白(例如当重组表达时)，适合作为2型猪圆环病毒的亚单位免疫原用于适当的疫苗中。这是可以理解的，因为该亚单位在循环系统中，以与病毒本身相同的方式出现(它形成病毒样颗粒)，本质的区别仅在于衣壳内不存在DNA和非结构蛋白的事实。在本领域中，几种针对PCV2的疫苗是商购可得的。Porcilis®PCV(可得自MSDAnimalHealth,Boxmeer，荷兰)是用于针对2型猪圆环病毒保护猪的疫苗，其用于3周及更大的猪中。当作为两针(两剂)疫苗给予时，免疫持续时间(DOI)为22周，几乎完全覆盖猪的育肥期。IngelvacCircoFlex®(可得自BoehringerIngelheim,Ingelheim)是用于针对2型猪圆环病毒保护猪的疫苗，其用于两周及更大的猪中。它仅作为一针(一剂)疫苗注册。Circovac®(可得自Merial，法国里昂)是用于针对2型猪圆环病毒保护猪的疫苗，其用于3周及更大的猪中。Suvaxyn®PCV(可得自Zoetis,Capellea/dIJssel，荷兰)是用于针对2型猪圆环病毒保护猪的疫苗，其用于3周及更大的猪中。其他PCV2疫苗描述于例如WO2007/028823、WO2007/094893和WO2008/076915中。关于猪肺炎支原体，存在许多商业疫苗，且这些通常用于大多数商业猪养殖操作中。通常，这些疫苗包含非复制型免疫原，诸如亚单位蛋白和/或菌苗(即，这样的组合物，其包含杀死细菌(作为完整细胞，(部分)裂解，均质化，弗氏压碎(Frenchpressed)，这种组合)，或包含另一种形式的杀死细菌，只要所述组合物源自杀死的细菌培养物)，其通常通过肠胃外注射施用。一些实例为：RespiSure®(Zoetis)、Ingelvac®M.hyo，和MycoFLEX®(BoehringerIngelheim)、Hyoresp®(Merial)、Stellamune®Mycoplasma(ElancoAnimalHealth)、Fostera®PCVMH(Zoetis)和M+Pac®和Porcilis®Mhyo(均可得自MSDAnimalHealth)。关于PRRS病毒，尽管灭活病毒疫苗已经被描述并且是商本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.第一疫苗和第二疫苗的组合产品，所述第一疫苗包含2型猪圆环病毒(PCV2)的非复制型免疫原和猪肺炎支原体的非复制型免疫原，所述第二疫苗包含活减毒的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒，所述组合产品用于通过第一疫苗和第二疫苗向动物的联合非混合施用而预防性治疗动物，对抗2型猪圆环病毒感染，猪肺炎支原体感染和PRRS病毒感染。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2017.04.13 EP 17166590.41.第一疫苗和第二疫苗的组合产品，所述第一疫苗包含2型猪圆环病毒(PCV2)的非复制型免疫原和猪肺炎支原体的非复制型免疫原，所述第二疫苗包含活减毒的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒，所述组合产品用于通过第一疫苗和第二疫苗向动物的联合非混合施用而预防性治疗动物，对抗2型猪圆环病毒感染，猪肺炎支原体感染和PRRS病毒感染。2.根据权利要求1使用的第一疫苗和第二疫苗的组合产品，其特征在于，所述联合非混合施用同时发生。3.根据前述权利要求中任一项使用的第一疫苗和第二疫苗的组合产品，其特征在于，所述第二疫苗被施用至动物的真皮中。4.根据前述权利要求中任一项使用的第一疫苗和第二疫苗的组合产品，其特征在于，所述第一疫苗包含胞内劳森氏菌的非复制型免疫原。5.根据权利要求4使用的第一疫苗和第二疫苗的组合产品，其特征在于，在施用疫苗前24小时内，将胞内劳森氏菌的免疫原加入第一疫苗。6.根据权利要求5使用的第一疫苗和第二疫苗的组合产品，其特征在于，胞内劳森氏菌的免疫原包含冷冻干燥的胞内劳森氏菌的杀死的全细胞。7.根据前述权利要求中任一项使用的第一疫苗和第二疫苗的组合产品，其特征在于，所述第一疫苗和第二疫苗通过单剂量施用。8.根据前述权利要求中任一项使用的第一疫苗和第二疫苗的组合产品，其特征在于，所述PCV2的非复制型免疫原是由PCV2的ORF2基因编码的重组表达的蛋白质。9.根据权利要求8使用的第一疫苗和第二疫苗的组合产品...

【专利技术属性】
技术研发人员：MH维特夫利特，E范登博恩，M斯诺，AAC雅各布斯，
申请(专利权)人：英特维特国际股份有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰,NL