【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及包含犬或猫可结晶片段区(fc区)的抗体或igg fc融合蛋白，其由于fc区中的一个或多个特定氨基酸取代而具有增强的半衰期。相对于包含未取代的犬或猫fc区的相应抗体或igg fc融合蛋白而言，半衰期的增加可能是在中等酸性的ph下对新生儿fc受体(fcrn)的结合亲和力增加的结果。还提供了包含这些抗体和/或igg融合蛋白的药物组合物。
技术介绍
1、药物抗体研究的一个重要目标是开发在相对较低的剂量和降低的给药频率下有效的抗体。这些属性有助于降低治疗成本，从而使更多的患者获得治疗，同时增加患者的便利性并提高患者的依从性，从而获得更好的治疗效果。为了实现这一目标，许多研究集中于调节igg同种型的治疗性抗体和所谓的新生儿fc受体(fcrn)之间的结合。这是因为fcrn与igg的结合被认为是维持和延长抗体血浆半衰期的关键因素。
2、fcrn是一种异二聚体，由mhc i类样α结构域和b2-微球蛋白(b2-m)亚单位组成。fcrn在几种组织中表达：最显著的是在血管内皮、肾、骨髓衍生细胞和血脑屏障中。fcrn在与其他igg fc受体的位置不同的igg fc中的某一位置与igg结合。igg与fcrn的结合高度依赖于ph，在低ph(例如低于ph 6.5)的内体区室中，这种结合以高亲和力发生，但在细胞表面的生理ph(例如ph 7.4)下具有明显降低的结合亲和力[参见，例如borok等人,j.biol.chem.290(7):4282–4290,(2015)]。在内体区室中，igg与fcrn的强结合保护了抗体免于被内体中的蛋白分
3、先前的研究表明，某些位置的某些突变会改变人igg与人fcrn的结合[参见例如，us 7,083,784、us 7,658,921、us 7,217,797、us 7,217,798、us 8,088,376、us10,336,818和wo2019/147973]。然而，人和犬或猫的igg蛋白在其氨基酸序列上存在许多差异，这使得人序列中的残基与犬或猫序列中的残基具有不同的环境和/或特性。这种可变性使得很难将一个物种的一种igg的特性直接转移至另一个物种的igg。最近一直在对伴侣动物进行大量相应的研究[参见例如，wo2018073185、wo2020082048、wo20210116560、us20200362035、us20200216536、wo2020191289、wo2021231464和us20210347854]。然而，任何特定的突变或突变组合可能对延长抗体的半衰期或其他属性具有显著不同的影响，这也使得很难预测这种突变对关键抗体性质(包括诱导抗药物(抗体)抗体的潜力)的影响。因此，仍然需要在犬和/或猫的igg蛋白中鉴定可以延长治疗性抗体和/或相应的治疗性fc融合蛋白的半衰期的新特异性取代/突变。
4、本文对任何参考文献的引用不应被解释为承认该参考文献可作为本申请的“现有技术”获得。
技术实现思路
1、本专利技术提供了具有增强的半衰期的抗体和igg fc融合蛋白。因此，在本专利技术的一个方面，提供了一种包含轻链和重链的抗体，其中重链包含可结晶片段区(fc区)，其包含在根据kabat的eu指数编号的如下氨基酸残基位置的氨基酸取代：氨基酸残基位置252、氨基酸残基位置254、氨基酸残基位置256、氨基酸残基位置308、氨基酸残基位置433、氨基酸残基位置434、氨基酸残基位置436或这些氨基酸位置的任何组合。在该类型的某些实施方案中，fc区为犬fc区(cfc)。在该类型的其他实施方案中，fc区是猫fc区(ffc)。
2、本专利技术还提供了包含可结晶片段区(fc区)的igg fc融合蛋白，其包含在根据kabat的eu指数编号的如下氨基酸残基位置的氨基酸取代：氨基酸残基位置252、氨基酸残基位置254、氨基酸残基位置256、氨基酸残基位置308、氨基酸残基位置433、氨基酸残基位置434、氨基酸残基位置436或这些氨基酸位置的任何组合。在该类型的某些实施方案中，fc区为犬fc区(cfc)。在该类型的其他实施方案中，fc区是猫fc区(ffc)。
3、在特定实施方案中，本专利技术的抗体或igg fc融合蛋白包含一个或多个这种氨基酸取代。在某些实施方案中，在氨基酸残基位置252用酪氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置254用苏氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置256用天冬氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置256用谷氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置308用脯氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置433用赖氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置433用亮氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置434用苯丙氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置434用组氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置434用酪氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置436用苏氨酸残基取代。
4、在相关实施方案中，本专利技术的抗体或igg fc融合蛋白包含两个或更多个这种氨基酸取代。在特定实施方案中，本专利技术的抗体或igg fc融合蛋白包含在氨基酸残基位置252用酪氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置256用天冬氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置308用脯氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置434用酪氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置433用赖氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置434用苯丙氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置433用赖氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置434用酪氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置433用亮氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置434用苯丙氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置433用亮氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置434用酪氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置256用天冬氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置434用酪氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置434用酪氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置436用苏氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置252用酪氨酸残基取代，在氨基酸残基位置254用苏氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置256用谷氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置256用天冬氨酸残基取代，在氨基酸残基位置308用脯氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置434用酪氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置433用赖氨酸残基取代，在氨基酸残基位置434用苯丙氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置436用苏氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置433用赖氨酸残基取代，在氨基酸残基位置434用酪氨酸残基取代，并且在氨基酸残基位置436用苏氨酸残基取代。在其他实施方案中，在氨基酸残基位置433用亮氨酸残基取代，在氨基酸残本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.包含可结晶片段区(Fc区)的抗体或IgG Fc融合蛋白，所述可结晶片段区包含一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸残基取代位于选自252、254、256、308、433、434、436或其任意组合的氨基酸残基位置，其中所述氨基酸残基位置根据Kabat的EU指数编号：
2.根据权利要求1所述的抗体或IgG Fc融合蛋白，其中所述cFc或所述fFc在氨基酸残基位置包含两个或更多个氨基酸残基取代，所述氨基酸残基取代选自由以下各项组成的组：
3.根据权利要求1或2所述的抗体或IgG Fc融合蛋白，其中所述fFc选自由IgG-la Fc、IgG-1am Fc、IgG-lb Fc、IgG-1bm Fc、IgG-2Fc和IgG-2m Fc组成的组。
4.根据权利要求3所述的抗体或IgG Fc融合蛋白，其中所述fFc包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:9、与SEQ ID NO:9具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、SEQ ID NO:10、与SEQ ID NO:10具有至少90％、95％、97％、9
5.根据权利要求1或2所述的抗体或IgG Fc融合蛋白，其中所述cFc选自由IgG-A Fc、IgG-Am Fc、IgG-B Fc、IgG-Bm Fc、IgG-CFc、IgG-Cm Fc、IgG-D Fc和IgG-Dm Fc组成的组。
6.根据权利要求5所述的抗体或IgG Fc融合蛋白，其中所述cFc包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:1、与SEQ ID NO:1具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、SEQ ID NO:2、与SEQ ID NO:2具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、SEQ ID NO:3、与SEQ ID NO:3具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、SEQ ID NO:4、与SEQ ID NO:4具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、SEQ ID NO:5、与SEQ ID NO:5具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、SEQ ID NO:6、与SEQ ID NO:6具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、SEQ ID NO:7、与SEQ ID NO:7具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、SEQ ID NO:8、与SEQ ID NO:8具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列；并且其中所述cFc保留所述一个或多个氨基酸取代。
7.根据权利要求1、2、5或6中任一项所述的抗体或IgG Fc融合蛋白，其中所述cFc进一步包含犬铰链区，所述犬铰链区包含与选自SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％或95％同一性的氨基酸序列。
8.根据权利要求7所述的抗体或IgG Fc融合蛋白，其中所述cFc进一步包含犬铰链区，所述犬铰链区包含选自SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16的氨基酸序列。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的抗体或IgG Fc融合蛋白，其与包含相应野生型犬Fc或猫Fc的相应抗体或IgG Fc融合蛋白的半衰期相比具有增加的半衰期。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的抗体或IgG Fc融合蛋白，其在中等酸性pH下对其新生儿Fc受体(FcRn)具有增强的结合亲和力。
11.根据权利要求1、2和5-10中任一项所述的IgG Fc融合蛋白，其为犬IL-13Rα1-犬IgG融合蛋白，其进一步包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:17具有至少90％、95％、97％、98％、99％...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.包含可结晶片段区(fc区)的抗体或igg fc融合蛋白，所述可结晶片段区包含一个或多个氨基酸取代，其中所述一个或多个氨基酸残基取代位于选自252、254、256、308、433、434、436或其任意组合的氨基酸残基位置，其中所述氨基酸残基位置根据kabat的eu指数编号：
2.根据权利要求1所述的抗体或igg fc融合蛋白，其中所述cfc或所述ffc在氨基酸残基位置包含两个或更多个氨基酸残基取代，所述氨基酸残基取代选自由以下各项组成的组：
3.根据权利要求1或2所述的抗体或igg fc融合蛋白，其中所述ffc选自由igg-la fc、igg-1am fc、igg-lb fc、igg-1bm fc、igg-2fc和igg-2m fc组成的组。
4.根据权利要求3所述的抗体或igg fc融合蛋白，其中所述ffc包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：seq id no:9、与seq id no:9具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:10、与seq id no:10具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:11、与seq id no:11具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:12、与seq id no:12具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:50、与seq id no:50具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:51、和与seq id no:51具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列；并且其中所述ffc保留所述一个或多个氨基酸取代。
5.根据权利要求1或2所述的抗体或igg fc融合蛋白，其中所述cfc选自由igg-a fc、igg-am fc、igg-b fc、igg-bm fc、igg-cfc、igg-cm fc、igg-d fc和igg-dm fc组成的组。
6.根据权利要求5所述的抗体或igg fc融合蛋白，其中所述cfc包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：seq id no:1、与seq id no:1具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:2、与seq id no:2具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:3、与seq id no:3具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:4、与seq id no:4具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:5、与seq id no:5具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:6、与seq id no:6具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:7、与seq id no:7具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列、seq id no:8、与seq id no:8具有至少90％、95％、97％、98％、99％同一性的氨基酸序列；并且其中所述cfc保留所述一个或多个氨基酸取代。
7.根据权利要求1、2、5或6中任一项所述的抗体或igg fc融合蛋白，其中所述cfc进一步包含犬铰链区，所述犬铰链区包含与选自seq id no:13、seq id no:14、seq id no:15和seq id no:16的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％或95％同一性的氨基酸序列。
8.根据权利要求7所述的抗体或igg fc融合蛋白，其中所述cfc进一步包含犬铰链区，所述犬铰链区包含选自seq id no:13、seq id no:14、seq id no:15和seq id no:16的氨基酸序列。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的抗体或igg fc融合蛋白，其与包含相应野生型犬fc或猫fc的相应抗体或igg fc融合蛋白的半衰期相比具有增加的半衰期。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的抗体或igg fc融合蛋白，其在中等酸性ph下对其新生儿fc受体(fcrn)具有增强的结合亲和力。
11.根据权利要求1、2和5-10中任一项所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：M·莫尔塞耶，S·D·斯托弗，
申请(专利权)人：英特维特国际股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。