青春双歧杆菌CCFM1062、其发酵食品及菌剂制备方法技术

本发明专利技术公开了青春双歧杆菌CCFM1062、其发酵食品及菌剂制备方法，青春双歧杆菌CCFM1062能够显著降低血清中低密度脂蛋白胆固醇、谷丙转氨酶、谷草转氨酶的水平；显著改善高脂饮食诱导的血糖升高且改善胰岛素抵抗；显著降低肝脏中总胆固醇、甘油三酯的水平，减少肝脏脂肪变性、肝脏小叶炎症以及肝脏气球样病变；能够显著增加肝脏中超氧化物歧化酶水平；显著降低血浆中D‑乳酸的水平，改善肠道通透性增加；显著改善二型糖尿病造成的空腹血糖异常；显著改善二型糖尿病造成的胰腺和肝脏组织损伤；此外青春双歧杆菌CCFM1062对全氟辛酸有较强的吸附能力，减少全氟辛酸在体内吸收。

Bifidobacterium adolescentis ccfm1062, its fermented food and preparation method of fungicide

The invention discloses Bifidobacterium adolescentis ccfm1062, its fermented food and preparation method of bacterial agent. Bifidobacterium adolescentis ccfm1062 can significantly reduce the levels of serum low-density lipoprotein cholesterol, glutamic pyruvic transaminase and glutamic oxaloacetic transaminase; significantly improve the blood glucose rise induced by high-fat diet and improve insulin resistance; significantly reduce the levels of total cholesterol and triglyceride in liver, and reduce It can significantly increase the level of superoxide dismutase in the liver, significantly reduce the level of D \u2011 lactate in the plasma, improve the intestinal permeability, significantly improve the fasting blood glucose abnormality caused by type 2 diabetes, significantly improve the pancreatic and liver tissue damage caused by type 2 diabetes, as well as the Bifidobacterium adolescentis Ccfm1062 has a strong adsorption capacity for PFOA, reducing the absorption of PFOA in vivo.

【技术实现步骤摘要】
青春双歧杆菌CCFM1062、其发酵食品及菌剂制备方法
本专利技术属于微生物
，具体涉及青春双歧杆菌CCFM1062、其发酵食品及菌剂制备方法。
技术介绍
肠道是一个高度复杂的生态系统，细菌种类繁多且相互作用，肠道菌群的组成影响宿主对外源化合物和病原体的敏感性，而宿主的生理状态影响肠道微生物菌群的组成。肝脏是和肠道联系最为密切的器官，肠道吸收的营养物质和脂肪随着血液进入肝脏循环，以供给全身能量所需。大量研究表明，非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD)的形成跟肠道菌群失调有着密切的联系，肠道菌群失调能够促使肠道屏障破坏从而促进肠道通透性增加。随着肠道通透性的增加，肠道中的细菌所产的内毒素以及肠道损伤的产物更容易随血液进入肝脏对肝细胞造成刺激以致损伤，使NAFLD进一步恶化为更为严重的肝脏疾病，因而调节肠道菌群、保护肠道屏障是保护肝脏的重要方式。有研究表明，职业暴露于PFOA的工人的因脂肪肝死亡风险增加，因此日常生活中的PFOA暴露，是人类肝脏疾病发病的潜在风险。益生菌被认为是一种无毒、无害，对人体健康具有一定促进作用的微生物。大量研究结果表明，多种益生菌对动物疾病具有显著的改善作用。
技术实现思路
本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围。鉴于上述的技术缺陷，提出了本专利技术。因此，作为本专利技术其中一个方面，本专利技术克服现有技术中存在的不足，提供青春双歧杆菌CCFM1062，其保藏编号为GDMCCNo：60707。作为本专利技术的另一个方面，本专利技术克服现有技术中存在的不足，提供制备青春双歧杆菌CCFM1062菌剂的方法。为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：制备青春双歧杆菌CCFM1062菌剂的方法，其包括，菌株培养基的制备；菌株保护剂的制备；接种培养、冻干；所述菌株培养基，为改良MRS培养基，其配方包括胰蛋白胨8～14g、牛肉浸膏8～12g、酵母粉4～7g、葡萄糖15～25g、醋酸钠4～6g、柠檬酸氢二铵1.5～2.5g、磷酸氢二钾1～3g、七水硫酸镁0.4～0.6g、吐温-800.8～1.2mL、一水合硫酸锰0.2～0.3g、半胱氨酸盐酸盐0.4～0.6g，水1000mL；调整其pH为6.5±0.2。作为本专利技术所述的制备青春双歧杆菌CCFM1062菌剂的方法的一种优选方案：所述菌株保护剂，其配方为100g/L～150g/L脱脂奶粉、100g/L～150g/L麦芽糊精、140g/L～160g/L海藻糖、余量为水，冻干，得到冻干保护剂。作为本专利技术所述的制备青春双歧杆菌CCFM1062菌剂的方法的一种优选方案：所述菌株保护剂，其配方为120g/L脱脂奶粉、120g/L麦芽糊精、150g/L海藻糖、余量为水，冻干，得到冻干保护剂。作为本专利技术所述的制备青春双歧杆菌CCFM1062菌剂的方法的一种优选方案：所述接种培养、冻干，包括，青春双歧杆菌CCFM1062以5％的接种量接种到在119～123℃条件下灭菌15～25min后的所述菌株培养基中，在温度35～39℃厌氧条件下培养24～48h，用pH为6.8～7.2磷酸盐缓冲液清洗2～4次，用所述菌株保护剂重悬，使菌浓达到1010CFU/mL；接着，让该菌株重悬液在温度37℃厌氧条件下预培养50～70min，再在-15～-20℃预冻8～14h，之后真空冷冻干燥。作为本专利技术所述的制备青春双歧杆菌CCFM1062菌剂的方法的一种优选方案：青春双歧杆菌CCFM1062以5％的接种量接种到在121℃条件下灭菌20min后的培养基中，在温度37℃厌氧条件下培养24h，用pH为6.8磷酸盐缓冲液清洗2～4次，用所述的保护剂重悬，使菌浓达到1010CFU/mL；接着，让该悬浮液在温度37℃厌氧条件下预培养60min，再在-15℃预冻12h，之后真空冷冻干燥。作为本专利技术其中一个方面，本专利技术克服现有技术中存在的不足，提供一种发酵食品。为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一种发酵食品，其中：使用所述的青春双歧杆菌CCFM1062菌剂进行发酵，所述菌剂含有大于106CFU/g的活性青春双歧杆菌CCFM1062。作为本专利技术所述的发酵食品的一种优选方案：所述发酵食品包括乳制品、豆制品与果蔬制品。作为本专利技术所述的发酵食品的一种优选方案：所述发酵食品，包括西番莲核桃发酵乳饮料。作为本专利技术所述的发酵食品的一种优选方案：所述西番莲核桃发酵乳饮料，其制备方法为，核桃仁用0.5％的NaOH水溶液煮沸5min，将碱液去除，去除核桃仁表面的种皮，用清水洗涤去除核桃仁表面残留的碱液，按照料水比1：8打浆，西番莲果实洗净后打浆，核桃仁浆液与西番莲浆液以9：1的比例混合后过滤，均质，补加2％木糖醇，115℃，灭菌20min，将所述青春双歧杆菌CCFM1062菌剂以109CFU/mL接种到西番莲核桃仁的混合物中，37℃恒温培养箱中发酵12h。本专利技术的有益效果：本专利技术提供的青春双歧杆菌CCFM1062能够显著降低血清中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的水平；显著改善高脂饮食诱导的血糖升高且改善胰岛素抵抗；显著降低肝脏中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的水平，显著降低肝脏中IL-1β的水平同时减少肝脏脂肪变性、肝脏小叶炎症以及肝脏气球样病变；能够显著增加肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)水平；显著降低血浆中D-乳酸(D-LA)的水平，改善肠道通透性增加；显著改善二型糖尿病造成的空腹血糖异常；显著改善二型糖尿病造成的胰腺和肝脏组织损伤；此外青春双歧杆菌CCFM1062对全氟辛酸(PFOA)有较强的吸附能力，减少PFOA在体内吸收，具有缓解PFOA毒性的能力；显著提高NAFLD肠道中Parabacteroides属的丰度，提高肠道中有益菌群的比例，预防和减少非酒精性脂肪性肝病、全氟辛酸毒性、肥胖、二型糖尿病以及癫痫等疾病发生的药物组合物与发酵食品，具有非常广泛的应用前景。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：图1是青春双歧杆菌CCFM1062的菌落形态；图2是青春双歧杆菌CCFM1062对NAFLD小鼠肠道中Parabacteroides属等特征性菌群的影响；图3是青春双歧杆菌CCFM1062对NAFLD小鼠血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的影响；图4是青春双歧杆菌CCFM1062对NAFLD小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)的影响；图5是青春双歧杆菌CCFM1062对NAFLD小鼠血清谷草转氨酶(AST)水平的影响；图6是青春双歧杆菌CCFM1062对NAFLD小鼠空腹血糖的影响；图7是青春双歧杆菌CCFM1062对NAFLD小鼠的胰岛素抵抗的影响；图8是青春双歧杆菌CCFM1062对NAFLD小鼠血浆中D-乳酸(D-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.青春双歧杆菌CCFM1062，其保藏编号为GDMCC No：60707。

【技术特征摘要】
1.青春双歧杆菌CCFM1062，其保藏编号为GDMCCNo：60707。2.制备青春双歧杆菌CCFM1062菌剂的方法，其特征在于：包括，菌株培养基的制备；菌株保护剂的制备；接种培养、冻干；所述菌株培养基，为改良MRS培养基，其配方包括胰蛋白胨8～14g、牛肉浸膏8～12g、酵母粉4～7g、葡萄糖15～25g、醋酸钠4～6g、柠檬酸氢二铵1.5～2.5g、磷酸氢二钾1～3g、七水硫酸镁0.4～0.6g、吐温-800.8～1.2mL、一水合硫酸锰0.2～0.3g、半胱氨酸盐酸盐0.4～0.6g，水1000mL；调整其pH为6.5±0.2。3.如权利要求2所述的制备青春双歧杆菌CCFM1062菌剂的方法，其特征在于：所述菌株保护剂，其配方为100g/L～150g/L脱脂奶粉、100g/L～150g/L麦芽糊精、140g/L～160g/L海藻糖、余量为水，冻干，得到冻干保护剂。4.如权利要求3所述的制备青春双歧杆菌CCFM1062菌剂的方法，其特征在于：所述菌株保护剂，其配方为120g/L脱脂奶粉、120g/L麦芽糊精、150g/L海藻糖、余量为水，冻干，得到冻干保护剂。5.如权利要求2所述的制备青春双歧杆菌CCFM1062菌剂的方法，其特征在于：所述接种培养、冻干，包括，青春双歧杆菌CCFM1062以5％的接种量接种到在119～123℃条件下灭菌15～25min后的所述菌株培养基中，在温度35～39℃厌氧条件下培养24～48h，用pH为6.8～7.2磷酸盐缓冲液清洗2～4次，用所述菌株保护剂重悬，使菌浓达到...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈卫，王刚，焦婷，赵建新，张灏，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32