一种植物乳杆菌生产透明质酸酶发酵优化工艺制造技术

技术编号:22462283 阅读:49 留言:0更新日期:2019-11-06 06:46
本发明专利技术涉及微生物发酵技术领域,具体涉及一种植物乳杆菌生产透明质酸酶发酵优化工艺,工艺包括以下步骤:配制种子培养基;向种子培养基中接入植物乳杆菌,培养获得液体发酵菌种;配制液体发酵培养基;将液体发酵菌种接入液体发酵培养基中,培养后结束发酵;将发酵液离心后,收集上清液,即为粗酶液。本发明专利技术创造性地通过调整发酵培养转速、通气量,对菌体进行耐氧性驯化培养,使植物乳杆菌能在好氧条件下正常发酵生产透明质酸酶;通过条件优化,使植物乳杆菌代谢产物中透明质酸酶产量大幅提升:此生产工艺制得的发酵液所含透明质酸酶为9604IU/mL,比工艺优化前提高了40%,便于后续的分离纯化;本发明专利技术生产工艺简便、稳定性高、便于扩大规模生产和推广。

Optimization of hyaluronidase production by Lactobacillus plantarum

【技术实现步骤摘要】
一种植物乳杆菌生产透明质酸酶发酵优化工艺
本专利技术涉及微生物发酵
,具体涉及一种植物乳杆菌生产透明质酸酶发酵优化工艺。
技术介绍
透明质酸是构成宿主结缔组织细胞外基质的主要成分,而透明质酸酶(hyaluronidase,HAase)是能特异性分解细胞外基质成分——透明质酸(HA)使其产生低分子化作用的一种蛋白水解酶。透明质酸酶通过作用于细胞外基质而影响细胞的增殖、分化与迁移,并在胚胎发育和肿瘤发生发展过程中发挥作用,因此对有效控制病原菌感染、防止其扩散具有举足轻重的作用,对临床细菌感染性疾病的防治也具有重要意义。透明质酸酶虽然分布广,但在过去很长一段时间内由于分离纯化非常困难,没有得到很好的开发利用,是一类被忽视的酶。同时由于透明质酸酶的来源非常有限,价格昂贵,很大程度上也限制了它的应用范围。直到近十几年,研究者才开始对HA和HAase表现出浓厚的兴趣,试图探求其在众多生物学过程中的作用。研究发现透明质酸酶可通过降解组织中的HA,增加膜的通透性,降低黏度,促进注射液的扩散,这些现象称为透明质酸酶的扩散作用。基于这一性质,透明质酸酶可应用于治疗过程,以加快吸收速度,促进注射液吸本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种植物乳杆菌生产透明质酸酶发酵优化工艺,其特征在于,工艺包括以下步骤:S1:配制种子培养基,所述种子培养基包括诱导剂、氮源、无机盐和表面活性剂,所述诱导剂同时可作为碳源利用,为5g/L分子量1000kDa‑2000kDa的透明质酸,所述氮源为复合氮源,包括5g/L蛋白胨、10g/L酵母粉、1.5g/L硫酸铵,所述无机盐包括0.1g/L氯化钠、0.1g/L硫酸亚铁、0.03g/L硫酸锰、0.04g/L氯化钙、0.25g/L硫酸镁,所述表面活性剂为1mL/L吐温‑80或0.05g/L乙二胺四乙酸二钠;S2:向种子培养基中接入植物乳杆菌,培养获得液体发酵菌种;S3:配制液体发酵培养基,所述液体...

【技术特征摘要】
1.一种植物乳杆菌生产透明质酸酶发酵优化工艺,其特征在于,工艺包括以下步骤:S1:配制种子培养基,所述种子培养基包括诱导剂、氮源、无机盐和表面活性剂,所述诱导剂同时可作为碳源利用,为5g/L分子量1000kDa-2000kDa的透明质酸,所述氮源为复合氮源,包括5g/L蛋白胨、10g/L酵母粉、1.5g/L硫酸铵,所述无机盐包括0.1g/L氯化钠、0.1g/L硫酸亚铁、0.03g/L硫酸锰、0.04g/L氯化钙、0.25g/L硫酸镁,所述表面活性剂为1mL/L吐温-80或0.05g/L乙二胺四乙酸二钠;S2:向种子培养基中接入植物乳杆菌,培养获得液体发酵菌种;S3:配制液体发酵培养基,所述液体发酵培养基包括诱导剂、氮源、无机盐和表面活性剂,所述诱导剂同时作为碳源利用,为1-10g/L分子量500KDa-1300kDa的透明质酸,所述氮源为复合氮源,包括5g/L蛋白胨、10g/L酵母粉、2g/L硫酸铵,所述无机盐包括0.1g/L氯化钠、0.1g/L硫酸亚铁、0.02g/L硫酸锰、0.05g/L氯化钙、0.2g/L硫酸镁、0.4g/L磷酸二氢钾,所述表面活性剂为0.5mL/L-1.5mL/L吐温-80或0.01g/L-0.08g/L乙二胺四乙酸二钠;S4:将液体发酵菌种接入液体发酵培养基中,培养后结束发酵;S5:将发酵液离心后,收集上清液,即为粗酶液。2.如权利要求1所述的一种植物乳杆菌生产透明质酸酶发酵优化工艺,其特征在于,所述植物乳杆菌为植物乳杆菌CnT012-56,该菌株的分类命名为植物乳杆菌Lactobacillusplantarum,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号...

【专利技术属性】
技术研发人员:高瑞韩鹏韩秀云齐宁牛贵清张彬赵艳辉郭弘彦梁贵彬王娜刘文彬
申请(专利权)人:山东安华生物医药股份有限公司
类型:发明
国别省市:山东,37

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