本发明专利技术涉及金匮要略方诃梨勒散水提物在制备抑制食管癌细胞药物中的应用，可有效解决制备抑制食管癌EC9706、Eca109、EC‑1、TE‑1细胞的药物问题，诃梨勒散药物为诃子10g，加药物重量15‑20的水浸泡1小时，电炉武火煮沸，文火煎煮1h，过滤，滤液浓缩，该浓缩液具有显著抑制食管癌EC9706、Eca109、EC‑1、TE‑1细胞的功效，有效用于制备抑制食管癌EC9706、Eca109、EC‑1、TE‑1细胞的药物。本发明专利技术原料丰富，制备方法简单，易生产制备，为研究抑制食管癌细胞迁移、增殖、浸润的方剂提供了理论和技术支持，治疗食管癌有实际的临床意义。
Application of water extract of \jinguiyaolue Decoction\ in the preparation of drugs for inhibiting esophageal cancer cells
【技术实现步骤摘要】
金匮要略方诃梨勒散水提物在制备抑制食管癌细胞药物中的应用
本专利技术涉及医药，特别是一种金匮要略方诃梨勒散水提物在制备抑制食管癌细胞药物中的应用。
技术介绍
食管癌主要有食管鳞癌和腺癌两种病理类型，据2018年全世界癌症报告显示，亚洲仍然是食管鳞癌的高危地区，在我国主要以食管鳞癌为主，长期吸烟，过度饮酒，饮食过快、过热，喜爱食用腌菜，爱咀嚼槟郎，心理因素，家族史，饮食习惯，健康意识等与食管癌的发生关系密切。引起食管癌的主要原因总结为吸烟、肥胖和胃酸反流等。食管癌早期症状大多不甚明显，部分患者会出现进食吞咽时梗塞感，剑突或胸骨后不舒服或疼痛感，食物通过缓慢及滞留感，咽喉干燥和紧缩感等表现；临床诊治大多数食管癌患者发现吞咽困难时已经发生转移，处于中晚期，这时会出现进行性吞咽困难、体重下降、烧心、消化道出血等表现，用药效果不甚明显，预后效果很差，失去了根治机会，5生存率只有10％左右，但早期食管癌(上皮内癌和黏膜内癌)的5年生存率可达90％以上。目前虽然关于食管癌早期诊断、早期治疗的技术有所提高，但大部分食管癌患者依然是出现了转移才明确诊断的。目前西医治疗食管癌早期及中期以手术切除为主，配合放、化疗及靶向治疗为辅。但食管癌起病多隐匿，早期症状不明显，很多患者确诊时已发展至晚期，有手术机会的患者仅占20％～30％。90％以上的食管癌患者需要接受化疗，但由于食管癌常发生淋巴结复发转移，因此难以根治，且以化疗为主结合放疗的综合治疗手段，多以铂类药物为主，多年来的临床实践证明，此疗效并不十分理想，存在无效、复发、耐药、转移等问题，不良反应明显，治疗后5年存活率仅为14％，且放疗、化疗等手段主要的作用机制在于直接杀伤肿瘤细胞，但同时正常细胞也被大量杀伤，进而使人体的免疫系统收到破坏。这种治疗方式多数情况下不能从根本上治疗癌症，甚至会加重免疫系统的破坏并导致基因突变，因此食管癌的治疗亟需除手术以外的其他方法治疗。食管癌患者特别是中晚期错过手术时机的病人，疗效更差。而中医药在扶助人体正气，调整人体气血阴阳平衡方面有不可替代的优势，，有广阔的应用空间，对中晚期病人可以单独使用，也可以联合用药，对于年老且不能耐受手术的病人的应用，对于复发转移病人的运用，对于手术后病人的运用。因此运用中医药治疗食管癌成为越来越重要的手段。现代科技突飞猛进，在医学上运用现代分子生物学技术对食管癌已经进行了许多方面的研究，指出食管癌的恶性特征之一是其细胞的无限增值能力，与其他多数癌症一样，导致食管癌患者死亡的重要原因是转移和浸润，同时也是临床面临的最大治疗障碍。增殖、迁移、浸润是肿瘤细胞重要的生物学特性，所以，找到可以抑制食管癌细胞迁移、增殖、浸润的方剂，那么在食管癌的临床治疗中肯定会有深远意义。但至今未见有公开报导。
技术实现思路
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种金匮要略方诃梨勒散水提物在制备抑制食管癌细胞药物中的应用，可有效解决制备抑制食管癌EC9706、Eca109、EC-1、TE-1细胞的药物问题。本专利技术解决的技术方案是，从《金匮要略》157方中(除去与《伤寒论》重复方剂)筛选出诃梨勒散，诃梨勒散药物为诃子10g，加药物重量15-20的水浸泡1小时，根据金匮要略原方煎煮方法要求，电炉武火煮沸，文火煎煮约1h，纱布滤去残渣，过滤，滤液浓缩至含生药量为0.5g/mL的浓缩液，该浓缩液具有显著抑制食管癌EC9706、Eca109、EC-1、TE-1细胞的功效，有效用于制备抑制食管癌EC9706、Eca109、EC-1、TE-1细胞的药物。本专利技术原料丰富，制备方法简单，易生产制备，开拓了诃梨勒散的药用价值和商业价值，特别是为研究抑制食管癌细胞迁移、增殖、浸润的方剂提供了理论和技术支持，治疗食管癌有实际的临床意义，经济和社会效益显著。附图说明图1为本专利技术诃梨勒散对食管癌TE-1细胞增殖的影响曲线图。图2为本专利技术诃梨勒散对食管癌TE-1细胞迁移的影响曲线图。图3为本专利技术诃梨勒散对食管癌TE-1细胞浸润的影响曲线图。图4为本专利技术诃梨勒散对食管癌EC-1细胞增殖的影响曲线图。图5为本专利技术诃梨勒散对食管癌EC-1细胞迁移的影响曲线图。图6为本专利技术诃梨勒散对食管癌EC-1细胞浸润的影响曲线图。图7为本专利技术诃梨勒散对食管癌Eca109细胞增殖的影响曲线图。图8为本专利技术诃梨勒散对食管癌Eca109细胞迁移的影响曲线图。图9为本专利技术诃梨勒散对食管癌Eca109细胞浸润的影响曲线图。图10为本专利技术诃梨勒散对食管癌EC9706细胞增殖的影响曲线图。图11为本专利技术诃梨勒散对食管癌EC9706细胞迁移的影响曲线图。图12为本专利技术诃梨勒散对食管癌EC9706细胞浸润的影响曲线图。具体实施方式以下结合具体情况对本专利技术的具体实施方式作详细说明。运用MTT法，从《金匮要略》157首方中筛选出可以显著抑制食管癌四种细胞(EC9706、Eca109、EC-1、TE-1)活性的有效方剂；倒置显微镜观察筛选出的有效方剂对食管癌四种细胞形态的改变，并拍照记录；流式细胞术检测并分析筛选出的方剂对食管癌四种细胞生长周期的影响；应用RTCA实时无标记细胞分析仪，实时监测、研究并分析筛选出的方剂对食管癌四种细胞增殖、迁移、浸润的影响；用软琼脂克隆形成实验，观察并分析筛选出的方对食管癌四种细胞克隆形成的影响，是诃梨勒散，诃梨勒散药物为诃子10g，加药物重量15-20的水浸泡1小时，根据金匮要略原方煎煮方法要求，电炉武火煮沸，文火煎煮约1h，纱布滤去残渣，过滤，滤液浓缩至含生药量为0.5g/mL的浓缩液，该浓缩液具有显著抑制食管癌EC9706、Eca109、EC-1、TE-1细胞的功效，有效用于制备抑制食管癌EC9706、Eca109、EC-1、TE-1细胞的药物。经实验取得了非常好的有益技术效果，有关实验资料如下：1材料与方法1.1材料1.1.1细胞人食管癌细胞株EC9706、Eca109由北京协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室惠赠，人食管癌细胞株EC-1、TE-1购自中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心。1.1.2方药来源本实验所选方为《金匮要略》全部方共计157首(原书共205首方，其中4首只列方名未载药物，除去与《伤寒论》重复方剂，共157首)，所用中药购于河南中医药大学第三附属医院。1.1.3细胞培养的主要试剂及设备RPMI1640培养基、DMEM培养基(GIBCO公司)、胎牛血清(FBS)(AusGeneX公司)、胰蛋白酶(Sigma公司)、DMSO(二甲基亚砜)(Amresco公司)、MTT(Sigma公司)、ELx800型酶标仪(BIO-TEK公司)、FACSCalibur流式细胞仪(BD公司)、Matrigel胶(Corning公司)、RTCAxCELLigenceDPsystem、E-Plate16VIEW检测板、CIM-Plate16夹具、CIM-Plate16检测板(艾森生物科技有限公司)、细胞周期试剂盒(KeyGENBioTECH公司)、琼脂糖(BioWest公司)1.2方法1.2.1药物配制按《金匮要略》原方剂药物组成和用量配方，就原方总量的一定比例取药，让每付方剂总重量在10g以上，单味中药用量保持在3g以上，根据方剂总重本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种金匮要略方诃梨勒散水提物在制备抑制食管癌EC9706、Eca109、EC‑1、TE‑1细胞药物中的应用，诃梨勒散药物为诃子10g，加药物重量15‑20的水浸泡1小时，根据金匮要略原方煎煮方法要求，电炉武火煮沸，文火煎煮约1h，纱布滤去残渣，过滤，滤液浓缩至含生药量为0.5g/mL的浓缩液。
【技术特征摘要】
1.一种金匮要略方诃梨勒散水提物在制备抑制食管癌EC9706、Eca109、EC-1、TE-1细胞药物中的应用，诃梨勒散药物为诃子10g，加药物重量...
【专利技术属性】
技术研发人员：司富春，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：河南,41
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