一种独行千里抗炎有效部位的提取方法技术

本发明专利技术申请属于药物提取技术领域，具体公开了一种独行千里抗炎有效部位的提取方法，包括以下步骤；(1)取独行千里根茎干燥并粉碎得粉末；(2)将步骤(1)中的粉末过筛，向粉末中加入硫酸溶液，加入纤维素酶混匀，置于恒温箱内酶解；(3)将步骤(2)中的混合液过滤收集滤液，将酶解后的独行千里药渣加入8倍量0.25％的硫酸溶液，超声波提取多次，收集、合并多次提取得到的提取液；(4)将步骤(3)中的滤渣过滤得到药液，将药液浓缩成稠膏；(5)将步骤(4)中的膏状物冷冻干燥并粉碎成干粉。本发明专利技术主要用于提取独行千里内的提取物，解决了现有技术中直接给患者使用独行千里的根或叶入药会对患者的康复造成影响的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种独行千里抗炎有效部位的提取方法
本专利技术属于药物提取
，具体公开了一种独行千里抗炎有效部位的提取方法。
技术介绍
独行千里，中药名。为白花菜科植物尖叶槌果藤的根及叶。分布于我国东南至南部。具有活血散瘀，祛风止痛之功效。常用于活血散瘀，祛风止痛。现有技术中，使用独行千里时，通常是将独行千里的根和叶切成片或段进行入药，使用时无法准确判断其中的有效成份，患者在用药时，药物的有效成份过多或过少会带来不同的药效，药效不同容易给患者的康复造成影响。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种独行千里抗炎有效部位的提取方法，以解决现有技术中直接给患者使用独行千里的根或叶入药会对患者的康复造成影响的问题。为了达到上述目的，本专利技术的技术方案为：一种独行千里抗炎有效部位的提取方法，包括以下步骤；(1)取药材独行千里根茎洗净干燥并粉碎得粉末；(2)将步骤(1)中的粉末过筛，向粉末中加入8倍质量的硫酸溶液，加入占独行千里质量1.2％纤维素酶混匀得混合液，置于恒温箱内酶解；(3)将步骤(2)中的混合液过滤，收集滤液，将酶解后的独行千里药渣加入8倍量0.25％的硫酸溶液，超声波提取多次，收集、合并多次提取得到的提取液；(4)将步骤(3)中的滤渣使用三层纱布过滤，再用三层滤纸抽滤得到药液，在旋转蒸发仪蒸发浓缩成稠膏；(5)将步骤(4)中的膏状物冷冻干燥并粉碎成干粉。进一步，步骤(2)中硫酸溶液的质量分数为0.25％，pH为4。进一步，步骤(2)中恒温箱内的温度为35℃，酶解时间为3h。进一步，步骤(3)中超声波提取2次，每次提取的时间为30min。进一步，步骤(5)中了冷冻干燥12h后进行粉碎。本技术方案的工作原理及有益效果在于：(1)通过专利技术人多次试验得出，独行千里的提取物具有较好的抗炎镇痛作用；(2)采用本方法提取的独行千里提取物，得到的提取物产率较高，提高了对独行千里利用率。具体实施方式下面通过具体实施方式进一步详细说明：本实施例中的一种独行千里抗炎有效部位的提取方法，包括以下步骤：取药材独行千里根茎2kg洗净干燥后粉碎，过24目筛，加入8倍量pH4.0的0.25％硫酸溶液，加入1.2％(占药材质量的百分比)纤维素酶混匀，置于35℃恒温箱内酶解3h，过滤，收集滤液，将酶解后的独行千里药渣加入8倍量0.25％的硫酸溶液，超声波提取2次，每次提取的时间为30min，收集、合并3次提取得到的提取液，三层纱布过滤，再用三层滤纸抽滤得到药液，在旋转蒸发仪蒸发浓缩成稠膏，于冷冻干燥器中冷冻干燥12小时使其形成干粉，用于实验用。本实施例中，使用超声方法得到的独行千里提取物溶于蒸馏水研磨、配制成所需浓度的溶液进行了以下试验，以小鼠为实验对象，小鼠实验提取物剂量采用80mg/kg、160mg/kg，具体如下：一、实验方法1.1二甲苯实验取小鼠60只，随机分为6组：模型对照组，吲哚美辛组，独行千里提取物高、低剂量组，每组10只，雌雄各半。按表1剂量灌胃给药，模型对照组给予等容积蒸馏水溶液，1次/d，连续给药5d。末次给药后30min，取二甲苯30μL均匀涂于小鼠右耳前后两面，30min后将小鼠颈椎脱臼处死，剪下左右耳廓，用直径7mm打孔器于左右耳同一部位打下圆耳片，称重，以左右耳片质量之差为肿胀度，计算肿胀度抑制率。1.2毛细血管通透性实验动物分组及给药方法同1。末次给药30min后给予小鼠尾静脉注射0.6％伊文思蓝溶液10mL·kg-1，随即腹腔注射0.6％冰醋酸10mL·kg-1，30min后脱臼处死，打开腹腔，用5mL生理盐水洗涤腹腔，吸出洗涤液，合并，3000r·min-1离心15min，取上清液于595nm波长处测定吸收度A值，计算抑制率。1.3醋酸扭体实验动物分组给药方法同1，末次给药后30min，小鼠腹腔注射0.6％冰醋酸溶液10mL·kg-1，记录小鼠出现扭体反应的潜伏期以及20min内小鼠扭体反应次数。1.4角叉菜胶致大鼠足肿胀实验取大鼠40只，每组8只，分组及给药方法同1，末次给药后30min，于右后足皮下注射1％角叉菜胶生理盐水溶液0.1mL，分别在致炎前和致炎后1，4，6h用足肿胀仪测量足爪容积，以致炎前后足爪容积的差值表示肿胀度。1.5热板实验将雌性小鼠置于预热(55±0.5)℃热板仪，以小鼠舔后足潜伏期为痛阈指标，实验前筛选出50只痛阈值在5～30s小鼠为合格小鼠，动物分组给药方法同1，按表5剂量灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水溶液，首次给药前测痛阈值2次，间隔5min，取其平均值作为基础痛阈值，为防止足部烫伤，设定60s为截止时间，超过60s记做痛阈值为60s，然后按表5给药，记录末次给药后30、60min动物热板痛阈值。1.6统计分析数据以表示，均数比较用One-wayANOVA分析。统计学处理由SPSS19.0软件完成。以P＜0.05为差异有统计学意义。二、实验结果2.1对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响；与模型对照组比较，独行千里提取物高、低剂量能明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀，见表1。表1独行千里提取物对小鼠耳肿胀的影响(n＝10)与模型对照组比较，*P<0.05,**P<0.01。2.2对醋酸致小鼠毛细血管通透性增加的影响；与模型对照组比较，独行千里提取物能明显抑制小鼠毛细血管通透性的增加，见表2。表2独行千里提取物对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响(n＝10)与模型对照组比较，*P<0.05,**P<0.01。2.3对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响；角叉菜胶致炎后，模型对照组足肿胀度持续增加，独行千里提取物组于4h时，足肿胀度达到高峰，随后开始下降。与模型对照组比较，致炎后1h，各实验组肿胀度无显著性差异；4h时提取物高剂量有明显抑制作用；6h时，独行千里提取物高剂量、低剂量能抑制足肿胀，见表3。表3独行千里提取物对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响(n＝8)与模型对照组比较，*P<0.05,**P<0.01。2.4对醋酸致小鼠扭体实验的影响；与模型对照组比较，提取物高剂量能明显延长醋酸致小鼠扭体潜伏时间；提取物高剂量、低剂量能减少小鼠扭体次数，见表4。表4独行千里提取物对醋酸致小鼠扭体实验的影响(n＝10)与模型对照组比较，*P<0.05,**P<0.01。2.5对热板实验的影响；各实验组基础痛阈值比较无统计学差异；与空白对照组比较，喷他佐辛、独行千里高剂量组30，60min时痛阈值均明显延长(P<0.01)，提取物低剂量组在60min时痛阈值均明显延长，见表5。表5独行千里提取物对热板实验小鼠痛阈值的影响(n＝8)与空白对照组比较，**P<0.01。通过上述实验数据可以得出以下结论：1：独行千里提取物能明显抑制醋酸所致的小鼠毛细血管通透性增加。2：独行千里提取物能抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀。3：独行千里提取物能明显延长醋酸致小鼠扭体反应的潜伏时间、减少小鼠扭体次数。4：独行千里提取物时能明显提高给药30，60min后小鼠热板实验的痛阈值。5：独行千里提取物能抑制角叉菜胶致大鼠足肿胀。以上结果表明：独行千里提取物具有一定的抗炎镇痛作用。以上所述的仅是本专利技术的实施例，方案中公知的具体结构及特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种独行千里抗炎有效部位的提取方法，其特征在于，包括以下步骤；(1)取药材独行千里根茎洗净干燥并粉碎得粉末；(2)将步骤(1)中的粉末过筛，向粉末中加入8倍质量的0.25％的硫酸溶液，加入占独行千里质量1.2％的纤维素酶混匀得混合液，置于恒温箱内酶解；(3)将步骤(2)中的混合液过滤，收集滤液，将酶解后的独行千里药渣加入8倍量0.25％的硫酸溶液，超声波提取多次，收集、合并多次提取得到的提取液；(4)将步骤(3)中的滤渣使用三层纱布过滤，再用三层滤纸抽滤得到药液，在旋转蒸发仪蒸发浓缩成稠膏；(5)将步骤(4)中的膏状物冷冻干燥并粉碎成干粉。

【技术特征摘要】
1.一种独行千里抗炎有效部位的提取方法，其特征在于，包括以下步骤；(1)取药材独行千里根茎洗净干燥并粉碎得粉末；(2)将步骤(1)中的粉末过筛，向粉末中加入8倍质量的0.25％的硫酸溶液，加入占独行千里质量1.2％的纤维素酶混匀得混合液，置于恒温箱内酶解；(3)将步骤(2)中的混合液过滤，收集滤液，将酶解后的独行千里药渣加入8倍量0.25％的硫酸溶液，超声波提取多次，收集、合并多次提取得到的提取液；(4)将步骤(3)中的滤渣使用三层纱布过滤，再用三层滤纸抽滤得到药液，在旋转蒸发仪蒸发浓缩成稠膏；(5)将步骤(4)中...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵杰，潘东梅，孙奕曦，
申请(专利权)人：广东药科大学，
类型：发明
国别省市：广东,44