一种基于温皿制备干细胞膜片的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于温皿制备干细胞膜片的方法，其包括以下步骤：步骤1、对温皿进行预处理，步骤2、进行细胞接种、培养，步骤3、对培养后的细胞进行洗涤，步骤4、进行膜片获取，步骤5、将膜片移至普通培养皿中，步骤6、将收获后的膜片进行再培养。本发明专利技术依据不同种类细胞的形态和特点，确定了细胞膜片在不同规格温度敏感性培养皿中的接种数量、包被时间以及细胞代数和成膜的时间及膜片获取后再培养等技术手段。使膜片制备更加方便快捷并可得到更加完美的细胞膜片。从而解决了不同种类细胞膜片的制备和在收获膜片时的技术问题。

A Method of Preparing Stem Cell Diaphragm Based on Temperature Disk

【技术实现步骤摘要】
一种基于温皿制备干细胞膜片的方法
本专利技术涉及生物医药技术、细胞组织工程领域，具体涉及干细胞培养过程中的不同组织类型来源的贴壁培养干细胞的膜片制备技术方法及其涵盖在缺血性疾病治疗中的组织修复及临床症状改善的应用。
技术介绍
干细胞是一类具有多向分化潜能和自我复制能力的原始的未分化细胞，是形成哺乳类动物组各个织器官的原始细胞。在修复机体、器官移植、医学美容等众多领域都有极高的应用价值。干细胞研究已成为生命科学领域的重大热点。干细胞按照分化潜能可分为三大类：1、全能干细胞2、多能干细胞--造血干细胞3、单能干细胞细胞膜片制备技术，是通过物理的方法将在特殊处理过的培养皿上扩增融合的细胞从培养皿底壁分离，获得完整膜片状细胞结构的一种技术。与传统胰酶消化收集细胞的方法相比，运用该技术收集到的细胞保留了体外培养过程中分泌的胞外基质、建立的细胞-基质连接以及细胞间连接等结构。细胞膜片技术无须支架材料和酶消化，通过刺激细胞外基质分泌形成致密细胞膜片组织，能100％将细胞保留在病灶组织部位，有效地修复组织缺损和改善器官功能。细胞膜片可通过多种方法收获。日本学者Okano等提出利用温度敏感型培养皿获得本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于温皿制备干细胞膜片的方法，其特征在于，包括以下步骤步骤1、对温皿进行预处理，步骤2、进行细胞接种、培养，步骤3、对培养后的细胞进行洗涤，步骤4、进行膜片获取，步骤5、将膜片移至普通培养皿中，步骤6、将收获后的膜片进行再培养。

【技术特征摘要】
1.一种基于温皿制备干细胞膜片的方法，其特征在于，包括以下步骤步骤1、对温皿进行预处理，步骤2、进行细胞接种、培养，步骤3、对培养后的细胞进行洗涤，步骤4、进行膜片获取，步骤5、将膜片移至普通培养皿中，步骤6、将收获后的膜片进行再培养。2.根据权利要求1所述的制备干细胞膜片的方法，其特征在于，可制备所述膜片的细胞种类包括间充质细胞、上皮细胞、内皮细胞和子宫内膜细胞及其他可贴壁培养的细胞。3.根据权利要求1所述的制备干细胞膜片的方法，其特征在于，所述步骤1中对所述温皿的预处理方法，利用包括黏连蛋白、明胶、多聚赖氨酸、胎牛血清或自体血清，对所述温皿进行包被。4.根据权利要求1所述的制备干细胞膜片的方法，其特征在于，所述步骤2中细胞接种浓度包括：35mm--90mm皿细胞接种数量为2×106--5×108。5.根据权利要求1所述的制备干细胞膜片的方法，其特征在于，所述步骤2的培养过程中，所述膜片的细胞培养代数为10代以内。6.根据权利要求1或5所述的制备干细胞膜片的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：王嵘，张华军，吴远斌，魏士雄，李力兵，成楠，毛磊，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院，
类型：发明
国别省市：北京,11