灰树花碱A及其制备方法和在制备预防和/或治疗糖尿病药物中的应用技术

本发明专利技术涉及一种新的生物碱类化合物及其制备方法和应用，尤其涉及灰树花碱A及其制备方法和在制备预防和/或治疗糖尿病药物中的应用。一种如式(Ⅰ)所示的生物碱类化合物灰树花碱A或其药学上可接受的盐。本发明专利技术提供一种新的生物碱类化合物灰树花碱A，其具有显著于阿卡波糖的α‑葡萄糖苷酶活性的抑制效果，并且由于其作为一种α‑葡萄糖苷酶抑制剂及其药食同源的来源，其对肝、肾功能也无明显毒副作用，制备方法实用性强，作为一种效果显著及无副作用的潜在药物，具有极大的经济价值。

Grifolamine A and its preparation method and its application in the preparation of drugs for preventing and/or treating diabetes mellitus

【技术实现步骤摘要】
灰树花碱A及其制备方法和在制备预防和/或治疗糖尿病药物中的应用
本专利技术涉及一种新的生物碱类化合物及其制备方法和应用，尤其涉及灰树花碱A及其制备方法和在制备预防和/或治疗糖尿病药物中的应用。
技术介绍
糖尿病，特别是II型糖尿病(diabetesmellitus，T2DM)已成为严重危害人类健康的公共卫生问题。目前全球糖尿病人数为3.66亿，而且逐年攀升，到2030年预计将达到5.52亿。糖尿病的主要危害是高血糖导致多系统、多脏器并发症的发生，多脏器并发症是糖尿病引起死亡及残疾的主要原因。波动性高血糖被证实比持续性高血糖更能促进糖尿病慢性血管并发症的发生与发展。餐后血糖波动和日内最大血糖波动是造成2型糖尿病患者血管内皮损伤的重要因素。餐后高血糖是心血管疾病死亡的独立危险因素，其作用独立于持续血糖水平。将餐后血糖水平保持接近正常范围，是控制血糖波动、预防心脑血管疾病的发生、降低心脑血管疾病死亡率的重要途径之一。血糖的主要来源是食物中的糖类。碳水化合物经过α-葡萄糖苷酶催化水解，生成单糖才能被吸收，而催化水解碳水化合物的α-葡萄糖苷酶主要分布于小肠黏膜刷状缘上，其包含有α-淀粉酶、α-糊精酶、麦芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶等。因此α-糖苷酶是调节食物来源血糖的关键酶，成为调控餐后血糖药物的作用靶酶。
技术实现思路
针对以上不足，本专利技术提供一种新的生物碱类化合物灰树花碱A及其制备方法和在预防和/或治疗糖尿病中的应用。本专利技术通过以下方案达到上述目的：在本专利技术的第一方面，提供如一种如式(Ⅰ)所示的生物碱类化合物灰树花碱A或其药学上可接受的盐。在第二方面，提供一种所述灰树花碱A的制备方法，包括：(1)制备灰树花提取物：用0～95％乙醇溶液加热回流灰树花子实体，提取灰树花粗提取物，浓缩得浸膏(GF)，浸膏(GF)用水混悬，分别用环己烷、氯仿萃取，氯仿萃取部位浓缩得到浸膏(GF-C)；(2)反相硅胶柱层析分离：用氯仿和甲醇的1:1混合溶液溶解浸膏(GL-C)，与硅胶混合拌样，挥干溶剂后将吸附有灰树花粗提物的硅胶添加到层析柱中吸附剂的上面，进行反相硅胶柱层析分离，以10-30％甲醇水溶液作为洗脱剂梯度洗脱，收集洗脱馏分，浓缩得到GL-C1；(3)高效液相色谱制备：以15-25％甲醇-水为流动相，流速为8-15mL/min，馏分GL-C1经制备高效液相色谱纯化得到如式(Ⅰ)所示的化合物。在第三方面，提供一种所述灰树花碱A或其药学上可接受的盐在预防和/或治疗糖尿病中的应用。在第四方面，提供一种所述灰树花碱A或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗糖尿病药物中的应用。在第五方面，提供一种制备预防和/或治疗糖尿病药物，包括灰树花碱A或其药学上可接受的盐及药学上可接受的载体。本专利技术提供一种新的生物碱类化合物灰树花碱A，其具有显著于阿卡波糖的α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果，并且由于其作为一种α-葡萄糖苷酶抑制剂及其药食同源的来源，其对肝、肾功能也无明显毒副作用，制备方法实用性强，作为一种效果显著及无副作用的潜在药物，具有极大的经济价值。附图说明图1为式I的化合物的结构式。具体实施方式在本专利技术的第一方面，提供如一种如式(Ⅰ)所示的生物碱类化合物灰树花碱A或其药学上可接受的盐。上述灰树花碱A的参数测定为：UV(MeOH)λmax216nm；ESI-MS：m/z268[M+H]+、m/z266[M-H]-；HR-ESI-MS：m/z268.1565[M+H]+(calcd.forC14H22NO4,268.1549)。上述灰树花碱A的分子式为C14H21NO4，其13C和1HNMR参数如表1所示。优选的，所述灰树花碱A的药学上可接受的盐为灰树花碱A与无机酸或有机酸形成的盐。进一步优选的，所述无机酸选自盐酸、氢溴酸、硫酸或硝酸。进一步优选的，所述有机酸选自乙酸、丙酸、丙二酸、丁酸、乳酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、马来酸，苯甲酸、琥珀酸、苦味酸、酒石酸、柠檬酸或富马酸。在第二方面，提供一种所述灰树花碱A的制备方法，包括：(1)制备灰树花提取物：用0～95％乙醇溶液加热回流灰树花子实体，提取灰树花粗提取物，浓缩得浸膏(GF)，浸膏(GF)用水混悬，分别用环己烷、氯仿萃取，氯仿萃取部位浓缩得到浸膏(GF-C)；(2)反相硅胶柱层析分离：用氯仿和甲醇1:1的混合溶液溶解浸膏(GL-C)，与硅胶混合拌样，挥干溶剂后将吸附有灰树花粗提物的硅胶添加到层析柱中吸附剂的上面，进行反相硅胶柱层析分离，以10-30％甲醇水溶液作为洗脱剂梯度洗脱，收集洗脱馏分，浓缩得到GL-C1；(3)高效液相色谱制备：以15-25％甲醇-水为流动相，流速为8-15mL/min，馏分GL-C1经制备高效液相色谱纯化得到如式(Ⅰ)所示的化合物。优选的，一种所述灰树花碱A的制备方法，包括：(1)制备灰树花粗提取物：用0～95％乙醇溶液加热回流灰树花子实体，提取灰树花粗提取物，浓缩得浸膏(GF)，浸膏(GF)用适量水混悬，分别用环己烷、氯仿萃取，氯仿萃取部位浓缩得到浸膏(GF-C)；(2)反相硅胶柱层析：用氯仿和甲醇的1:1混合溶液溶解浸膏(GL-C)，与硅胶混合拌样，挥干溶剂后将吸附有灰树花粗提物的硅胶添加到层析柱中吸附剂的上面，进行反相硅胶柱层析分离，以20％甲醇水溶液作为洗脱剂梯度洗脱，收集洗脱馏分，浓缩得到GL-C1；(3)高效液相色谱：以20％甲醇-水为流动相，流速为12mL/min，馏分GL-C1经高效液相色谱纯化得到如式(Ⅰ)所示的化合物。经试验证实，本专利技术的新化合物灰树花碱A是一种α-葡萄糖苷酶抑制剂，α-葡萄糖苷酶抑制剂(α-glucosidaseinhibitor，AGI)作为控制餐后血糖的对症治疗类药物，不仅能降低餐后血糖，而且能减少低血糖的危险，对肝、肾功能也无明显毒副作用。在葡萄糖耐量受损、II型糖尿病早期的治疗中，AGI被我国糖尿病防治指南推荐为一线药物。进一步地，α-葡萄糖苷酶抑制剂现有三个药物上市，分别为阿卡波糖(acarbose)、格列波糖(voglibose)和米格列醇(migltol)，均为葡萄糖类似物，长期服用容易引起胃肠道副作用。而本专利技术的灰树花碱A为与以上三种药物的结构类型不同，而且其来自于药食同源的食用菌，更加安全，是一种非常具有开发潜力的药物。专利技术人也通过在正常细胞中的细胞毒性试验证明了灰树花碱A在正常细胞中没有可观察到的细胞毒性效果。在第三方面，提供一种所述灰树花碱A或其药学上可接受的盐在预防和/或治疗糖尿病中的应用。所述糖尿病包括但不限于I型糖尿病、Ⅱ型糖尿病、妊娠糖尿病及它们的并发症。在第四方面，提供一种所述灰树花碱A或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗糖尿病药物中的应用。所述糖尿病包括但不限于I型糖尿病、Ⅱ型糖尿病、妊娠糖尿病及它们的并发症。在第五方面，提供一种预防和/或治疗糖尿病药物，包括灰树花碱A或其药学上可接受的盐及药学上可接受的载体。所述糖尿病包括但不限于I型糖尿病、Ⅱ型糖尿病、妊娠糖尿病及它们的并发症。本专利技术中所述的“药学上可接受的载体”还可以理解为“稀释剂”或“辅料”等，在医药领域内众所周知且描述于例如雷明顿医药科学(Remington’sPharmaceuticalSciences)，马克出版公司(M本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种如式(Ⅰ)所示的生物碱类化合物灰树花碱A或其药学上可接受的盐。

【技术特征摘要】
1.一种如式(Ⅰ)所示的生物碱类化合物灰树花碱A或其药学上可接受的盐。2.根据权利要求1所述的生物碱类化合物灰树花碱A或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述灰树花碱A的参数测定为：UV(MeOH)λmax216nm；ESI-MS：m/z268[M+H]+、m/z266[M-H]-；HR-ESI-MS：m/z268.1565[M+H]+(calcd.forC14H22NO4,268.1549)。3.根据权利要求1所述的生物碱类化合物灰树花碱A或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述灰树花碱A的分子式为C14H21NO4，其13C和1HNMR参数如表1所示。4.根据权利要求1所述的生物碱类化合物灰树花碱A或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述灰树花碱A的药学上可接受的盐为灰树花碱A与无机酸或有机酸形成的盐。5.根据权利要求4所述的生物碱类化合物灰树花碱A或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述无机酸选自盐酸、氢溴酸、硫酸或硝酸；或，所述有机酸选自乙酸、丙酸、丙二酸、丁酸、乳酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、马来酸，苯甲酸、琥珀酸、苦味酸、酒石酸、柠檬酸或富马酸。6.一种权利要求1至5中任一所述的灰树花碱A的制备方法，其特征在于，包括：(1)制备灰树花提取物：用0～95％乙醇溶液加热回流灰树花子实体，提取灰树花粗提取物，浓缩得浸膏(GF)，浸膏(GF)用水混悬，分别用环己烷、氯仿萃取，氯仿萃取部位浓缩得到浸膏(GF-C)；(2)反相硅胶柱层析分离：用氯仿和甲醇1:1的混合溶液溶解浸膏(GL-...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈少丹，谢意珍，吴清平，关小莺，
申请(专利权)人：广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心，广东粤微食用菌技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44