嵌合吞噬受体分子制造技术

本公开内容涉及嵌合吞噬受体分子，经修饰以包含吞噬细胞的吞噬分子的宿主细胞，以及制备和使用此类受体分子和经修饰的细胞的方法。

Chimeric phagocytic receptor molecule

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】嵌合吞噬受体分子关于序列表的声明与本申请相关的序列表以文本形式提供以替代纸质副本，并且通过引用在此并入本说明书。包含序列表的文本文件名为200265_401WO_SEQUENCE_LISTING.txt。该文本文件为275KB，于2017年9月26日创建，并通过EFS-Web以电子形式提交。
技术介绍
吞噬作用有两种基本类型，其受靶点、细胞类型和周围环境的影响。抗微生物吞噬作用清除和降解引起疾病的微生物，通过细胞因子和趋化因子分泌诱导促炎信号传导，并募集免疫细胞以产生有效的炎性应答。通常将这种类型的吞噬作用称为“炎性吞噬作用”(或“免疫原性吞噬作用”)。然而，在一些情况下(如某些持续感染)，抗炎性应答可能出现在微生物摄入之后。抗微生物吞噬作用通常由专门的髓系吞噬细胞(如未成熟的树突状细胞(DC)和巨噬细胞)以及由组织驻留免疫细胞进行。相反的是，受损的、自身来源的凋亡细胞或细胞碎片的吞噬作用(例如，胞葬作用)通常是非炎性(也称为“非免疫原性”)过程。每天数十亿受损、濒死和不需要的细胞都会发生凋亡。不需要的细胞包括例如在发育过程中产生的过量细胞、衰老细胞、受感染的细胞(胞内细菌或病毒)、转化细胞或恶性细胞以及被细胞毒剂不可逆损伤的细胞。吞噬细胞对凋亡细胞执行特异性的迅速清除，但不会对周围组织造成损伤或诱导促炎性免疫应答。凋亡细胞清除的步骤包括：(1)从凋亡细胞释放“来找我”的信号以便向凋亡细胞的位置募集吞噬细胞；(2)暴露于凋亡细胞表面上的“吃掉我”的信号被吞噬细胞通过特异性受体所结合；(3)细胞骨架重排以吞噬凋亡细胞；以及(4)消化摄入的凋亡细胞并激发特异性吞噬应答(例如，分泌抗炎性细胞因子)。对治疗感染、炎性疾病、免疫疾病和各种癌症的新组合物和方法存在持续的需求。本申请公开的方法和组合物通过在治疗各种癌症、急性和慢性感染、炎症、免疫和选定的神经系统疾病中增强从机体去除感染、转化、恶性、凋亡、受损或坏死的细胞或颗粒来满足这些需求。
技术实现思路
本申请描述了嵌合吞噬受体。在某些实施方式中，嵌合吞噬受体(单数为“CER”和复数为“CERs”)包含胞外域、跨膜结构域和胞内吞噬信号传导结构域。跨膜结构域位于胞外域和吞噬信号传导结构域之间并将这两者连接在一起。胞外域包含结合结构域和位于结合结构域和跨膜结构域之间并将这两者连接在一起的可选的胞外间隔区结构域。在某些实施方式中，本申请所述的嵌合吞噬受体是嵌合蛋白，其具有：(a)靶向促吞噬标记物或与疾病、病症、病况或感染相关的靶抗原的胞外域，(b)跨膜结构域和(c)吞噬信号传导结构域。在某些实施方式中，吞噬信号传导结构域包含稳态吞噬结构域和促炎性吞噬结构域的至少一种。在一些实施方式中，吞噬信号传导结构域包含主要吞噬信号传导结构域和次要吞噬信号传导结构域。在特定实施方式中，嵌合吞噬受体是单链嵌合蛋白。可以对嵌合吞噬受体进行设计以产生对靶细胞/器官/组织/区域的炎性应答。虽然凋亡细胞清除通常是非炎性过程，但是在某些情况下炎症对宿主可能是有利的，例如在清除凋亡肿瘤细胞以诱导对残留肿瘤细胞的免疫应答的情况下。在一些实施方式中，CER的胞外域包含对促吞噬标记物具有特异性的结合结构域。在某些此类实施方式中，胞外域包含磷脂酰丝氨酸(PtdSer)结合结构域。在本申请所述CER的实施方式中，PtdSer结合结构域可以包含T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域1(Tim1)、T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域4(Tim4)或T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域3(Tim3)的胞外域的全部或一部分。在其他实施方式中，PtdSer结合结构域可以包含来自FA58C2、GAS6、蛋白S、因子VII、因子IX、因子X或凝血酶原PS的结合结构域的全部或一部分。在进一步的实施方式中，胞外域与靶抗原结合。在某些此类实施方式中，胞外域包含Fc受体(FcR)胞外域的全部或一部分，例如FcGR1、FcGR2A、FcGR2B2、FcGR2C、FcGR3A、FcεR1和FcαR1。在其中胞外域结合靶抗原的其他实施方式中，胞外域可以包含抗体或其抗原结合结构域。例如，胞外域可以包含选自胞内抗体、肽抗体、纳米抗体、单域抗体、SMIP和多特异性抗体的抗体或抗原结合结构域。在某些此类实施方式中，胞外域包含Fab结合结构域。在其他此类实施方式中，胞外域包含scFv。在CER的胞外域与促吞噬标记物或靶抗原结合后，CER的吞噬信号传导结构域刺激吞噬信号传导的活性。因此，激活后，包含在CER中的吞噬信号传导结构域转导引导宿主细胞吞噬的效应功能信号。在某些实施方式中，CER的吞噬信号传导结构域包含稳态吞噬信号传导结构域。稳态吞噬信号传导结构域的实例包括MRC1、ItgB5、MERTK、Tyro3和Axl信号传导结构域。在其他实施方式中，吞噬信号传导结构域包含促炎性吞噬信号传导结构域。促炎性吞噬信号传导结构域的实例包括Traf6、Syk、MyD88、Zap70、FcγR1、FcγR2A、FcγR2B2、FcγR2C、FcγR3A、FcεR1、FcαR1、BAFF-R、NFAM1、DAP12和CD79b信号传导结构域。在另外的实施方式中，吞噬信号传导结构域包含主要吞噬信号传导结构域和次要吞噬信号传导结构域。在此类实施方式中，主要吞噬信号传导结构域和次要吞噬信号传导结构域可以独立地选自稳态和促炎性吞噬信号传导结构域，包括本申请所述的那些。在进一步的方面中，本公开内容涉及基因修饰以表达CER的细胞。在特定的实施方式中，单一的、天然存在的受体蛋白未显示出CER赋予的吞噬表型。在其他实施方式中，根据本说明书的CER赋予了未天然显示出吞噬活性的细胞吞噬表型。在某些实施方式中，对细胞进行基因修饰以使其表达靶向与死亡、濒死、损伤、感染或坏死的细胞相关的促吞噬标记物的CER。在其他实施方式中，对细胞进行基因修饰以表达靶向与感染性微生物或感染性颗粒诱导的分子相关的标记物(如抗体)的CER。在此类实施方式中，通过与靶向的感染性微生物或由感染性颗粒诱导的靶向分子相关的标记物的CER结合后，基因修饰的细胞促进靶向的细胞或微生物的清除或降解。在其他特定的实施方式中，对细胞进行基因修饰以表达靶向通常不引发吞噬的抗原标记物的CER。例如，在此类实施方式中，CER的胞外域可以包含抗体或抗体的抗原结合部分，如对抗原标记物具有特异性的Fab结合结构域或scFv。在某些此类实施方式中，抗原标记物可以是与疾病、病症或其他不良病况相关的异常细胞的表面蛋白、糖蛋白或糖脂特征。在此类实施方式中，通过CER与抗原标记物结合后，经基因修饰的细胞促进异常细胞的清除或降解。在进一步的实施方式中，还可以对经CER修饰的细胞进行进一步修饰以共表达小GTPase。可以使用编码CER和小GTPase这两者的载体将小GTPase引入经CER修饰的细胞。或者，可以使用与引入CER所使用的载体分开的载体将小GTPase引入已经是或将是经CER修饰细胞的细胞中。在更进一步的方面中，本公开内容涉及一种治疗患有疾病、病症或不良病况的对象的方法。这些方法的实施方式包括向对象施用治疗有效量的包含一种或多种CER的药物组合物或者经基因修饰以表达一种或多种根据本专利技术所述的CER的细胞群。在其他方面中，本公开内容提供了改变宿主细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种嵌合吞噬受体(CER)，所述嵌合吞噬受体包含单链嵌合蛋白，所述单链嵌合蛋白包含：胞外域，所述胞外域包含与磷脂酰丝氨酸(PtdSer)结合的结合结构域；吞噬信号传导结构域；和位于所述胞外域和所述吞噬信号传导结构域之间并将这两者连接在一起的跨膜结构域。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.09.27 US 62/400,578;2017.01.11 US 62/445,2351.一种嵌合吞噬受体(CER)，所述嵌合吞噬受体包含单链嵌合蛋白，所述单链嵌合蛋白包含：胞外域，所述胞外域包含与磷脂酰丝氨酸(PtdSer)结合的结合结构域；吞噬信号传导结构域；和位于所述胞外域和所述吞噬信号传导结构域之间并将这两者连接在一起的跨膜结构域。2.根据权利要求1所述的CER，其中所述结合结构域包含PtdSer特异性scFv，或者来自Tim1、Tim4、Tim3、stabilin-2、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、脑特异性血管生成抑制剂1(BAI1)、乳脂肪球蛋白-EGF因子8蛋白(MFG-E8)、生长停滞特异性6(GAS6)、蛋白S、蛋白C、因子II、因子VII、因子IX、因子X、β2-糖蛋白I、α5β3整合素和其他整合素、CR3补体受体、CR4补体受体、CD14、CD93、膜联蛋白V、磷脂酰丝氨酸受体(PSr)、凝血酶原或清道夫受体的PtdSer结合结构域。3.根据权利要求2所述的CER，其中所述结合结构域包含含有SEQIDNO:28的氨基酸序列的TIM1结构域，含有SEQIDNO:29的氨基酸序列的TIM4结构域，含有SEQIDNO:34的氨基酸序列的Tim3结构域，含有SEQIDNO:30的氨基酸序列的FA58C2结构域，含有SEQIDNO:32的氨基酸序列的GAS6结构域，含有SEQIDNO:33的氨基酸序列的蛋白S结合结构域或者含有SEQIDNO:117的氨基酸序列的BAI1结构域。4.根据权利要求1-3中任意一项所述的CER，其中所述胞外域还包含位于所述结合结构域和跨膜结构域之间的胞外间隔区结构域。5.根据权利要求4所述的CER，其中所述胞外间隔区结构域包含免疫球蛋白铰链区、1型膜蛋白的胞外区、II型C-凝集素的茎区、免疫球蛋白恒定区，或其片段。6.根据权利要求5所述的CER，其中所述胞外间隔区结构域包含IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA或IgD铰链区。7.根据权利要求6所述的CER，其中所述胞外间隔区结构域包含经修饰的IgG4铰链区，所述经修饰的IgG4铰链区含有SEQIDNO:67的氨基酸序列。8.根据权利要求1-7中任意一项所述的CER，其中所述跨膜结构域包含Tim1、Tim4、Tim3、FcR、CD8a、CD28、MERTK、Axl、Tyro3、BAI1、CD4、DAP12或MRC1跨膜结构域。9.根据权利要求8所述的CER，其中所述跨膜结构域包含含有SEQIDNO:35的氨基酸序列的Tim1跨膜结构域，含有SEQIDNO:36的氨基酸序列的Tim4跨膜结构域，含有SEQIDNO:37的氨基酸序列的FcγRI跨膜结构域，含有SEQIDNO:38的氨基酸序列的CD8a跨膜结构域，含有SEQIDNO:39的氨基酸序列的MERTK跨膜结构域，含有SEQIDNO:40的氨基酸序列的Axl跨膜结构域，含有SEQIDNO:41的氨基酸序列的Tyro3跨膜结构域，含有SEQIDNO:68的氨基酸序列的CD28跨膜结构域，含有SEQIDNO:142的氨基酸序列的BAI1跨膜结构域，含有SEQIDNO:42的氨基酸序列的CD4跨膜结构域，含有SEQIDNO:89的氨基酸序列的FcεRIγ跨膜结构域，含有SEQIDNO:118的氨基酸序列的MRC1跨膜结构域或者含有SEQIDNO:81的氨基酸序列的DAP12跨膜结构域。10.根据权利要求8所述的CER，其中所述FcR跨膜结构域包含FcγR1、FcγR2A、FcγR2B2、FcγR2C、FcγR3A、FcεR1或FcαR1跨膜结构域。11.根据权利要求1-10中任意一项所述的CER，其中所述吞噬信号传导结构域是稳态吞噬信号传导结构域或促炎性吞噬信号传导结构域。12.根据权利要求11所述的CER，其中所述稳态吞噬信号传导结构域是ItgB5、MERTK、Tyro3、Axl、BAI1、ELMO或MRC1信号传导结构域。13.根据权利要求11所述的CER，其中所述促炎性吞噬信号传导结构域是PI3K、Traf6、Syk、MyD88、Zap70、FcγR1、FcγR2A、FcγR2B2、FcγR2C、FcγR3A、FcεR1、FcαR1、BAFF-R、DAP12、NFAM1或CD79b信号传导结构域。14.根据权利要求12所述的CER，其中所述稳态吞噬信号传导结构域是含有SEQIDNO:69的氨基酸序列的MERTK信号传导结构域，含有SEQIDNO:45的氨基酸序列的Tyro3信号传导结构域，含有SEQIDNO:114的氨基酸序列的ItgB5信号传导结构域，含有SEQIDNO:119的氨基酸序列的MRC1信号传导结构域，含有SEQIDNO:136的氨基酸序列的BAI1信号传导结构域，含有SEQIDNO:120的氨基酸序列的ELMO信号传导结构域或含有SEQIDNO:44的氨基酸序列的Ax1信号传导结构域。15.根据权利要求13所述的CER，其中所述促炎性吞噬信号传导结构域是含有SEQIDNO:54的氨基酸序列的Traf6信号传导结构域，含有SEQIDNO:46的氨基酸序列的Syk信号传导结构域，含有SEQIDNO:53的氨基酸序列的MyD88信号传导结构域，含有SEQIDNO:78的氨基酸序列的截短的MyD88信号传导结构域，含有SEQIDNO:47的氨基酸序列的Zap70信号传导结构域，含有SEQIDNO:48的氨基酸序列的FcγR1信号传导结构域，含有SEQIDNO:49的氨基酸序列的FcγR2A信号传导结构域，含有SEQIDNO:50的氨基酸序列的FcγR2C信号传导结构域，含有SEQIDNO:51的氨基酸序列的FcγR3A信号传导结构域，含有SEQIDNO:88的氨基酸序列的FcεRIγ信号传导结构域，含有SEQIDNO:94的氨基酸序列的BAFF-R信号传导结构域，含有SEQIDNO:82的氨基酸序列的DAP12信号传导结构域，含有SEQIDNO:92的氨基酸序列的NFAM1信号传导结构域或含有SEQIDNO:97的氨基酸序列的CD79b信号传导结构域。16.根据权利要求11、12或14中任意一项所述的CER，其中通过所述稳态吞噬信号传导结构域的信号传导导致至少一种抗炎性或免疫抑制性细胞因子的表达。17.根据权利要求16所述的CER，其中所述抗炎性或免疫抑制性细胞因子是TGF-β、IL-10或者这两者。18.根据权利要求11、13或15中任意一项所述的CER，其中通过所述促炎性吞噬信号传导结构域的信号传导导致至少一种炎性细胞因子、炎性趋化因子或共刺激细胞表面标记物的表达。19.根据权利要求18所述的CER，其中所述炎性细胞因子是TNFα、IL-1、IL-6、IL-12或IL-23；所述炎性趋化因子是CCL5(RANTES)、CXCL9或CXCL10；并且所述共刺激细胞表面标记物是CD80、CD86、HLA-DR、CD40、HVEM或4-1BBL；或其任意组合。20.根据权利要求1-10中任意一项所述的CER，其中所述吞噬信号传导结构域包含主要吞噬信号传导结构域和次要吞噬信号传导结构域。21.根据权利要求20所述的CER，其中所述主要吞噬信号传导结构域是稳态吞噬信号传导结构域并且所述次要吞噬信号传导结构域是稳态吞噬信号传导结构域。22.根据权利要求20所述的CER，其中所述主要吞噬信号传导结构域是促炎性吞噬信号传导结构域并且所述次要吞噬信号传导结构域是促炎性吞噬信号传导结构域。23.根据权利要求20所述的CER，其中所述主要吞噬信号传导结构域是稳态吞噬信号传导结构域并且所述次要吞噬信号传导结构域是促炎性吞噬信号传导结构域。24.根据权利要求20所述的CER，其中所述主要吞噬信号传导结构域是促炎性吞噬信号传导结构域并且所述次要吞噬信号传导结构域是稳态吞噬信号传导结构域。25.根据权利要求21或22所述的CER，其中所述主要吞噬信号传导结构域和次要吞噬信号传导结构域是相同的或不同的。26.根据权利要求21、23、24或25中任意一项所述的CER，其中所述稳态吞噬信号传导结构域是ItgB5、MERTK、Tyro3、Axl、BAI1、ELMO或MRC1信号传导结构域。27.根据权利要求26所述的CER，其中所述稳态吞噬信号传导结构域是含有SEQIDNO:69的氨基酸序列的MERTK信号传导结构域，含有SEQIDNO:45的氨基酸序列的Tyro3信号传导结构域，含有SEQIDNO:114的氨基酸序列的ItgB5信号传导结构域，含有SEQIDNO:119的氨基酸序列的MRC1信号传导结构域，含有SEQIDNO:136的氨基酸序列的BAI1信号传导结构域，含有SEQIDNO:120的氨基酸序列的ELMO信号传导结构域或含有SEQIDNO:44的氨基酸序列的Ax1信号传导结构域。28.根据权利要求22、23、24或25中任意一项所述的CER，其中所述促炎性吞噬信号传导结构域是PI3K、Traf6、Syk、MyD88、Zap70、FcγR1、FcγR2A、FcγR2B2、FcγR2C、FcγR3A、FcεR1、FcαR1、BAFF-R、DAP12、NFAM1或CD79b信号传导结构域。29.根据权利要求28所述的CER，其中所述促炎性吞噬信号传导结构域是含有SEQIDNO:54的氨基酸序列的Traf6信号传导结构域，含有SEQIDNO:46的氨基酸序列的Syk信号传导结构域，含有SEQIDNO:53的氨基酸序列的MyD88信号传导结构域，含有SEQIDNO:78的氨基酸序列的截短的MyD88信号传导结构域，含有SEQIDNO:47的氨基酸序列的Zap70信号传导结构域，含有SEQIDNO:48的氨基酸序列的FcγR1信号传导结构域，含有SEQIDNO:49的氨基酸序列的FcγR2A信号传导结构域，含有SEQIDNO:50的氨基酸序列的FcγR2C信号传导结构域，含有SEQIDNO:51的氨基酸序列的FcγR3A信号传导结构域，含有SEQIDNO:88的氨基酸序列的FcεRIγ信号传导结构域，含有SEQIDNO:94的氨基酸序列的BAFF-R信号传导结构域，含有SEQIDNO:82的氨基酸序列的DAP12信号传导结构域，含有SEQIDNO:92的氨基酸序列的NFAM1信号传导结构域或含有SEQIDNO:97的氨基酸序列的CD79b信号传导结构域。30.根据权利要求1所述的CER，其中：所述结合结构域选自Tim4PtdSer结合结构域和FA58C2PtdSer结合结构域，所述跨膜结构域选自Tim4跨膜结构域和CD28跨膜结构域，所述吞噬信号传导结构域选自MERTK信号传导结构域和SYK信号传导结构域，并且可选地，所述胞外域包含位于所述结合结构域和跨膜结构域之间的胞外间隔区结构域。31.根据权利要求30所述的CER，其包含：所述Tim4PtdSer结合结构域、所述Tim4跨膜结构域和所述MERTK信号传导结构域。32.根据权利要求30所述的CER，其包含：所述FA58C2PtdSer结合结构域、所述胞外间隔区结构域，其中所述胞外间隔区结构域包含IgG4铰链区、所述CD28跨膜结构域和所述MERTK信号传导结构域。33.根据权利要求30所述的CER，其包含：所述FA58C2PtdSer结合结构域、所述胞外间隔区结构域，其中所述胞外间隔区结构域包含IgG4铰链区、所述CD28跨膜结构域和所述SYK信号传导结构域。34.根据权利要求30或31所述的CER，其中所述Tim4PtdSer结合结构域包含SEQIDNO:29的氨基酸序列。35.根据权利要求30或31所述的CER，其中所述Tim4跨膜结构域包含SEQIDNO:36的氨基酸序列。36.根据权利要求30、31和32中任意一项所述的CER，其中所述MERTK信号传导结构域包含SEQIDNO:69的氨基酸序列。37.根据权利要求31所述的CER，其包含SEQIDNO:71的氨基酸序列或SEQIDNO:71的氨基酸23-776。38.根据权利要求30、32和33中任意一项所述的CER，其中所述FA58C2PtdSer结合结构域包含SEQIDNO:30的氨基酸序列。39.根据权利要求30、32和33中任意一项所述的CER，其中所述CD28跨膜结构域包含SEQIDNO:68的氨基酸序列。40.根据权利要求32或33所述的CER，其中所述IgG4铰链区包含SEQIDNO:67的氨基酸序列。41.根据权利要求30或33所述的CER，其中所述SYK信号传导结构域包含SEQIDNO:46的氨基酸序列。42.根据权利要求32所述的CER，包含SEQIDNO:75的氨基酸序列或SEQIDNO:75的氨基酸23-699。43.根据权利要求33所述CER，包含SEQIDNO:70的氨基酸序列或SEQIDNO:70的氨基酸23-484。44.一种嵌合吞噬受体(CER)，所述嵌合吞噬受体包含单链嵌合蛋白，所述单链嵌合蛋白包含：胞外域，所述胞外域包含与促吞噬标记物或靶抗原结合的结合结构域；促炎性吞噬信号传导结构域；和位于所述胞外域和所述促炎性吞噬信号传导结构域之间并将这两者连接在一起的跨膜结构域。45.根据权利要求44所述的CER，其中所述促吞噬标记物选自磷脂酰丝氨酸(PtdSer)、ICAM-3、氧化低密度脂蛋白、钙网蛋白、膜联蛋白I、补体C1q和血小板反应蛋白。46.根据权利要求45所述的CER，其包含与PtdSer结合且是PtdSer特异性scFv的结合结构域，或者来自Tim1、Tim4、Tim3、stabilin-2、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、脑特异性血管生成抑制剂1(BAI1)、乳脂肪球蛋白-EGF因子8蛋白(MFG-E8)、生长停滞特异性6(GAS6)、蛋白S、蛋白C、因子II、因子VII、因子IX、因子X、β2-糖蛋白I、α5β3整合素和其他整合素、CR3补体受体、CR4补体受体、CD14、CD93、膜联蛋白V、磷脂酰丝氨酸受体(PSr)、凝血酶原或清道夫受体的PtdSer结合结构域。47.根据权利要求44所述的CER，其中所述结合结构域是肿瘤抗原特异性scFv。48.根据权利要求47所述的CER，其中所述肿瘤抗原是CD138、CD38、CD33、CD123、CD72、CD79a、CD79b、间皮素、PSMA、BCMA、ROR1、MUC-16、L1CAM、CD22、CD19、CD20、CD23、CD24、CD37、CD30、CA125、CD56、c-Met、EGFR、GD-3、HPVE6、HPVE7、MUC-1、HER2、叶酸受体α、CD97、CD171、CD179a、CD44v6、WT1、VEGF-α、VEGFR1、IL-13Rα1、IL-13Rα2、IL-11Rα、PSA、FcRH5、NKG2D配体、NY-ESO-1、TAG-72、CEA、肝配蛋白A2、肝配蛋白B2、LewisA抗原、LewisY抗原、MAGE、MAGE-A1、RAGE-1、叶酸受体β、EGFRviii、VEGFR-2、LGR5、SSX2、AKAP-4、FLT3、岩藻糖基GM1、GM3、o-乙酰基-GD2或GD2。49.根据权利要求44所述的CER，其中所述结合结构域是对能够在宿主中建立持续感染的微生物抗原特异性的scFv。50.根据权利要求44-49中任意一项所述的CER，其中所述胞外域还包含位于所述结合结构域和跨膜结构域之间的胞外间隔区结构域。51.根据权利要求50所述的CER，其中所述胞外间隔区结构域包含免疫球蛋白铰链区、1型膜蛋白的胞外区、II型C-凝集素的茎区、免疫球蛋白恒定区，或其片段。52.根据权利要求51所述的CER，其中所述胞外间隔区结构域包含IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA或IgD铰链区。53.根据权利要求52所述的CER，其中所述胞外间隔区结构域包含经修饰的IgG4铰链区，所述经修饰的IgG4铰链区包含SEQIDNO:67的氨基酸序列。54.根据权利要求44-53中任意一项所述的CER，其中所述跨膜结构域包含Tim1、Tim4、Tim3、FcR、CD8a、CD28、MERTK、Axl、Tyro3、BAI1、CD4、MRC1或DAP12跨膜结构域。55.根据权利要求54所述的CER，其中所述跨膜结构域包含含有SEQIDNO:35的氨基酸序列的Tim1跨膜结构域，含有SEQIDNO:36的氨基酸序列的Tim4跨膜结构域，含有SEQIDNO:37的氨基酸序列的FcγRI跨膜结构域，含有SEQIDNO:38的氨基酸序列的CD8a跨膜结构域，含有SEQIDNO:39的氨基酸序列的MERTK跨膜结构域，含有SEQIDNO:40的氨基酸序列的Axl跨膜结构域，含有SEQIDNO:41的氨基酸序列的Tyro3跨膜结构域，含有SEQIDNO:68的氨基酸序列的CD28跨膜结构域，含有SEQIDNO:142的氨基酸序列的BAI1跨膜结构域，含有SEQIDNO:42的氨基酸序列的CD4跨膜结构域，含有SEQIDNO:89的氨基酸序列的FcεRIγ跨膜结构域，含有SEQIDNO:118的氨基酸序列的MRC1跨膜结构域或者含有SEQIDNO:81的氨基酸序列的DAP12跨膜结构域。56.根据权利要求54所述的CER，其中所述FcR跨膜结构域包含FcγR1、FcγR2A、FcγR2B2、FcγR2C、FcγR3A、FcεR1或FcαR1跨膜结构域。57.根据权利要求44-56中任意一项所述的CER，其中所述促炎性吞噬信号传导结构域是PI3K、Traf6、Syk、MyD88、Zap70、FcγR1、FcγR2A、FcγR2B2、FcγR2C、FcγR3A、FcεR1、FcαR1、BAFF-R、DAP12、NFAM1或CD79b信号传导结构域。58.根据权利要求57所述的CER，其中所述促炎性吞噬信号传导结构域是含有SEQIDNO:54的氨基酸序列的Traf6信号传导结构域，含有SEQIDNO:46的氨基酸序列的Syk信号传导结构域，含有SEQIDNO:53的氨基酸序列的MyD88信号传导结构域，含有SEQIDNO:78的氨基酸序列的截短的MyD88信号传导结构域，含有SEQIDNO:47的氨基酸序列的Zap70信号传导结构域，含有SEQIDNO:48的氨基酸序列的FcγR1信号传导结构域，含有SEQIDNO:49的氨基酸序列的FcγR2A信号传导结构域，含有SEQIDNO:50的氨基酸序列的FcγR2C信号传导结构域，含有SEQIDNO:51的氨基酸序列的FcγR3A信号传导结构域，含有SEQIDNO:88的氨基酸序列的FcεRIγ信号传导结构域，含有SEQIDNO:94的氨基酸序列的BAFF-R信号传导结构域，含有SEQIDNO:82的氨基酸序列的DAP12信号传导结构域，含有SEQIDNO:92的氨基酸序列的NFAM1信号传导结构域或含有SEQIDNO:97的氨基酸序列的CD79b信号传导结构域。59.根据权利要求44-58中任意一项所述的CER，其中通过所述促炎性吞噬信号传导结构域的信号传导导致炎性细胞因子、炎性趋化因子或共刺激细胞表面标记物的至少一种的表达。60.根据权利要求59所述的CER，其中所述炎性细胞因子是TNFα、IL-1、IL-6、IL-12或IL-23；所述炎性趋化因子是CCL5(RANTES)、CXCL9或CXCL10；和所述共刺激细胞表面标记物是CD80、CD86、HLA-DR、CD40、HVEM或4-1BBL；或其任意组合。61.一种嵌合吞噬受体(CER)，所述嵌合吞噬受体包含单链嵌合蛋白，所述单链嵌合蛋白包含：胞外域，所述胞外域包含与促吞噬标记物或靶抗原结合的结合结构域；吞噬信号传导结构域，所述吞噬信号传导结构域包含主要吞噬信号传导结构域和次要吞噬信号传导结构域；和位于所述胞外域和所述主要吞噬信号传导结构域之间并将这两者连接在一起的跨膜结构域。62.根据权利要求61所述的CER，其中所述促吞噬标记物选自磷脂酰丝氨酸(PtdSer)、ICAM-3、氧化低密度脂蛋白、钙网蛋白、膜联蛋白I、补体C1q和血小板反应蛋白。63.根据权利要求62所述的CER，包含与PtdSer结合且是PtdSer特异性scFv的结合结构域，或者来自Tim1、Tim4、Tim3、stabilin-2、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、脑特异性血管生成抑制剂1(BAI1)、乳脂肪球蛋白-EGF因子8蛋白(MFG-E8)、生长停滞特异性6(GAS6)、蛋白S、蛋白C、因子II、因子VII、因子IX、因子X、β2-糖蛋白I、α5β3整合素和其他整合素、CR3补体受体、CR4补体受体、CD14、CD93、膜联蛋白V、磷脂酰丝氨酸受体(PSr)、凝血酶原或清道夫受体的PtdSer结合结构域。64.根据权利要求61所述的CER，其中所述结合结构域是肿瘤抗原特异性scFv。65.根据权利要求64所述的CER，其中所述肿瘤抗原是CD138、CD38、CD33、CD123、CD72、CD79a、CD79b、间皮素、PSMA、BCMA、ROR1、MUC-16、L1CAM、CD22、CD19、CD20、CD23、CD24、CD37、CD30、CA125、CD56、c-Met、EGFR、GD-3、HPVE6、HPVE7、MUC-1、HER2、叶酸受体α、CD97、CD171、CD179a、CD44v6、WT1、VEGF-α、VEGFR1、IL-13Rα2、IL-13Rα1、IL-11Rα、PSA、FcRH5、NKG2D配体、NY-ESO-1、TAG-72、CEA、肝配蛋白A2、肝配蛋白B2、LewisA抗原、LewisY抗原、MAGE、MAGE-A1、RAGE-1、叶酸受体β、EGFRviii、VEGFR-2、LGR5、SSX2、AKAP-4、FLT3、岩藻糖基GM1、GM3、o-乙酰基-GD2或GD2。66.根据权利要求61所述的CER，其中所述结合结构域是微生物抗原特异性scFv。67.根据权利要求61-66中任意一项所述的CER，其中所述胞外域还包含位于所述结合结构域和跨膜结构域之间的胞外间隔区结构域。68.根据权利要求67所述的CER，其中...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·M·科瑞，
申请(专利权)人：森罗治疗公司，
类型：发明
国别省市：美国,US