【技术实现步骤摘要】
用于体外活细胞的耐药性检测的方法及培养液
本专利技术涉及细胞耐药性快速检测领域,特别涉及一种用于活体细胞的耐药性快速灵敏精准的检测方法。
技术介绍
目前实验室常用检测方法主要分三大部分,即细菌学、免疫学、分子生物学。我国目前临床微生物现代药敏实验,存在些许问题,比如,检测时间久,结果不够精确,影响诊断结果,且某些鉴定设备价格昂贵,一些中小医院无力使用。目前细菌药敏检测方法主要有定性测定的纸片扩散法(K-B法),定量测定的稀释法,E法和全自动药敏仪法,一般都需要1天时间,才能出结果。目前,实验室以及临床上有多种方法可以用来检测结核菌,最常用的主要有痰涂片镜检法、罗氏固体培养法、BACTECMGIT960系统培养法、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)等等。现有的结核分枝杆菌药敏检测方法存在着以下问题:痰涂片对于制片要求高,镜检需要依靠人力完成,这大大加大了临床实验人员的工作量,也容易遗漏;由于结核分枝杆菌自身生长的特点,导致固体培养法耗时时间长;利用分枝杆菌快速培养仪和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)可以缩短培养时间,且操作便利,但是不是活菌,正确度不高,价格昂贵, ...
【技术保护点】
1.一种用于体外活细胞的耐药性检测的方法,其特征在于,包括以下具体步骤:在对待检测的活体细胞进行检测前先对所述待检测的活体细胞进行孵育,于孵育后检测标志物的浓度实现上述检测;在孵育前加入能够被所述待检测的活体细胞利用的检测化合物以及进行耐药性检测的待测化合物;所述孵育是指将待检测的活体细胞加入确定浓度的培养液培养。
【技术特征摘要】
2018.06.28 CN 20181069137891.一种用于体外活细胞的耐药性检测的方法,其特征在于,包括以下具体步骤:在对待检测的活体细胞进行检测前先对所述待检测的活体细胞进行孵育,于孵育后检测标志物的浓度实现上述检测;在孵育前加入能够被所述待检测的活体细胞利用的检测化合物以及进行耐药性检测的待测化合物;所述孵育是指将待检测的活体细胞加入确定浓度的培养液培养。2.根据权利要求1所述的用于体外活细胞的耐药性检测的方法,其特征在于,还包括孵育浓度调整步骤:在孵育前调整用于孵育的培养液的浓度令所述待检测的活体细胞大致达到优化的生长速度。3.根据权利要求2所述的用于体外活细胞的耐药性检测的方法,其特征在于,还包括预培养步骤:在孵育所述待检测的活体细胞前,对所述待检测的活体细胞进行培养并确定能够获得所述待检测活体细胞最优生长率的培养液浓度。4.根据权利要求3所述的用于体外活细胞的耐药性检测的方法,其特征在于,还包括加快培养步骤:在能够获得所述待检测活体细胞最优生长率的培养液浓度后,在孵育过程中提高所述培养液的浓度。5.根据权利要求1所述的用于体外活细胞的耐药性检测的方法,其特征在于,所述利用是指所述检测化合物能够进入所述待检测活体细胞内。6.根据权利要求1所述的用于体外活细胞的耐药性检测的方法,其特征在于,所述利用是指所述检测化合物能够与所述待检测细胞的至少一部分成分反应。7.根据权利要求1所述的用于体外活细胞的耐药性检测的方法,其特征在于,所述标志物为具有颜色的产物。8.根据权利要求1所述的用于体外活细胞的耐药性检测的方法,其特征在于,所述检测化合物为能够在所述待检测活体细胞内被氧化或者还原成可显现出颜色的产物的化合物。9.根据权利要求1所述的用于体外活细胞的耐药性检测的方法,其特征在于,所述检测化合物为能够与所述待检测活体细胞内的NAD(P)H反应并在电子偶联剂的存在下被还原成可显现出颜色的产物的四氮唑盐。10.根据权利要求1所述的用于体外活细胞的耐药性检测的方法,其特征在于,还包括抑制率检测步骤:在孵育所述待检测活体细胞的同时将等量的待检测活体细胞加入相同浓度的培养液中制成对照组,在将对照组...
【专利技术属性】
技术研发人员:阮奔放,阮健昵福,
申请(专利权)人:安吉汉菁生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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