一种头孢菌素C的制备方法及其所用的基因工程菌技术

本发明专利技术公开了一种生产头孢菌素C的基因工程菌，所述基因工程菌为过表达琥珀酸半醛脱氢酶基因(SSADH)的顶头孢霉菌(Acremonium chrysogenum)。还公开了基因工程菌的制备方法，核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示的SSADH基因，以及包含核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示的SSADH基因的表达载体的pJS581质粒。公开了一种头孢菌素C的制备方法，其步骤包括将上述的基因工程菌发酵，从发酵液中获得头孢菌素C。还公开了所述基因工程菌在制备头孢菌素C中的用途。本发明专利技术通过在顶头孢霉CPC高产菌株体内导入SSADH的表达载体实现了SSADH表达量的提高，同时也实现了CPC产量的提高。

A preparation method of cephalosporin C and its genetic engineering bacteria

【技术实现步骤摘要】
一种头孢菌素C的制备方法及其所用的基因工程菌
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种头孢菌素C的制备方法及其所用的基因工程菌。
技术介绍
头孢菌素C(cephalosporinC，即CPC)是在自然界中发现的第二种类型的β-内酰胺类抗生素，其抗菌作用机制是抑制细菌细胞壁的合成，对人体安全无毒，因此获得了广泛的关注。头孢菌素C抗菌活性低，但通过改造可获得更有效的半合成头孢菌素，是各种半合成头孢菌素的起始原料。顶头孢霉是发酵产CPC的一类重要工业微生物。经过多年研究，CPC在顶头孢霉体内的生物合成途径已被阐述得较为清楚，其中涉及的所有合成基因都已克隆得到，且纯化获得了这些基因编码的大部分酶(参见文献MartinJF.Alpha-aminoadipyl-cysteinyl-valinesynthetasesinbeta-lactamproducingorganisms.FromAbraham'sdiscoveriestonovelconceptsofnon-ribosomalpeptidesynthesis.JAntibiot(Tokyo),2000,53(10):008-1021)。研本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生产头孢菌素C的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为过表达琥珀酸半醛脱氢酶基因的顶头孢霉菌(Acremonium chrysogenum)。

【技术特征摘要】
1.一种生产头孢菌素C的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为过表达琥珀酸半醛脱氢酶基因的顶头孢霉菌(Acremoniumchrysogenum)。2.如权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，其携带含有琥珀酸半醛脱氢酶基因的表达载体，所述表达载体的骨架质粒优选pYG858。3.如权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述顶头孢霉菌为顶头孢霉菌菌株CPCC480085或CPCC480096；所述琥珀酸半醛脱氢酶基因编码的蛋白序列如SEQIDNO：1所示。4.如权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述琥珀酸半醛脱氢酶基因的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。5.如权利要求1～4任一项所述的基因工程菌的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：利用携带含有琥珀酸半醛脱氢酶基因的表达载体转化顶头孢霉菌株。6.一种基因...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢丽萍，胡又佳，冀柳欣，韩姝，龚桂花，张伟，潘洁，
申请(专利权)人：上海医药工业研究院，中国医药工业研究总院，
类型：发明
国别省市：上海,31