【技术实现步骤摘要】
一种单细胞基因组目标区域捕获的方法
本专利技术涉及一种单细胞基因组目标区域捕获的方法，属于基因检测
技术介绍
单细胞测序在2011年被《NatureMethods》列为年度值得期待的技术之一，在2013年被《Science》列为年度最值得关注的六大领域榜首，其越来越受到科研工作者的青睐，相关的研究成果也井喷式地发表在各顶级期刊上，这些都表明，单细胞测序已逐渐成为科研热点。单细胞测序技术可以剖析细胞的异质性，揭示肿瘤细胞基因组中发生的变异。有助于我们描述肿瘤细胞的克隆结构，并追踪疾病的进展和扩散范围。目前该技术已广泛地应用在辅助生殖、癌症、神经学和免疫学等领域。单细胞目标区域捕获测序是将分离的单个细胞的微量全基因组DNA进行扩增，获得高覆盖率的完整的基因组之后定制目标基因组区域的探针，与基因组DNA进行杂交，将目标区域DNA富集后进行高通量测序的技术手段。单细胞目标区域测序技术用于揭示细胞群体差异和细胞进化关系，也有助于发现和验证疾病特别是癌症的相关候选基因或相关位点，在临床诊断和药物开发方面有着巨大的应用潜力[1]。目标区域捕获测序的优势在于只对感兴趣的...
【技术保护点】
1.一种单细胞基因组目标区域捕获的方法，包括：步骤A：采用多重置换扩增方法对单细胞基因组进行等温扩增，获得扩增后的基因组；步骤B：取3μg扩增后的基因组进行打断，获得片段化的DNA片段；步骤C：将片段化的DNA片段进行末端修复，获得平末端DNA片段；步骤D：将平末端DNA片段进行3'端加A，获得3'端加A的DNA片段；步骤E：将3'端加A的DNA片段进行加接头，获得加接头的DNA片段；步骤F：将加接头的DNA片段进行PCR扩增，获得扩增的DNA片段；步骤G：将扩增的DNA片段进行目标区域捕获，获得捕获的DNA片段；步骤H：将捕获的DNA片段进行PCR扩增，获得PCR扩增产物...
【技术特征摘要】
2017.12.26 CN 20171143145061.一种单细胞基因组目标区域捕获的方法，包括：步骤A：采用多重置换扩增方法对单细胞基因组进行等温扩增，获得扩增后的基因组；步骤B：取3μg扩增后的基因组进行打断，获得片段化的DNA片段；步骤C：将片段化的DNA片段进行末端修复，获得平末端DNA片段；步骤D：将平末端DNA片段进行3'端加A，获得3'端加A的DNA片段；步骤E：将3'端加A的DNA片段进行加接头，获得加接头的DNA片段；步骤F：将加接头的DNA片段进行PCR扩增，获得扩增的DNA片段；步骤G：将扩增的DNA片段进行目标区域捕获，获得捕获的DNA片段；步骤H：将捕获的DNA片段进行PCR扩增，获得PCR扩增产物；步骤I：将PCR扩增产物进行测序；其中，所述步骤A中等温扩增的条件为30℃反应2小时；所述步骤F中PCR扩增的循环数为4～6个循环；所述步骤G中目标区域捕获的条...
【专利技术属性】
技术研发人员：洪燕，惠峰，玄兆伶，李大为，梁峻彬，陈重建，
申请(专利权)人：安诺优达基因科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11
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