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一种等温扩增核酸片段的方法、引物组及其应用和用于扩增核酸片段的试剂盒技术

技术编号:21507907 阅读:62 留言:0更新日期:2019-07-03 06:54
本发明专利技术涉及生物技术领域,具体涉及一种等温扩增核酸片段的方法、引物组及其应用和用于扩增核酸片段的试剂盒。该等温扩增核酸片段的方法,具体为:采用包括特异性引物对和通用引物对的引物组,补平所述特异性引物对与扩增模板结合后形成的切口,使所述通用引物对以补平产物为模板,在DNA聚合酶催化下等温扩增核酸模板。本发明专利技术提供了一种新的等温扩增核酸片段的方法,该方法适用于双链DNA、单链DNA和RNA扩增。

A method for isothermal amplification of nucleic acid fragments, primers and their applications, and kits for amplification of nucleic acid fragments

【技术实现步骤摘要】
一种等温扩增核酸片段的方法、引物组及其应用和用于扩增核酸片段的试剂盒
本专利技术涉及生物
,具体涉及一种等温扩增核酸片段的方法、引物组及其应用和用于扩增核酸片段的试剂盒。
技术介绍
核酸扩增是生物体内必不可少的反应,其体外应用产生的技术奠定了现代分子生物学的基础。其中最常用的技术是聚合酶链式反应(PCR),需要热循环仪在某种程度上制约了PCR的应用。然而等温扩增不需要热循环仪,科研人员基于核酸自然扩增过程开发了很多等温扩增方法,现有方法可分为基于RNA转录的等温扩增方法、基于DNA复制的等温扩增方法、基于链替代反应的等温扩增方法、依赖切刻内切酶的等温扩增技术,这些方法各具优缺点,扩增效率与应用范围也不同,现简述如下。依赖核酸序列的扩增技术(NucleicAcidSequence-basedAmplification,NASBA),又称自主序列复制(Self-sustainedSequenceReplication,3SR),是一种典型的基于RNA转录的等温扩增方法,如果模板为DNA需要95℃变性,然后引物1(P1)与单链DNA模板或RNA模板在65℃退火,随后反应在41℃进行,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种等温扩增核酸片段的方法,其特征在于:采用包括特异性引物对和通用引物对的引物组,补平所述特异性引物对与扩增模板结合后形成的切口,使所述通用引物对以补平产物为模板,在DNA聚合酶催化下等温扩增核酸模板。

【技术特征摘要】
1.一种等温扩增核酸片段的方法,其特征在于:采用包括特异性引物对和通用引物对的引物组,补平所述特异性引物对与扩增模板结合后形成的切口,使所述通用引物对以补平产物为模板,在DNA聚合酶催化下等温扩增核酸模板。2.根据权利要求1所述的等温扩增核酸片段的方法,其特征在于,所述特异性引物对由引物P1和P2组成,所述引物P1包括引物片段F1、F2、F3和F4,所述引物片段F1和F3反向互补,所述引物片段F4可与所述核酸模板互补;所述引物P2包括引物片段R1、R2、R3和R4,所述引物片段R1和R3反向互补,所述引物片段R4可与所述核酸模板互补。3.根据权利要求2所述的等温扩增核酸片段的方法,其特征在于,所述通用引物对由引物P3和P4组成,所述引物P3包括引物片段F3和F2c,所述引物片段F2c与所述引物片段F2反向互补,所述引物P4包括引物片段R3...

【专利技术属性】
技术研发人员:王德国王永真宋春美朱凯孙军涛张永清张良卢作焜苏测洋陈晨
申请(专利权)人:许昌学院
类型:发明
国别省市:河南,41

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