一种制备兔脱细胞气管基质的方法技术

本发明专利技术提供了一种制备兔脱细胞气管基质的方法包括如下步骤：以新鲜兔气管为原料，在4℃无菌蒸馏水中渗透溶解48h，进入第一个脱细胞循环：4%w/v（g/ml）脱氧胆酸钠溶液浸泡，置于20℃摇床孵育4h；再用无菌PBS冲洗2遍，然后置于含有50kU/mL浓度Dnase I的1 mol/L NaCl中，连续晃动3h，以溶解细胞核并降解DNA，最后用PBS冲洗2遍；以同样的流程进行下一个脱细胞循环周期，共计进行2个周期的处理。本发明专利技术意外地发现，经过改良的DEM处理，仅需要2个周期内可制备与原生气管相似结构的脱细胞基质，其黏膜上皮细胞被完全去除、少数软骨细胞残留、结构完整、免疫原性弱、炎性细胞浸润少，缩短临床准备时间，为需要紧急气管支架的患者提供治疗基础和希望。

A Method for Preparing Acellular Tracheal Matrix in Rabbits

【技术实现步骤摘要】
一种制备兔脱细胞气管基质的方法
本专利技术涉及一种制备兔脱细胞气管基质的方法，属于生物工程

技术介绍
气管损伤主要由肿瘤、感染、创伤等引起，当损伤长度低于成人全长的1/2或儿童的1/3时，断端吻合被认为是气管修复的最有效治疗方法。当这些恶性或良性病变累及气管长度的这一长度时，常规手术治疗难以取得良好的治疗结果。近年来随着组织工程的快速发展和气管移植替代物研究的不断深入，组织工程气管逐渐成为终末期气管病变患者替代治疗的最佳方法之一。最佳的气管替代物应具有与原生气管相似的解剖结构和化学生物信号系统，新生组织应具有自我修复、重塑、血管化和再生的能力，并对气管移植物无排斥反应。脱细胞气管是在去除组织中具有免疫原性成分的同时，保留原生气管的结构和细胞外基质(ExtracellularMatrix,ECM)，更好地模拟体内细胞微环境，且支持宿主快速的生长发育，为儿科和成人应用提供了潜在的解决方案。去污剂联合酶法(Detergentenzymaticmethod,DEM)制备的气管基质在完全去除抗原时，气管细胞外基质成分虽改变，但保留了基质主要结构和足够的机械强度，具备良好细胞相容性，为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备兔脱细胞气管基质的方法，其特征在于，包括如下步骤：以新鲜兔气管为原料，在4℃无菌蒸馏水中渗透溶解48h，进入第一个脱细胞循环：4%w/v（g/ml）脱氧胆酸钠溶液浸泡，置于20℃摇床孵育4h；再用无菌PBS冲洗2遍，然后置于含有50kU/mL浓度Dnase I的1 mol/L NaCl中，连续晃动3h，以溶解细胞核并降解DNA，最后用PBS冲洗2遍；以同样的流程进行下一个脱细胞循环周期，共计进行2个周期的处理。

【技术特征摘要】
1.一种制备兔脱细胞气管基质的方法，其特征在于，包括如下步骤：以新鲜兔气管为原料，在4℃无菌蒸馏水中渗透溶解48h，进入第一个脱细胞循环：4%w/v（g/ml）脱氧胆酸钠溶液浸泡，置于20℃摇床孵育4h；再用无...

【专利技术属性】
技术研发人员：王志豪，史宏灿，卢丹，潘枢，潘子寅，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32