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飞蝗透明带膜蛋白细胞表位肽、杂交瘤细胞株及其抗膜蛋白表位单克隆抗体和应用制造技术

技术编号:46629565 阅读:1 留言:0更新日期:2025-10-14 21:28
本发明专利技术公开飞蝗透明带膜蛋白LmPio上B细胞表位肽杂交瘤细胞株及其单克隆抗体和应用,本发明专利技术将LH10插入沙门氏菌V型分泌系统MisL载客结构域并导入大肠杆菌DH5α,在DH5α菌体表面展示表达LH10,以其作为免疫原,免疫小鼠后取其脾细胞与Sp2/0融合获得抗LH10的mAb杂交瘤细胞。将LH10插入沙门氏菌peg菌毛操纵子并导入惰性载体菌S9H,LH10在S9H菌体表面功能性展示表达,基于S9H菌体表面展示表达建立的S9H‑peg‑LH10‑抗体直接介导的凝集试验,能特异性识别杂交瘤细胞上清中抗LH10的mAb,可快速筛选出针对该膜蛋白LmPio上B细胞表位肽LH10的单克隆抗体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医学技术和生物医药领域,具体涉及飞蝗透明带膜蛋白细胞表位肽、杂交瘤细胞株及其抗膜蛋白表位单克隆抗体和应用


技术介绍

1、膜蛋白是一类能够结合或整合到细胞膜或细胞器膜上的蛋白质,在细胞的生命活动中发挥关键作用。根据蛋白质从生物膜分离的难易程度及在膜中分布的位置,膜蛋白可分为两大类:外周型膜蛋白和整合膜蛋白。外周型膜蛋白是一种水溶性蛋白,不嵌入膜内,不通过共价键附着于膜上,而是依靠离子键与膜表面的膜蛋白或膜质分子结合,只要改变溶液的离子强度甚至提高温度就可以从膜上分离下来,且膜结构不被破坏。整合膜蛋白则是通过较强的疏水作用与膜质相互作用,结合紧密,稳定的存在膜上,只有用去垢剂处理才能使膜崩解分离出来。整合膜蛋白可分为三种类型:单向拓扑蛋白、脂质锚定蛋白以及跨膜蛋白。不同类型的膜蛋白承担着各自不同的功能,在生物体的各项生命活动中都发挥着非常重要的作用,如细胞的增殖和分化、能量转换、信号转导及物质运输等,据估计有大约60%的药物作用靶点是膜蛋白,其是理想的分子靶标。然而在植物保护领域,国内外现存农药高抗性以及膜蛋白农药分子靶标结构严重缺失等现实本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.飞蝗透明带膜蛋白LmPio B细胞表位肽LH10,其特征在于,其氨基酸序列为LVTNQGRGFH。

2.编码权利要求1所述的B细胞表位肽LH10的核酸分子,其特征在于,所述核酸分子的DNA序列为CTGGTGACTAATCAAGGTCGAGGATTTCAT。

3.表达盒、重组载体、重组菌株、免疫原或检测系统,其含有权利要求2所述的核酸分子。

4.根据权利要求3所述的重组菌株或免疫原,其特征在于,所述重组菌株或免疫原是将权利要求2所述的核酸分子插入沙门氏菌V型分泌系统MisL载客结构域,导入载体菌中获得。

5.根据权利要求3所述的重组菌株或...

【技术特征摘要】

1.飞蝗透明带膜蛋白lmpio b细胞表位肽lh10,其特征在于,其氨基酸序列为lvtnqgrgfh。

2.编码权利要求1所述的b细胞表位肽lh10的核酸分子,其特征在于,所述核酸分子的dna序列为ctggtgactaatcaaggtcgaggatttcat。

3.表达盒、重组载体、重组菌株、免疫原或检测系统,其含有权利要求2所述的核酸分子。

4.根据权利要求3所述的重组菌株或免疫原,其特征在于,所述重组菌株或免疫原是将权利要求2所述的核酸分子插入沙门氏菌v型分泌系统misl载客结构域,导入载体菌中获得。

5.根据权利要求3所述的重组菌株或检测系统,其特征在于,所述重组菌株或检测系统是将权利要求2的核酸分子插入沙门氏菌peg菌毛操纵子基因中,导入惰性载体菌s9h中获得。

6.权利要求4所述的重组菌株或免疫原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将权利要求2所述的核酸分子插入沙门氏菌...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱国强秦雨婷张建珍苏亚芷赵小明刘家奇徐博朱丛睿连思琪杨溢
申请(专利权)人:扬州大学
类型:发明
国别省市:

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