一种回收高活性肽的方法技术

本发明专利技术提供了一种回收高活性肽的方法，包括步骤：(1)往经酶解的鱼皮胶原肽产物中投入硅藻土和/或活性炭进行脱色脱臭，然后过滤分离得到胶原肽产物和含腥味物质的硅藻土和/或活性炭；(2)将所述含腥味物质的硅藻土和/或活性炭装入分离柱；(3)依次使用浓度分别为60‑65％、75‑80％、80‑85％的有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱液；(4)蒸发除去洗脱液中的有机溶剂得到浓缩液；(5)往浓缩液中加入酵母发酵，离心取上清液A。梯度洗脱将被吸附在硅藻土和/或活性炭上的疏水肽洗脱下来进行回收。酵母发酵除去回收肽中的腥味物质。将洗脱液中有机溶剂除去，防止有机溶剂对酵母发酵过程产生不良影响。有机溶剂在蒸发过程中能够带走三甲胺类、挥发脂肪酸等腥味物质。

A Method for Recovering Highly Active Peptides

The invention provides a method for recovering highly active peptides, which comprises the following steps: (1) decolorizing and deodorizing the enzymatically hydrolyzed fish skin collagen peptide products with diatomite and/or activated carbon, then filtering and separating the collagen peptide products and diatomite and/or activated carbon containing fishy odor substances; (2) loading the diatomite and/or activated carbon containing fishy odor substances into the separation column; (3) using concentration fractions in turn. Gradient elution was carried out for 60 65%, 75 80%, 80 85% organic solvents respectively, and the eluent was collected; (4) the organic solvents in the eluent were removed by evaporation to obtain the concentrated liquid; (5) yeast fermentation was added to the concentrated liquid and supernatant A was centrifuged. Gradient elution is carried out to recover hydrophobic peptides adsorbed on Diatomite and/or activated carbon. Yeast fermentation removes the fishy substances from the recovered peptides. The organic solvents in eluent were removed to prevent the harmful effects of organic solvents on yeast fermentation process. Organic solvents can remove trimethylamines, volatile fatty acids and other fishy substances in the evaporation process.

【技术实现步骤摘要】
一种回收高活性肽的方法
本专利技术涉及一种回收方法，尤其是指一种回收高活性肽的方法。
技术介绍
胶原肽是指将鱼皮胶原蛋白水解成分子量在3000Dal以下的肽，因具有消化吸收率高、保护胃黏膜、促进Ca2+吸收、调节机体氧化还原状态及抗衰老、降血压等胶原蛋白所不具有的优点及生理功能，具有更广阔的用途和市场需求。但是由于生产原料及加工方式等原因，鱼皮胶原肽会有一定的腥味和颜色，腥味和颜色的存在严重影响了胶原肽产品在食品行业的推广和发展，为了去除腥味和颜色，胶原肽的生产工艺少不了脱色和脱腥步骤，脱色脱腥的方法可分为活性炭法、硅藻土法、树脂吸附法、微胶囊法、膜过滤法、包埋法、酸碱处理法、萃聚和微生物发酵法等。活性炭和硅藻土因具有空隙结构发达、比表面积大、吸附性好等优点，常被单独或联合用于胶原肽脱色脱腥工艺。但当胶原肽分子直径小于或等于活性炭、硅藻土孔入口直径时，可被活性炭或硅藻土吸附，在快速吸附色素和腥味的同时，也造成胶原肽损失等问题。无论哪种脱色脱腥技术对于胶原肽都有一定的损失率，现有技术中胶原肽的得率一般为85-90％，由于活性炭吸附疏水性物质能力强，有良好的脱色脱腥作用，但同时，大量疏水性肽也被吸附、废弃，疏水性肽抗氧化生物活性强，脱色脱腥工艺中被吸附损失的肽约占10-15％，而活性肽抗氧化能力损失15-20％。损失的肽中高活性的疏水肽占比较大，降低了胶原肽的生物活性和得率，造成资源浪费。因此回收这一部分损失的肽，对提高活性肽产率、降低成本、减少资源流失和污染排放具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是：将鱼皮胶原水解肽产物生产的脱色脱臭过程损失的肽进行回收利用，减少损失。为了解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案为：一种回收高活性肽的方法，包括步骤：(1)往经酶解的鱼皮胶原肽产物中投入硅藻土和/或活性炭进行脱色脱臭，然后过滤分离得到胶原肽产物和含腥味物质的硅藻土和/或活性炭；(2)将所述含腥味物质的硅藻土和/或活性炭装入分离柱；(3)依次使用浓度分别为60-65％、75-80％、80-85％的有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱液；(4)蒸发除去洗脱液中的有机溶剂得到浓缩液；(5)往浓缩液中加入酵母发酵，离心取上清液A。进一步的，在所述步骤(2)中，所述含腥味物质的硅藻土和/或活性炭装入分离柱前，投入浓度为45％-50％的乙醇中进行重悬；将重悬后的混合悬液装入分离柱后，至少静置10min，放出清液B。进一步的，所述回收高活性肽的方法还包括步骤(6)：(6)将上清液A和清液B进行干燥获得高活性肽干粉。进一步的，在所述步骤(3)中，所述梯度洗脱的步骤为：先用1-2倍柱体积流量的60-65％乙醇，再用1-1.5倍柱体积流量的75-80％乙醇，最后用1-1.5倍柱体积流量的80-85％乙醇。进一步的，在所述步骤(5)中，采用酿酒酵母进行发酵，将发酵的pH值调至4.5-5.5，所述酿酒酵母的添加量为浓缩液的1.5-2％，发酵温度为32-35℃，发酵时间为2-2.5h。进一步的，在所述步骤(4)中，采用旋转蒸发减压浓缩的方式得到浓缩液；所述减压浓缩温度为50-55℃；所述减压浓缩压力为-0.05--0.15MPa；所述减压浓缩浓缩至体积为洗脱液总体积的30-35％。进一步的，在所述步骤(2)中，柱温控制在30-40℃。进一步的，在所述步骤(5)中，离心速率为3600-4400转/min，离心时间为8-12min。进一步的，在所述步骤(6)中，所述干燥的方法为：将所述上清液A和所述清液B混入所述胶原肽产物中后再进行喷雾干燥。进一步的，在所述步骤(1)中，所述硅藻土和/或所述活性炭的大小为300目或600目。本专利技术的有益效果在于：硅藻土或活性肽在脱色脱臭过程除了脱色脱臭，还将大量的疏水肽进行吸附。疏水肽为一大类物质，其疏水性能存在差异，单一浓度的有机溶剂并不能将所有疏水肽从硅藻土和/或活性炭中洗脱出来，所以使用梯度洗脱，将被吸附在硅藻土和/或活性炭上的疏水肽尽可能地洗脱下来进行回收。将洗脱液中有机溶剂除去，防止有机溶剂对酵母发酵过程产生不良影响。又由于有机溶剂在蒸发过程中能够带走三甲胺类、挥发脂肪酸等腥味物质，实现除去部分腥臭物质的功效。附图说明下面结合附图详述本专利技术的具体工艺流程图1为本专利技术的一种回收高活性肽的方法的工艺流程图；图2为本专利技术的一种回收高活性肽的方法的详细工艺流程图。具体实施方式本专利技术最关键的构思在于：利用不同浓度的有机溶剂将被吸附在硅藻土和/或活性炭上的疏水肽洗脱下来，然后除去有机溶剂和部分腥味物质，最后利用酵母发酵除去残余腥味物质。为详细说明本专利技术构思的可行性，从本专利技术的
技术实现思路
、技术特征、所实现目的及效果等详予论述。请参阅图1以及图2，一种回收高活性肽的方法，包括步骤：(1)往经酶解的鱼皮胶原肽产物中投入硅藻土和/或活性炭进行脱色脱臭，然后过滤分离得到胶原肽产物和含腥味物质的硅藻土和/或活性炭；(2)将所述含腥味物质的硅藻土和/或活性炭装入分离柱；(3)依次使用浓度分别为60-65％、75-80％、80-85％的有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱液；(4)蒸发除去洗脱液中的有机溶剂得到浓缩液；(5)往浓缩液中加入酵母发酵，离心取上清液A。硅藻土或活性肽在脱色脱臭过程除了脱色脱臭，还将大量的疏水肽进行吸附。疏水肽为一大类物质，其疏水性能存在差异，单一浓度的有机溶剂并不能将所有疏水肽从硅藻土和/或活性炭中洗脱出来，所以使用梯度洗脱，将被吸附在硅藻土和/或活性炭上的疏水肽尽可能地洗脱下来进行回收。将洗脱液中有机溶剂除去，防止有机溶剂对酵母发酵过程产生不良影响。又由于有机溶剂在蒸发过程中能够带走三甲胺类、挥发脂肪酸等腥味物质，实现除去部分腥臭物质的功效。进一步的，在所述步骤(2)中，所述含腥味物质的硅藻土和/或活性炭装入分离柱前，投入浓度为45％-50％的乙醇中进行重悬；将重悬后的混合悬液装入分离柱后，至少静置10min，放出清液B。经反复测试验证发现，利用浓度45％-50％的乙醇对含有疏水肽的硅藻土和/或活性炭进行重悬，能将部分疏水肽洗脱下来，腥臭物质却不会被洗脱下来。固液分离后，液体中含有无腥味的疏水肽，不需要进行除臭步骤即可直接利用。进一步的，所述回收高活性肽的方法还包括步骤(6)：(6)将上清液A和清液B进行干燥获得高活性肽干粉。利用干燥方法将含有疏水肽的溶液制成干粉，除去溶液中含有的有机溶剂和水分，方便存储、运输和作为原料使用。进一步的，在所述步骤(3)中，所述梯度洗脱的步骤为：先用1-2倍柱体积流量的60-65％乙醇，再用1-1.5倍柱体积流量的75-80％乙醇，最后用1-1.5倍柱体积流量的80-85％乙醇。使用乙醇洗脱，洗脱液效果好。相对于其他有机溶剂，乙醇残留对人毒害性较小，且容易被分离出来。进一步的，在所述步骤(5)中，采用酿酒酵母进行发酵，将发酵的pH值调至4.5-5.5，所述酿酒酵母的添加量为浓缩液的1.5-2％，发酵温度为32-35℃，发酵时间为2-2.5h。酿酒酵母的生长和发酵不受浓缩液中残留的乙醇影响。经过反复的“发酵-腥味物质检测”试验，发现酿酒酵母除去腥味物质的效果好，且添加浓缩液的1.5-2％的酿酒酵母，在32-35℃条件下发酵2-2.5h能测底除去浓缩液中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种回收高活性肽的方法，其特征在于，包括步骤：(1)往经酶解的鱼皮胶原肽产物中投入硅藻土和/或活性炭进行脱色脱臭，然后过滤分离得到胶原肽产物和含腥味物质的硅藻土和/或活性炭；(2)将所述含腥味物质的硅藻土和/或活性炭装入分离柱；(3)依次使用浓度分别为60‑65％、75‑80％、80‑85％的有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱液；(4)蒸发除去洗脱液中的有机溶剂得到浓缩液；(5)往浓缩液中加入酵母发酵，离心取上清液A。

【技术特征摘要】
1.一种回收高活性肽的方法，其特征在于，包括步骤：(1)往经酶解的鱼皮胶原肽产物中投入硅藻土和/或活性炭进行脱色脱臭，然后过滤分离得到胶原肽产物和含腥味物质的硅藻土和/或活性炭；(2)将所述含腥味物质的硅藻土和/或活性炭装入分离柱；(3)依次使用浓度分别为60-65％、75-80％、80-85％的有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱液；(4)蒸发除去洗脱液中的有机溶剂得到浓缩液；(5)往浓缩液中加入酵母发酵，离心取上清液A。2.如权利要求1所述回收高活性肽的方法，其特征在于，在所述步骤(2)中，所述含腥味物质的硅藻土和/或活性炭装入分离柱前，投入浓度为45％-50％的乙醇中进行重悬；将重悬后的混合悬液装入分离柱后，至少静置10min，放出清液B。3.如权利要求2所述回收高活性肽的方法，其特征在于，还包括步骤(6)：(6)将上清液A和清液B进行干燥获得高活性肽干粉。4.如权利要求3所述回收高活性肽的方法，其特征在于，在所述步骤(3)中，所述梯度洗脱的步骤为：先用1-2倍柱体积流量的60-65％乙醇，再用1-1.5倍柱体积流量的75-80％乙醇，最后用1-1.5倍柱体积流量的80-8...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋泽根，乐国伟，施用晖，刘会平，蒋亮，
申请(专利权)人：时代生物科技深圳有限公司，时代功能食品研究深圳有限公司，江南大学扬州食品生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44