The invention discloses a double fluorescent microsphere immunoassay method for PCV2 and CSFV IgG antibodies. The Cap gene fragment of type 2 porcine circovirus and the E2 gene fragment of hog cholera virus are shown. Their nucleotide sequences are shown in SEQ ID NO:1 ~ 2, respectively. The encoded recombinant protein is coupled with carboxyl fluorescent microspheres as antigen, and a double FMIA detection method is established. The detection method is fast, specific and sensitive. E2 antibody and Cap antibody detection method has good repeatability, and has no cross reaction with other common swine virus * positive sera, and has high sensitivity and specificity. Compared with commercial ELISA kit, the sensitivity is higher. This method can be used for the rapid differential diagnosis and detection of protective antibodies against hog cholera virus and ring type 2 virus infected pigs. It lays the experimental foundation for the further establishment of multiple detection methods for swine virus disease antibodies, and provides a new idea for the establishment of new serological diagnostic techniques for other animal diseases.
【技术实现步骤摘要】
一种PCV2、CSFVIgG抗体双重荧光微球免疫学检测方法
本专利技术涉及免疫学与病毒检测
,更具体地,涉及一种PCV2、CSFVIgG抗体双重荧光微球免疫学检测方法。
技术介绍
中国是养猪最多的国家,养猪在养殖业中有着举足轻重的地位,随着我国经济发展,养殖业的规模也将逐渐扩大,趋向于规模化、集约化养殖。随之而来的问题也慢慢浮现出来,尤其是猪传染病对养殖业的危害日渐突出。猪瘟(Classicalswinefever,CSF)是由猪瘟病毒(Classicalswinefevervirus,CSFV)引起的猪的一种急性或慢性、热性和高度接触性传染病。猪瘟是我国最主要的猪病之一,世界动物卫生组织(OIE)将本病列入法定的A类传染病,虽然世界上有不少国家已消灭了猪瘟,但我国地理环境复杂,流行形式多变,所以每年国家都指定必须免疫。猪瘟每年给养猪业造成严重的经济损失。该病以发病急、持续高热,全身泛发性小点出血,发病率和死亡率高为特征,猪(家猪和野猪)是唯一的易感宿主。猪瘟呈世界性分布,由于其危害程度高,近几十年来给养猪业造成了巨大的损失,不少国家先后采取了消灭猪瘟的措施。2型猪圆环病毒(PCV2),一种小的,无包膜的单链DNA病毒被认为是断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)的主要原因。PMWS的临床症状包括进行性体重减轻,呼吸系统疾病,黄疸和死亡率增加。猪圆环病毒2型对猪的危害极大,引起猪的一系列相关的临诊病症,其中包括PMWS、皮炎肾病综合征(PDNS)、母猪繁殖障碍等,给养猪业造成巨大的危害。猪病毒性传染病主要特点是:传播速度快、流行性广,危害大。猪瘟、猪圆环 ...
【技术保护点】
1.2型猪圆环病毒Cap基因片段在检测2型猪圆环病毒或制备2型猪圆环病毒检测试剂盒中的应用,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
【技术特征摘要】
1.2型猪圆环病毒Cap基因片段在检测2型猪圆环病毒或制备2型猪圆环病毒检测试剂盒中的应用,其特征在于,其核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。2.猪瘟病毒E2基因片段在检测猪瘟病毒或制备猪瘟病毒检测试剂盒中的应用,其特征在于,其核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。3.2型猪圆环病毒Cap重组蛋白在检测2型猪圆环病毒或制备2型猪圆环病毒检测试剂盒中的应用,其特征在于,其氨基酸序列如SEQIDNO:3所示。4.猪瘟病毒E2重组蛋白在检测猪瘟病毒或制备猪瘟病毒检测试剂盒中的应用,其特征在于,其氨基酸序列如SEQIDNO:4所示。5.一组用于检测2型猪圆环病毒和猪瘟病毒的羧基化荧光微球组,其特征在于,包括偶联有氨基酸序列如SEQIDNO:3所示的2型猪圆环病毒Cap重组蛋白的羧基化荧光微球和偶联有氨基酸序列如SEQIDNO:4所示的猪瘟病毒E2重组蛋白的羧基化荧...
【专利技术属性】
技术研发人员:张桂红,冀池海,王衡,曾梦,
申请(专利权)人:华南农业大学,
类型:发明
国别省市:广东,44
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