一种快速定量同时检测cTnI、CKMB、Myo的时间分辨荧光免疫层析试剂及制备方法技术

技术编号:14056410 阅读:610 留言:0更新日期:2016-11-27 02:02
本发明专利技术属于临床医学诊断领域,特别涉及一种快速定量同时检测cTnI、CKMB、Myo的时间分辨荧光免疫层析试剂及制备方法。该试剂由试纸条和荧光液两部分组成。其中,试纸条包括底板、Fusion5、硝酸纤维素膜和吸水垫;所述Fusion5、硝酸纤维素膜和吸水垫水平方向顺序连接固定于底板上。本发明专利技术利用时间分辨荧光微球提高荧光强度,降低背景信号,同时定量检测全血、血清或血浆中的cTnI、CKMB、Myo三项指标,样本仅需要10~20μl。该试纸条具有方便快捷、操作简单、检测时间短、特异性强、灵敏度高、检测结果更加准确,适用于临床POCT的快速诊断。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于临床医学诊断领域,特别涉及一种快速定量同时检测cTnI、CKMB、Myo时间分辨荧光免疫层析试剂及其制备方法。
技术介绍
肌钙蛋白是有肌钙蛋白T(cTnT),肌钙蛋白C(cTnC),肌钙蛋白I(cTnI)三个亚单位组成的复合体。cTnI的分子量为22.5kD,多肽的N端较骨骼肌TnI多26个氨基酸,氨基酸顺序差异达40%,因而抗原性与骨骼肌明显不同。cTnI作为一种新的诊断标志物被应用于急性心肌梗死(AMI)的临床诊断,特别是对那些没有心电图诊断的患者更加重要。当AMI时,cTnI会在4~8小时内从损伤的心肌细胞释放到血液中,并超出正常浓度范围。通常,AMI发病12~18小时后,达到最高浓度,在5~10天内维持高值。在美国心脏病学会和美国心脏协会的最新指南显示,由于对心肌的高特异性和诊断效率等原因,cTnI对检测心肌功能障碍,具有较高的应用价值。肌红蛋白(MYO)是横纹肌组织特有的一种含有亚铁血红素的低分子色素蛋白,主要分布在心肌和骨骼肌组织中。在急性心肌损伤时,MYO最先被释放到血液中,在症状出现2-3小时后MYO值超出正常上限,9-12小时达到峰值,24-36小时本文档来自技高网...
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【技术保护点】
一种快速定量同时检测cTnI、CKMB、Myo的时间分辨荧光免疫层析试剂及制备方法,其特征在于:该试剂由试纸条和荧光液两部分组成;所述试纸条包括底板(1)、Fusion5(2)、硝酸纤维素膜(3)和吸水垫(4);所述Fusion5(2)、硝酸纤维素膜(3)和吸水垫(4)水平方向顺序连接固定于底板上;所述荧光液(9)包含Myo单克隆抗体2标记的荧光微球、cTnI单克隆抗体2标记的荧光微球、CKMB单克隆抗体2标记的荧光微球、羊抗兔抗体标记的荧光微球。

【技术特征摘要】
1.一种快速定量同时检测cTnI、CKMB、Myo的时间分辨荧光免疫层析试剂及制备方法,其特征在于:该试剂由试纸条和荧光液两部分组成;所述试纸条包括底板(1)、Fusion5(2)、硝酸纤维素膜(3)和吸水垫(4);所述Fusion5(2)、硝酸纤维素膜(3)和吸水垫(4)水平方向顺序连接固定于底板上;所述荧光液(9)包含Myo单克隆抗体2标记的荧光微球、cTnI单克隆抗体2标记的荧光微球、CKMB单克隆抗体2标记的荧光微球、羊抗兔抗体标记的荧光微球。2.根据权利要求1所述的快速定量同时检测cTnI、CKMB、Myo的时间分辨荧光免疫层析试剂,其特征在于:所述硝酸纤维素膜(3)上包被有Myo单克隆抗体1(5)、cTnI单克隆抗体1或多克隆抗体1(6)、CKMB多克隆抗体1(7)捕获分子构成的检测线和兔IgG抗体(8)构成的质控线。3.根据权利要求1所述的快速定量同时检测cTnI、CKMB、Myo的时间分辨荧光免疫层析试剂,其特征在于:所述的时间分辨荧光微球选自修饰过的聚苯乙烯微球。4.根据权利要求2所述的快速定量同时检测cTnI、CKMB、Myo的时间分辨荧光免疫层析试剂,其特征在于:所述的聚苯乙烯微球,表面修饰官能团为羧基、羟基或环氧基的一种,粒径为100~500nm。5.根据权利要求1所述的快速定量同时检测cTnI、CKMB、Myo的时间分辨荧光免疫层析试剂,其特征在于:所述的时间分辨荧光微球内部填充镧系元素的螯合物。6.根据权利要求4所述的快速定量同时检测cTnI、CKMB、Myo的时间分辨荧光免疫层析试剂,其特征在于:所述的镧系元素为铕、钐、鈊、镝中的一种。7.根据权利要求1所述的一种快速定量同时检测cTnI、CKMB、Myo的时间分辨荧光免疫层析试剂,其特征在于:所述的时间分辨荧光微球标记步骤如下:(1)肌钙蛋白I单克隆抗体2标记时间分辨荧光微球的制备及稀释:将时间分辨荧光微球溶于MES缓冲液中,加入活化剂活化;随后加入氨基乙酸,使得微球表面连接手臂;洗涤、离心后,再次加入活化剂活化;再次洗涤、离心,将时间分辨荧光...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱传增石晓强朱奇朗安永君张蕾
申请(专利权)人:上海奥普生物医药有限公司
类型:发明
国别省市:上海;31

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