一种同时提高高山火绒草愈伤组织的总黄酮和多种有机酸的调控方法技术

本发明专利技术公开了一种同时提高高山火绒草愈伤组织和悬浮培养细胞的总黄酮和多种有机酸的调控方法。本发明专利技术主要采用特定的调控方案，同时添加2种协同使用效果优良的诱导剂，AgNO3水溶液和水杨酸（SA）95%乙醇溶液，可以使高山火绒草愈伤组织和悬浮细胞的总黄酮、绿原酸、火绒草酸含量均得到提高。按本专利所述培养策略可以使高山火绒草细胞系在0.1‑200 L规模均保持稳定的生长和黄酮类及多种有机酸类次生代谢物的表达。

【技术实现步骤摘要】
一种同时提高高山火绒草愈伤组织的总黄酮和多种有机酸的调控方法
本专利技术属于植物组织培养
，涉及一种同时提高高山火绒草愈伤组织的总黄酮和多种有机酸的调控方法。
技术介绍
高山火绒草（Leontopodiumalpinum）是菊科火绒草属植物，又称“雪绒花”，一种多年生草本植物，欧洲著名的高山花卉，被国际自然保护联盟列为濒危物种，更被许多国家列为受保护的植物。火绒草具高度的自御能力，能抵抗恶劣的天气及其他生长环境。经研究高山火绒草植物中含有多种化学成分，迄今分离获得的有萜类、苯丙素类（酚酸、黄酮类、香豆素类、木脂素类）、脂肪酸类和聚乙炔类等。其中火绒草的地下部分多含倍半萜类、木质素类和聚乙炔类等，而地上部分含黄酮类、酚酸类（绿原酸、火绒草酸、火绒草酸B）和脂肪酸类较多。高山火绒草在生长早期几乎没有黄酮类等物质合成，开花之后直至盛花期各种代谢物开始积累，但黄酮类化合物含量依旧处于较低水平；火绒草酸被认为是一种天然的抗氧化剂，结构类似于绿原酸，是一种具有抗氧化活性的有机酸，存在于高山火绒草盛花期的地上部分。与其他自然抗氧化剂相比，火绒草酸的效果更加温和。高山火绒草不但在心血管及神经系本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时提高高山火绒草愈伤组织和悬浮培养细胞的总黄酮和多种有机酸的调控方法，其特征在于按如下的步骤进行：（1）高山火绒草愈伤组织悬浮培养：选取质地疏松、颜色浅黄色至黄色、生长速度快的高山火绒草愈伤组织，按0.1‑2 g/10 mL比例， 接入悬浮培养基CM2，置于摇床100‑115 rpm培养，温度保持20‑25℃，按5‑15 g/100 mL比例（湿重）每7‑10 d继代一次，生长速度2‑3倍/7 d；所述的悬浮培养基CM2指的是：B5 + 1‑2 mg/L 2,4‑D + 30 g/L蔗糖 + 0.1 mg/L L‑谷氨酰胺 + 0.2 mg/L 水解乳蛋白或B5 + 1‑2 mg/L...

【技术特征摘要】
1.一种同时提高高山火绒草愈伤组织和悬浮培养细胞的总黄酮和多种有机酸的调控方法，其特征在于按如下的步骤进行：（1）高山火绒草愈伤组织悬浮培养：选取质地疏松、颜色浅黄色至黄色、生长速度快的高山火绒草愈伤组织，按0.1-2g/10mL比例，接入悬浮培养基CM2，置于摇床100-115rpm培养，温度保持20-25℃，按5-15g/100mL比例（湿重）每7-10d继代一次，生长速度2-3倍/7d；所述的悬浮培养基CM2指的是：B5+1-2mg/L2,4-D+30g/L蔗糖+0.1mg/LL-谷氨酰胺+0.2mg/L水解乳蛋白或B5+1-2mg/L2,4-D+0.1-0.2mg/L6-BA+30g/L蔗糖+0.1mg/LL-谷氨酰胺+0.2mg/L水解乳蛋白，pH5.8-6.0；（2）高山火绒草愈伤组织的一次性生物反应器培养：选取状态一致的已培养7d的悬浮培养材料，向5L一次性生物...

【专利技术属性】
技术研发人员：王鹏，刘水燕，何俊雄，侯蒙蒙，张卫，谭光伟，
申请(专利权)人：天津艾赛博生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12