本发明专利技术公开了一种靶向温控载多糖长循环脂质体‑微泡复合物递药系统及其制备方法，本发明专利技术以复乳化溶剂挥发法制备的载树舌多糖热敏脂质体及以薄膜分散法制备的全氟丙烷微泡为例，用生物素‑亲和素偶联法将脂质体与微泡相连，制得载树舌多糖热敏脂质体‑微泡复合物。本发明专利技术以该复合物为递药系统，可利用微泡靶向爆破和热敏脂质体的局部温控效应，实现药物在亚高温温场局部组织的高效释放，提高药物的生物利用度，并且降低热消融肿瘤的残留。
【技术实现步骤摘要】
靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统及其制备方法
本专利技术涉及可用于药物传递的温控脂质体类物质，具体涉及一种靶向温控的长循环热敏脂质体-微泡复合物。
技术介绍
树舌多糖是从树舌的干燥子实体提取得到的有效成分，被证实具有良好抗肿瘤活性和增强机体免疫功能等作用。研究表明树舌多糖能通过调节T细胞活性，激发体内自主免疫反应，刺激IFN-γ和IL-2分泌，或抑制TGF-β1、IL-10和VEGF生成，从而阻止肿瘤生长发展。但是目前仍存在口服用药利用度低的问题。脂质体作为一种药物载体，近些年来备受关注。脂质体将药物包封于类似生物膜结构的双分子层中，可以提高药物的利用度、延长药物半衰期，控制药物在体内的释放。脂质体可显著降低抗癌药物的毒副作用，并提高疗效。长循环热敏脂质体是采用不同磷脂材料组成的具有不同相变温度的一类脂质体，并在脂质膜中加入表面活性剂或类脂进行修饰，通过温度控释药物，并增加循环稳定性和在体内的循环时间。超声引导下的热消融技术，可通过射频、消融、微波等迅速升高肿瘤靶区温度到60℃以上，造成局部组织蛋白凝固，但是目前热消融技术对肝肿瘤的治疗仍存在一定局限性。由于“热沉降”，在大血管周围的组织局部温度较低，以及肿瘤热消融中消融针的位置、肿瘤组织自身对热的传导性等，使温度分布不均(41～50℃)，导致出现亚高温温场，组织局部内肿瘤细胞不能被彻底杀灭，消融后仍有细胞存活，存在残余肿瘤组织。中国专利CN104367546A公开了靶向温控的载水飞蓟宾热敏脂质体-微泡复合体递药系统的制备方法，其采用商品化的微泡，并通过化学键合偶联载药脂质体，所制备的递药系统利用亚高温温场实现局部靶向抗肿瘤药物水飞蓟宾释放，降低肿瘤残余，提高消融疗效。但对于多糖类抗肿瘤药物(特别是水溶性药物活性成分)采用该系统存在以下问题：偶联效率低、稳定性差、载药量低，导致载药系统的制备和使用效率有待提高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统及其制备方法。为达到以上目的，本专利技术采用的技术方案为：一种靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统，包括微泡以及位于所述微泡周围并与该微泡偶联的若干个载多糖长循环热敏脂质体，所述微泡是以二棕榈酰磷酯酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素为磷脂材料，并采用薄膜分散法制成的。优选的，所述多糖选自树舌多糖等水溶性多糖类物质。优选的，所述载多糖长循环热敏脂质体是以二棕榈酰磷酯酰胆碱、单棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素为磷脂材料，并与水溶性多糖类物质(例如，树舌多糖等药物活性成分)通过复乳化溶剂挥发法制成的。优选的，所述偶联是所述微泡及载多糖长循环热敏脂质体各自表面的生物素通过亲和素进行连接而形成的。上述靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统的制备方法，包括以下步骤：1)载多糖长循环热敏脂质体的制备将二棕榈酰磷酯酰胆碱、单棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素加入有机溶剂中，得磷脂材料溶液A；将上述多糖类物质的水溶液加入到磷脂材料溶液A中后超声乳化，得到乳化液，将乳化液加入水中后超声乳化，得到W/O/W型复乳，除去该复乳中的有机溶剂，得到脂质体混悬液，将脂质体混悬液用水稀释后依次经微孔滤膜过滤、磷酸盐缓冲液透析，得到含有载多糖长循环热敏脂质体的溶液；2)微泡的制备将二棕榈酰磷酯酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素加入有机溶剂中，得到磷脂材料溶液B，通过蒸发除去磷脂材料溶液B中的有机溶剂，得到薄膜状物质，将薄膜状物质真空干燥后与由Tris-HCl、甘油及丙二醇组成的液体介质混合，然后依次经置换空气、机械振动，得到白色浑浊状微泡分散体系，向该分散体系中加入磷酸盐缓冲液后通过离心除去未配合的磷脂材料，得到生物素化的微泡的溶液；3)载多糖长循环热敏脂质体-微泡复合物的制备向生物素化的微泡的溶液中加入过量亲和素后振摇混匀，然后再加入含有载多糖长循环热敏脂质体的溶液并进行孵育，使得所述微泡及载多糖长循环热敏脂质体各自表面的生物素通过亲和素进行连接，得到载多糖长循环热敏脂质体-微泡复合物。优选的，所述步骤1)中，二棕榈酰磷酯酰胆碱:单棕榈酰磷脂酰胆碱:二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇:二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素的质量比为(30～35):(3～5):(2～5):(2～5)，上述多糖类物质的水溶液是将2～10mg的多糖类物质溶于1～5mL水而制成的，多糖类物质和磷脂材料(二棕榈酰磷酯酰胆碱、单棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素)的质量比为1:5～20。优选的，所述步骤1)中，超声乳化的条件为：超声功率为80～150W，超声时间为2～10min，乳化温度为0～4℃；乳化液的有机相:水相的体积比为1～4:1，所述复乳的水相:有机相:水相的体积比为1:(1～4):5(有机相指有机溶剂)。优选的，所述步骤1)中，微孔滤膜的孔径为0.2～0.8微米(滤膜过滤的目的：1.除菌，2.挤压过滤除去粒径较大的脂质体)；透析的条件为：透析袋截留分子量为8000～50000Da，透析液(磷酸盐缓冲液)每4～8h换液一次，透析24～36小时。优选的，所述步骤2)中，二棕榈酰磷酯酰胆碱:二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇:二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素的质量比为(5～50):(0.5～3):(0.5～3)。优选的，所述步骤2)中，蒸发采用旋转蒸发仪，旋蒸温度为20～40℃。优选的，所述步骤2)中，液体介质中Tris-HCl:甘油:丙二醇的体积比为(70～90):(10～30):(10～30)，其中，Tris-HCl选自pH7.4～8的0.1～0.3MTris-HCl。优选的，所述步骤2)中，真空干燥的温度为20～35℃，时间为12～24h(真空干燥的目的：除去有机溶剂)。优选的，所述步骤2)中，机械振动采用振荡器，功率为30～50W，时间为30～60s。从而保证制备的微泡可以在体外稳定存在，提高所述复合物的制备效率和稳定性。优选的，所述步骤2)中，为了达到纯化目的，离心设置的转速为1250～3500r/min。优选的，所述步骤3)中，孵育采用摇床，孵育条件为：转速为100～150r/min，时间为10～20min，温度为20～25℃。从而提高孵育过程中的偶联效率。本专利技术的有益效果体现在：本专利技术针对树舌多糖等水溶性多糖类药物成分口服用药生物利用度低，以及现有靶向温控亚高温温场局部给药系统用于该类药物成分时稳定性不足的问题，利用二棕榈酰磷酯酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素为磷脂原料，并采用薄膜分散法制备的生物素化的微泡，与同样生物素化的载药长循环热敏脂质体利用亲和素进行偶联，从而提出了一种载多糖长循环热敏脂质体-微泡复合物。该复合物作为递药系统不仅能够利用微泡的靶向爆破和热敏脂质体的局部温控效应，实现药物在亚高温温场局部高效释放，从而提高药物的生物利用度，并降低热消融治疗中的肿瘤残余，而且本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种靶向温控载多糖长循环脂质体‑微泡复合物递药系统，其特征在于：包括微泡以及位于所述微泡周围并与该微泡偶联的若干个载多糖长循环热敏脂质体，所述微泡是以二棕榈酰磷酯酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇‑生物素为磷脂材料，并采用薄膜分散法制成的。
【技术特征摘要】
1.一种靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统，其特征在于：包括微泡以及位于所述微泡周围并与该微泡偶联的若干个载多糖长循环热敏脂质体，所述微泡是以二棕榈酰磷酯酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素为磷脂材料，并采用薄膜分散法制成的。2.根据权利要求1所述一种靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统，其特征在于：所述多糖选自水溶性多糖类物质。3.根据权利要求1所述一种靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统，其特征在于：所述载多糖长循环热敏脂质体是以二棕榈酰磷酯酰胆碱、单棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素为磷脂材料，并与水溶性多糖类物质通过复乳化溶剂挥发法制成的。4.根据权利要求1所述一种靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统，其特征在于：所述偶联是所述微泡及载多糖长循环热敏脂质体表面的生物素通过亲和素进行连接而形成的。5.一种靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1)载多糖长循环热敏脂质体的制备将二棕榈酰磷酯酰胆碱、单棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素加入有机溶剂中，得磷脂材料溶液A；将多糖类物质的水溶液加入到磷脂材料溶液A中后超声乳化，得到乳化液，将乳化液加入水中后超声乳化，得到W/O/W型复乳，除去该复乳中的有机溶剂，得到脂质体混悬液，将脂质体混悬液用水稀释后依次经微孔滤膜过滤、磷酸盐缓冲液透析，得到含有载多糖长循环热敏脂质体的溶液；2)微泡的制备将二棕榈酰磷酯酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素加入有机溶剂中，得到磷脂材料溶液B，通过蒸发除去磷脂材料溶液B中的有机溶剂，得到薄膜状物质，将薄膜状物质真空干燥后与由Tris-HCl、甘油及丙二醇组成的液体介质混合，然后依次经置换空气、机械振动，得到白色浑浊状微泡分散体系，向该分散体系中加入磷酸盐缓冲液后通过离心除去未配合的磷脂材料，得到生物素化的微泡的溶液；3)载多糖长循环热敏脂质体-微泡复合物的制备向生物素化的微泡的溶液中加入亲和素后振摇混匀，然后再加入含有载多糖长循环热...
【专利技术属性】
技术研发人员：袁佳妮，罗文，张云飞，杨晓，刘海静，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。