用于递送信使RNA的组合物和方法技术

本发明专利技术提供了包含包封在脂质颗粒内的核酸分子例如mRNA分子的组合物。所述组合物可用于例如将所述mRNA分子引入人类受试者体内，在所述人类受试者体内，所述mRNA分子被翻译以生成用于改善疾病的一种或多种症状的多肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于递送信使RNA的组合物和方法相关申请的交叉引用本专利申请要求2016年6月30日提交的美国申请序列号62/357,189和2016年8月15日提交的美国申请序列号62/375,292的优先权权益，这些申请以引用方式并入本文。
技术介绍
人类中的一些疾病是因功能性蛋白通常存在且具有活性的细胞类型中该蛋白的缺失或损伤引起的。例如，由于编码基因的转录失活，或者由于编码基因中存在使蛋白完全或部分无功能的突变，功能性蛋白可以完全或部分缺失。因蛋白完全或部分失活引起的人类疾病的实例包括X连锁重症联合免疫缺陷(X-SCID)和肾上腺脑白质营养不良(X-ALD)。X-SCID由编码共用γ链蛋白的基因中的一个或多个突变引起，该共用γ链蛋白是若干白介素的受体的组分，这些白介素参与免疫系统内B细胞和T细胞的发育和成熟。X-ALD由称为ABCD1的过氧化物酶体膜转运蛋白基因中的一个或多个突变引起。患有X-ALD的个体的全身组织中具有非常高水平的长链脂肪酸，这会引起多种可能导致精神损伤或死亡的症状。已经尝试使用基因疗法来治疗因功能性蛋白通常存在且具有活性的细胞类型中该蛋白的缺失或损伤引起的一些疾病。基因疗法通常涉及将包含编码受影响蛋白的功能形式的基因的载体引入患者体内，并表达功能性蛋白以治疗疾病。迄今为止，基因疗法仅取得有限成功。因此，一直需要用于在患有因功能性蛋白的完全或部分缺失引起的疾病的人体内表达蛋白的功能形式的组合物和方法，并且需要经由触发较少的对疗法的免疫应答的方法和组合物递送核酸(例如，mRNA)。
技术实现思路
根据前述内容，本专利技术在某些实施方案中提供了可用于递送核酸的组合物和方法，例如以便在活细胞(例如，人体内的细胞)中表达一种或多种mRNA分子。mRNA分子可以编码在活细胞内表达的一种或多种多肽。在一些实施方案中，多肽在患病生物体(例如，哺乳动物，诸如人类)内表达，并且多肽的表达改善疾病的一种或多种症状。本专利技术的某些实施方案的组合物和方法尤其适用于治疗因人体内功能性多肽缺失或水平降低引起的人类疾病。在一个方面，本专利技术提供了一种脂质纳米颗粒(LNP)，其包含：(a)阳离子脂质；(b)非阳离子脂质；(c)皮质类固醇；以及(d)核酸，其中核酸和皮质类固醇包封在脂质纳米颗粒内。本专利技术的某些实施方案提供了一种包含脂质纳米颗粒的脂质纳米颗粒群体。本专利技术的某些实施方案提供了一种包含许多脂质纳米颗粒的脂质颗粒群体。在某些实施方案中，核酸是经HPLC纯化的mRNA。在某些实施方案中，LNP包含以至少3摩尔％的量存在的PEG-脂质缀合物。在某些实施方案中，LNP包含小于0.5摩尔％的磷脂。本专利技术的某些实施方案提供了一种脂质纳米颗粒群体，其包含至少一个选自以下的脂质纳米颗粒群体：(a)第一脂质纳米颗粒群体，所述脂质纳米颗粒各自包含阳离子脂质、非阳离子脂质和皮质类固醇；(b)第二脂质纳米颗粒群体，所述脂质纳米颗粒各自包含阳离子脂质、非阳离子脂质和核酸，其中第一脂质纳米颗粒群体不包含核酸，并且其中第二脂质纳米颗粒群体不包含皮质类固醇。本专利技术的某些实施方案提供了一种脂质纳米颗粒群体，其包含第一脂质纳米颗粒群体和第二脂质纳米颗粒群体。在某些实施方案中，核酸是经HPLC纯化的mRNA。本专利技术的某些实施方案提供了一种脂质纳米颗粒，其包含：(a)阳离子脂质；(b)以至少3摩尔％的量存在的PEG-脂质缀合物；以及(c)包封在脂质颗粒内的mRNA；前提条件是脂质颗粒包含小于0.5摩尔％的磷脂。在某些实施方案中，LNP包含皮质类固醇。在某些实施方案中，mRNA是经HPLC纯化的mRNA。某些实施方案提供了一种脂质纳米颗粒群体，其中群体中的每个脂质纳米颗粒包含：(a)阳离子脂质；(b)以至少3摩尔％的量存在的PEG-脂质缀合物；(c)包封在脂质纳米颗粒内的mRNA；前提条件是脂质纳米颗粒包含小于0.5摩尔％的磷脂。在某些实施方案中，LNP群体包含含有皮质类固醇的LNP。在某些实施方案中，mRNA是经HPLC纯化的mRNA。本专利技术的某些实施方案提供了一种包含许多脂质纳米颗粒的脂质纳米颗粒制剂，其中每个脂质纳米颗粒包含：(a)阳离子脂质；(b)非阳离子脂质；(c)包封在脂质颗粒内的mRNA，其中脂质纳米颗粒制剂的IFIT应答不超过磷酸盐缓冲盐水的参考IFIT应答的30倍。在某些实施方案中，mRNA是经HPLC纯化的mRNA。在某些实施方案中，LNP包含以至少3摩尔％的量存在的PEG-脂质缀合物。在某些实施方案中，LNP包含小于0.5摩尔％的磷脂。在某些实施方案中，LNP包含皮质类固醇。本专利技术的某些实施方案提供了一种制备脂质纳米颗粒的方法，其包括组合：(a)阳离子脂质；(b)非阳离子脂质；以及(c)经纯化的mRNA，以便形成脂质纳米颗粒，其中mRNA包封在脂质纳米颗粒内，并且其中脂质纳米颗粒的IFIT应答不超过磷酸盐缓冲盐水的参考IFIT应答的30倍。在某些实施方案中，mRNA是经HPLC纯化的mRNA。在某些实施方案中，LNP包含以至少3摩尔％的量存在的PEG-脂质缀合物。在某些实施方案中，LNP包含小于0.5摩尔％的磷脂。在某些实施方案中，LNP包含皮质类固醇。本专利技术的某些实施方案提供了一种制备包含许多脂质纳米颗粒的脂质纳米颗粒制剂的方法，其包括组合以下物质的步骤：(a)阳离子脂质；(b)非阳离子脂质；以及(c)经纯化的mRNA，以便形成包含许多脂质纳米颗粒的脂质纳米颗粒制剂，其中mRNA包封在脂质纳米颗粒制剂中的脂质颗粒内，并且其中脂质纳米颗粒制剂的IFIT应答不超过磷酸盐缓冲盐水的参考IFIT应答的30倍。在某些实施方案中，LNP包含以至少3摩尔％的量存在的PEG-脂质缀合物。在某些实施方案中，LNP包含小于0.5摩尔％的磷脂。在某些实施方案中，LNP包含皮质类固醇。本专利技术的某些实施方案提供了一种包含许多脂质纳米颗粒的脂质纳米颗粒制剂，所述脂质纳米颗粒制剂通过包括组合以下物质的步骤的方法制备：(a)阳离子脂质；(b)非阳离子脂质；以及(c)经纯化的mRNA，以便形成包含许多脂质纳米颗粒的脂质纳米颗粒制剂，其中mRNA包封在脂质纳米颗粒制剂中的脂质颗粒内，并且其中脂质纳米颗粒制剂的IFIT应答不超过磷酸盐缓冲盐水的参考IFIT应答的30倍。在某些实施方案中，LNP包含以至少3摩尔％的量存在的PEG-脂质缀合物。在某些实施方案中，LNP包含小于0.5摩尔％的磷脂。在某些实施方案中，LNP包含皮质类固醇。因此，在一个方面，本专利技术提供了一种脂质颗粒，其包含阳离子脂质、非阳离子脂质以及包封在脂质颗粒内的mRNA分子。本专利技术还提供了核酸-脂质颗粒，其各自包含(a)含有阳离子脂质、PEG-脂质和磷脂的脂质颗粒；(b)mRNA分子，其中mRNA分子包封在脂质颗粒内。脂质颗粒可任选地包含胆固醇。mRNA可以完全或部分包封在脂质颗粒内。在一些实施方案中，核酸-脂质颗粒的脂质:mRNA质量比为约9:1至约20:1。在一个具体实施方案中，核酸-脂质颗粒的脂质:mRNA质量比为约12:1。可对mRNA进行化学修饰，例如通过掺入假尿苷代替尿苷，和/或掺入5-甲基胞苷代替胞苷。本专利技术还提供了包含本专利技术的核酸-脂质颗粒的药物组合物。通常，该药物组合物包含赋形剂。另一方面，本本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种脂质纳米颗粒，其包含：(a)阳离子脂质；(b)非阳离子脂质；(c)皮质类固醇；以及(d)核酸，其中所述核酸和所述皮质类固醇包封在所述脂质纳米颗粒内。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.06.30 US 62/357,189;2016.08.15 US 62/375,2921.一种脂质纳米颗粒，其包含：(a)阳离子脂质；(b)非阳离子脂质；(c)皮质类固醇；以及(d)核酸，其中所述核酸和所述皮质类固醇包封在所述脂质纳米颗粒内。2.一种脂质纳米颗粒群体，其包含如权利要求1所述的脂质纳米颗粒。3.一种脂质纳米颗粒群体，其包含至少一个选自以下的脂质纳米颗粒群体：(a)第一脂质纳米颗粒群体，所述脂质纳米颗粒各自包含阳离子脂质、非阳离子脂质和皮质类固醇；以及(b)第二脂质纳米颗粒群体，所述脂质纳米颗粒各自包含阳离子脂质、非阳离子脂质和核酸，其中所述第一脂质纳米颗粒群体不包含核酸，并且其中所述第二脂质纳米颗粒群体不包含皮质类固醇。4.一种脂质纳米颗粒群体，其包含如权利要求3所述的第一脂质纳米颗粒群体和第二脂质纳米颗粒群体。5.如权利要求1至4中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述核酸是mRNA。6.如权利要求1至5中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述皮质类固醇的logP大于3.0。7.如权利要求1至6中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述皮质类固醇是糖皮质激素。8.如权利要求1至6中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述皮质类固醇是盐皮质激素。9.如权利要求1至6中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述皮质类固醇是氯倍他索。10.如权利要求1至9中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述非阳离子脂质选自PEG-脂质缀合物和磷脂。11.如权利要求1至10中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述脂质纳米颗粒还包含胆固醇。12.如权利要求10和11中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述磷脂包括二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)或它们的混合物。13.如权利要求10和11中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述PEG-脂质缀合物选自由以下组成的组：PEG-二酰基甘油(PEG-DAG)缀合物、PEG-二烷氧基丙基(PEG-DAA)缀合物、PEG-磷脂缀合物、PEG-神经酰胺(PEG-Cer)缀合物以及它们的混合物。14.如权利要求13所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述PEG-脂质缀合物是PEG-DAA缀合物。15.如权利要求14所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述PEG-DAA缀合物选自由以下组成的组：PEG-二癸氧基丙基(C10)缀合物、PEG-二月桂氧基丙基(C12)缀合物、PEG-二肉豆蔻氧基丙基(C14)缀合物、PEG-二棕榈氧基丙基(C16)缀合物、PEG-二硬脂氧基丙基(C18)缀合物以及它们的混合物。16.如权利要求1至15中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述脂质纳米颗粒的脂质:核酸质量比为约9:1至约20:1。17.如权利要求1至16中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述mRNA是经化学修饰的。18.如权利要求1至17中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述脂质纳米颗粒包含电子致密核。19.如权利要求1至17中任一项所述的脂质纳米颗粒或其群体，其中所述脂质...

【专利技术属性】
技术研发人员：迈克尔·J·艾布拉姆斯，詹姆斯·海斯，亚当·贾奇，基尤·蒙格·莱姆，洛恩·拉尔夫·帕尔默，斯蒂芬·P·里德，爱德华·D·亚沃尔斯基，
申请(专利权)人：阿布特斯生物制药公司，
类型：发明
国别省市：加拿大,CA