本发明专利技术大体上关于使用人造小RNA，诸如小干扰RNA(siRNA)、微RNA(miRNA)及其发夹型前驱体(pre‑miRNA)作为肿瘤抑制抗癌药的组合物及方法，其用于治疗人类肿瘤及癌症，尤其(但不限于)用于治疗皮肤癌(黑色素瘤)、血液癌(白血病)、前列腺癌、乳癌、肝癌及肺癌以及各种赘生性肿瘤，诸如含有源自组织的全部三个胚层，包括外胚层、中胚层及内胚层的多种肿瘤细胞及癌细胞的脑肿瘤及畸胎癌。更特定言之，本发明专利技术是关于miR‑302类siRNA(siR‑302)及/或miR‑302前驱体(pre‑miR‑302)用于开发针对多种人类癌症，特别是肺癌的新颖药物及疗法的用途。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用MIR-302前驱体作为抗癌药物用于治疗人类肺癌的组合物及方法以引用方式并入任何优先权申请案标记于随本申请案提交的申请资料表中的国外或国内优先权主张的任何及所有申请案于此将以引用的方式并入。本申请案主张于2012年8月10日申请的美国专利申请案第13/572,263号的优先权、于2014年9月30日申请的美国专利申请案第14/502,608号的优先权、以及于2014年10月29日申请的美国专利申请案第14/527,439号的优先权，其全部名称皆为「AnInducibleGeneExpressionCompositionforUsingEukaryoticPol-2Promoter-DrivenTranscriptioninProkaryotesandTheApplicationsThereof」。本申请案亦主张于2016年5月27日申请的名称为「ProductionandUtilizationofANovelAnti-CancerDruginTherapy」的美国专利申请案第15/167,219号的优先权。本申请案进一步主张于2016年5月27日申请的名称为「UseofMicroRNAPrecursorsasDrugsforInducingCD34-positiveAdultStemCellExpansion」的美国专利申请案第15/167,226号的优先权。本申请案为于2012年8月10日申请的美国专利申请案第13/572,263号、于2014年9月30日申请的美国专利申请案第14/502,608号、以及于2014年10月29日申请的美国专利申请案第14/527,439号的部分延续案(CIP)申请案，其全部名称皆为「AnInducibleGeneExpressionCompositionforUsingEukaryoticPol-2Promoter-DrivenTranscriptioninProkaryotesandTheApplicationsThereof」。本申请案亦为于2016年5月27日申请的名称为「ProductionandUtilizationofANovelAnti-CancerDruginTherapy」的美国专利申请案第15/167,219号的部分延续案(CIP)申请案。本申请案进一步亦为于2016年5月27日申请的名称为「UseofMicroRNAPrecursorsasDrugsforInducingCD34-positiveAdultStemCellExpansion」的美国专利申请案第15/167,226号的部分延续案(CIP)申请案。其于此藉由引用并入，如同其完整地于本文中阐述。序列表的引用如通过EFS-Web以ASCII格式档案提交的序列表根据35U.S.C.§1.52(e)于此以引用的方式并入。序列表的ASCII格式档案的名称为23415553.TXT，ASCII格式档案的创建日期为2017年2月23日，且ASCII格式档案的大小为99KB。背景
本专利技术大体上关于使用重组小RNA，诸如小干扰RNA(siRNA)、微RNA(miRNA)及其发夹型前驱体(pre-miRNA)作为肿瘤抑制抗癌药的组合物及方法，其用于治疗人类肿瘤及癌症，尤其但不限于是用于治疗皮肤癌(黑色素瘤)、血液癌(白血病)、前列腺癌、乳癌、肝癌及肺癌以及各种赘生性肿瘤(neoplastictumors)，诸如含有源自组织的全部三个胚层，包括外胚层、中胚层及内胚层的多种肿瘤细胞及癌细胞的脑肿瘤及畸胎癌。更特定言之，本专利技术是关于人造miR-302类siRNA(siR-302)及/或miRNA前驱体(pre-miR-302)用于开发用于多种抗癌疗法，特别是用于人类肺癌治疗的新颖药物的用途。此等siRNA/pre-miR-302药物可在原核生物中以表达复制(competent)DNA载体及/或所得发夹型RNA产物形式产生。由于原核细胞不天然地转录或加工发夹型RNA，其中该等RNA的结构类似于原核生物的基因表达系统中的转录终止代码，且另外考虑到原核生物中缺乏的若干必需酶，诸如第二型RNA聚合酶(Pol-2)及RNaseIIIDicer，本专利技术另外教示使用新发现的原核生物中发夹型RNA转录机制(其首先揭示于专利技术人的美国专利申请案第13/572,263号的优先权中)来于原核生物中表达pre-miRNAs，或称作原核生物产生的miRNA前驱体(pro-miRNA)的新颖基因表达方法。另外，由于miR-302为人类胚胎干细胞(hESCs)中的肿瘤抑制因子微小RNA，本专利技术中呈现的专利技术人的发现可另外用于设计及开发适用于治疗其他肿瘤及癌症相关疾病的新药物、疫苗及/或疗法。相关技术的描述干细胞为含有许多适用于刺激新细胞生长及组织再生、修复或再生受损/老化组织、治疗衰老相关疾病及预防肿瘤形成及癌症进展的有效成分的资源丰富的百宝箱。因此，可设想，专利技术人可使用此等干细胞作为筛检、鉴别及制造此等干细胞特异性成分的工具以开发针对多种人类疾病的新颖药物及疗法。因此，由此获得的药物及疗法可用于许多医药及治疗应用，诸如用于研究、诊断及/或治疗的生物医学套组、装置及设备，或其组合。微RNA(miRNA)为人胚胎干细胞(hESCs)中的主要有效成分之一。主要hESC特异性miRNA种类包括但不限于miR-302家族、miR-371至373家族及miR-520家族的成员。其中，已发现miR-302家族在肿瘤抑制中起功能性作用(Lin等人，2008及2010；Lin等人的美国专利第9,394,538号、第9,399,773号及第9,422,559号)。MiR-302含有八(8)个家族成员(miR-302s)，包括四(4)个正义miR-302(a、b、c及d)及四(4)个反义miR-302*(a*、b*、c*及d*)。此等正义及反义miRNA成员部分匹配且可彼此形成双链双螺旋。miR-302的前驱体由miR-302a与a*(pre-miR-302a)、miR-302b与b*(pre-miR-302b)、miR-302c与c*(pre-miR-302c)及miR-302d与d*(pre-miR-302d)形成，在一端有连接序列(茎环)。为了活化miR-302功能，miR-302前驱体(pre-miR-302s)首先由细胞RNaseIIIDicer加工为成熟miR-302s且进一步与某些阿尔古(AGO)蛋白形成RNA诱导的沉默复合物(RISCs)，随后导致许多靶基因转录物(mRNAs)、尤其包括一些主要致癌基因mRNAs的RNA干扰(RNAi)介导的直接降解或转译抑制，如专利技术人的先前美国专利第9,394,538号、第9,399,773号及第9,422,559号(Lin等人)中所揭示。MiR-302为hESCs及诱导多能干细胞(iPSCs)中发现的最富集非编码(ncRNA)种类。专利技术人的先前研究已显示，miR-302超出hESCH1或H9细胞中所发现水平的异位过度表达能够以类似于桑椹胚阶段早期人类受精卵的多能干细胞的几乎无致肿瘤性的情况下将人类正常及癌细胞两者重新编程为hESC类iPSCs(Lin等人，2008、2010及201本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种使用重组发夹型微RNA前驱体(pre‑miRNA)来治疗人类肺癌的方法，其包含：(a)提供含有SEQ.ID.NO.3的至少一个发夹型pre‑miRNA；及(b)将(a)的该pre‑miRNA与含有至少一个人类肺癌细胞的癌症个体接触，以在(b)的该癌症个体的该肺癌细胞上激活(a)的该pre‑miRNA的抗癌效果。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.05.27 US 15/167,219;2016.05.27 US 15/167,2261.一种使用重组发夹型微RNA前驱体(pre-miRNA)来治疗人类肺癌的方法，其包含：(a)提供含有SEQ.ID.NO.3的至少一个发夹型pre-miRNA；及(b)将(a)的该pre-miRNA与含有至少一个人类肺癌细胞的癌症个体接触，以在(b)的该癌症个体的该肺癌细胞上激活(a)的该pre-miRNA的抗癌效果。2.如权利要求1所述的方法，其中含有SEQ.ID.NO.3的该pre-miRNA为SEQ.ID.NO.6、SEQ.ID.NO.7、SEQ.ID.NO.8或SEQ.ID.NO.9、或其组合。3.如权利要求1所述的方法，其中含有SEQ.ID.NO.3的该pre-miRNA为miR-302a、miR-302b、miR-302c或miR-302d的前驱体、或其组合。4.如权利要求1所述的方法，其中含有SEQ.ID.NO.3的该pre-miRNA进一步在人类肺癌细胞中被处理为miR-302a、miR-302b、miR-302c或miR-302d、或其组合。5.如权利要求1所述的方法，其中该pre-miRNA由原核细胞中的真核启动子驱动的RNA转录产生。6.如权利要求5所述的方法，其中诱导该真核启动子驱动的RNA转录所需的DNA序列为位于质体载体中的基因表达盒。7.如权利要求6所述的方法，其中该基因表达盒编码SEQ.ID.NO.5的序列。8.如权利要求6所述的方法，其中该质体载体为含有巨细胞...
【专利技术属性】
技术研发人员：林希龙，吴堂熙，吕萱萱，
申请(专利权)人：林希龙，吴堂熙，
类型：发明
国别省市：美国,US
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