本发明专利技术公开了TXN基因在诊断呼吸道合胞病毒感染中的用途。呼吸道合胞病毒感染患者的血液中TXN基因含量与正常人之间存在显著差异，根据差异可以区分呼吸道合胞病毒感染者和非感染者。本发明专利技术还公开了呼吸道合胞病毒感染的诊断产品，该诊断产品可以通过检测血液中TXN基因来实现呼吸道合胞病毒感染的诊断目的。
Detection of TXN Gene and Its Expressed Products as a Molecular Marker of Respiratory Syncytial Virus Infection
The invention discloses the use of TXN gene in the diagnosis of respiratory syncytial virus infection. There is a significant difference between the TXN gene content in the blood of patients with respiratory syncytial virus infection and that of normal people. According to the difference, the patients infected with respiratory syncytial virus and non-infected persons can be distinguished. The invention also discloses a diagnostic product for respiratory syncytial virus infection, which can realize the diagnostic purpose of respiratory syncytial virus infection by detecting TXN gene in blood.
【技术实现步骤摘要】
检测呼吸道合胞病毒感染的分子标志物-TXN基因及其表达产物
本专利技术属于分子诊断领域，涉及检测呼吸道合胞病毒感染的分子标志物，具体涉及检测呼吸道合胞病毒感染的分子标志物-TXN基因及其表达产物。
技术介绍
呼吸道合胞病毒(RespiratorySycytialVirus，RSV)属于副粘病毒科肺病毒属，是一种具被膜的非节段单链RNA(负链)病毒。它是引起婴幼儿下呼吸道感染最常见的病毒，主要通过呼吸道侵入人体，并通过空气(飞沫、尘埃)传播，病毒主要在鼻咽上皮细胞中增殖。呼吸道合胞病毒是5岁以内儿童病毒性肺炎的最主要病原体，也是婴儿猝死的病因之一。儿童对RSV普遍易感，且再感染率很高。成人急性感染也很常见，老年人可引起严重肺炎，并发展为成人呼吸窘迫综合征(ARDS)。RSV感染症状主要包括咳嗽、鼻塞、流涕、咽喉不适等呼吸道局部症状和发热、乏力、头痛、肌肉酸痛等全身症状。婴幼儿常伴发热，气急。X线胸片常显示明显的支气管肺炎和/或毛细支气管炎表现。在成人和年长儿，感染可能不明显或仅表现为无热性上呼吸道感染(普通感冒)。多种病毒性肺炎之间依靠临床症状几乎无法区别。在发达国家，有0.5-1.5％的住院婴幼儿死于RSV感染。RSV在老人聚居地易发生暴发性流行，患病率和死亡率极高。全世界每年有6千5百万例感染，16万人死亡。目前临床使用的检测该病毒的方法主要是免疫学方法，如鼻咽分泌物等标本中特异抗原检测或是血清中抗体检测。常见的快速胶体金法检测时间短，但灵敏度低；免疫荧光法进行抗原检测时对于低浓度感染样本的检测效果不理想[Casiano-Colon，A.E.，B.B.Hulbert，etal.(2003).Lackofsensitivityofrapidantigentestsforthediagnosisofrespiratorysyncytialvirusinfectioninadults.JClinVirol28(2)：169-74；Rabagliati，R.，M.Serri，etal.(2007).Utilityofrealtimepolymerasechainreactioninthediagnosisofrespiratorysyncytialvirusinfectionamongadultpatients.RevChilenaInfectol24(6)：441-5]，需经病毒培养后再进行检测，且对于操作人员要求较高，存在非特异染色等问题。病毒培养又需要有活病毒存在才能实现，且操作繁琐。通过对患者血清抗体测定来诊断RSV感染，不能为临床医生适时提供诊疗依据。因为体内特异性抗体产生慢，且滴度低，检测的敏感性不高，而且这种检测的免疫学方法反映的是感染的一个间接指标，不能替代直接的病原学检测。因此检测RSV抗原成为了疾病早期诊断的重要途径，但是诊断RSV感染不论是通过血清学方法还是抗原检查，都比较困难，因为病毒滴度在分泌物分钟较低，因此需要开发敏感、特异且实用的早期诊断方法，为临床提供及时和准确的病原检测报告，这对于明确病因，控制疾病的蔓延，采用特异性针对性治疗手段，防止抗生素滥用均有重要意义。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种可用于呼吸道合胞病毒感染早期诊断的分子标志物。相比传统的呼吸道合胞病毒感染的诊断方法，使用基因标志物来诊断呼吸道合胞病毒感染的具有及时性、特异性和灵敏性。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了检测TXN基因表达的产品在制备诊断呼吸道合胞病毒感染的工具中的应用。进一步，上面所提到的检测TXN基因表达的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测TXN基因表达水平以诊断呼吸道合胞病毒感染的产品。进一步，通过RT-PCR诊断呼吸道合胞病毒感染的产品至少包括一对特异扩增TXN基因的引物；通过实时定量PCR诊断呼吸道合胞病毒感染的产品至少包括一对特异扩增TXN基因的引物；通过免疫检测诊断呼吸道合胞病毒感染的产品包括：与TXN蛋白特异性结合的抗体；通过原位杂交诊断呼吸道合胞病毒感染的产品包括：与TXN基因的核酸序列杂交的探针；通过芯片诊断呼吸道合胞病毒感染的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与TXN蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与TXN基因的核酸序列杂交的探针。在本专利技术的具体实施方案中，通过实时定量PCR诊断呼吸道合胞病毒感染的产品至少包括一对特异扩增TXN基因的引物的序列，其序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。根据本专利技术的另一个方面，本专利技术提供了一种诊断呼吸道合胞病毒感染的工具，所述工具包括检测样本中TXN基因表达水平的试剂。进一步，所述试剂包括能够结合TXN基因的核酸或者能够结合TXN蛋白的物质。所述核酸能够检测TXN基因的表达水平；所述物质能够检测TXN蛋白的表达水平。更进一步，所述核酸包括扩增TXN基因的引物，引物可以通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来适当地设计，并通过化学合成来制备。在本专利技术的具体实施方案中，所述核酸为QPCR实验中使用的扩增引物，所述引物的序列如SEQIDNO.1(正向序列)和SEQIDNO.2(反向序列)所示。上面所述的核酸还可包括探针，所述探针可以通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来恰当设计，并通过化学合成来制备，或者可以通过从生物材料制备含有期望核酸序列的基因，并使用设计用于扩增期望核酸序列的引物扩增它来制备。更进一步，所述物质包括针对TXN蛋白的抗体。进一步，所述诊断工具包括芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测TXN基因转录水平的针对TXN基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体的TXN蛋白的特异性抗体；所述基因芯片可用于检测包括TXN基因在内的多个基因(例如，与呼吸道合胞病毒感染相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括TXN蛋白在内的多个蛋白质(例如与呼吸道合胞病毒感染相关的多个蛋白质)的表达水平。通过将多个与呼吸道合胞病毒感染的标志物同时检测，可大大提高呼吸道合胞病毒感染诊断的准确率。其中，所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测TXN基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括TXN蛋白的特异性抗体。进一步，所述试剂包括使用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片方法检测TXN基因表达水平过程中所需的试剂。优选度，所述试剂包括针对TXN基因的引物和/或探针。根据TXN基因的核苷酸序列信息容易设计出可以用于检测TXN基因表达水平的引物和探针。与TXN基因的核酸序列杂交的探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合，任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样，所述探针的长度可长至60、80、100、15本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.检测TXN基因表达的产品在制备诊断呼吸道合胞病毒感染的工具中的应用。
【技术特征摘要】
1.检测TXN基因表达的产品在制备诊断呼吸道合胞病毒感染的工具中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括：通过反转录PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测TXN基因表达水平以诊断呼吸道合胞病毒感染的产品。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，通过反转录PCR诊断呼吸道合胞病毒感染的产品至少包括一对特异扩增TXN基因的引物；通过实时定量PCR诊断呼吸道合胞病毒感染的产品至少包括一对特异扩增TXN基因的引物；通过免疫检测诊断呼吸道合胞病毒感染的产品包括：与TXN蛋白特异性结合的抗体；通过原位杂交诊断呼吸道合胞病毒感染的产品包括：与TXN基因的核酸序列杂交的探针；通过芯片诊断呼吸道合胞病毒感染的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与TXN蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与TXN基因的核酸序列杂交的探针。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨承刚，石小峰，黄露宁，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。