本发明专利技术公开了一种提高机体免疫力的鲍鱼肽及其制备方法与应用，所述鲍鱼肽的制备包括如下步骤：(1)取鲍鱼肉，加入去离子水通过打浆得含粗蛋白的浆液；(2)向所述浆液中加入去离子水，以得到蛋白浓度为1mg/ml‑5mg/ml的蛋白溶液；(3)向所述蛋白溶液中加入4000‑8000U/g的蛋白酶，在45‑65℃的温度下酶解1‑5h，得鲍鱼肽粗品。本发明专利技术所提供的方法利用蛋白酶对鲍鱼蛋白进行酶解，得到所述鲍鱼肽，具有提高免疫力和应激能力的优势。
A Abalone Peptide for Improving Body Immunity and Its Preparation Method and Application
The invention discloses an abalone peptide for improving body immunity and its preparation method and application. The preparation of the abalone peptide comprises the following steps: (1) taking abalone meat, adding deionized water and beating to obtain a serum containing crude protein; (2) adding deionized water to the serum to obtain a protein solution with a protein concentration of 1 mg/ml 5 mg/ml; (3) adding 4000 800 to the protein solution. The crude abalone peptide was obtained by enzymatic hydrolysis of 0 U/g protease at 45 65 C for 1 5 h. The method of the invention utilizes protease to hydrolyze abalone protein and obtains the abalone peptide, which has the advantages of improving immunity and stress ability.
【技术实现步骤摘要】
一种提高机体免疫力的鲍鱼肽及其制备方法与应用
本专利技术涉及生物工程
，具体涉及一种提高机体免疫力的鲍鱼肽及其制备方法与应用。
技术介绍
鲍鱼自古被誉为海味珍品之冠，素有“一口鲍鱼一口金”之说，是一类符合现代人追求的高蛋白、低脂肪的高级海鲜。鲍鱼其名为鱼，实则非鱼，是种属原始海洋贝类，单壳软体动物。是名贵的“海珍品”之一，味道鲜美，营养丰富，被誉为“软黄金”。鲜品可以食用的部分蛋白质24％，脂肪0.44％；干品含蛋白质40％，糖元33.7％，脂肪0.9％以及多种维生素和微量元素，是一种对人体非常有利的高蛋白，低脂肪食物。因富含谷氨酸，味道非常鲜美。被誉为“餐桌黄金，海珍之冠”，其肉质细嫩，营养丰富。鲍鱼一直是中国的传统名贵食材，具有很高的营养价值，并且具有很高的药用价值，富含蛋白质、肝糖、多种氨基酸、维生素、微量元素及其他生理活性物质(其中,具有双向性调节血压的作用)。在中国古代，《本草纲目》中就有记载，鲍鱼味甘，性平，有清热明目、补虚滋阴、养血益胃、补肝益皆，故有＂明目鱼＂之棘。有关鲍鱼记载的还有《药典》、《名医别录》和《黄帝内经》等等。随着对鲍鱼的深入研究，鲍鱼的药用价值也为现代医学认可。多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质，具有安全、副作用小、用量小、功能多样、特异性强等特点，在细胞生理及代谢功能的调节上具有重要的作用。肽具有极强的活性和多样性，可全面调节人体生理功能，增强人体生理活性。肽不仅能提供人体生长发育所需的营养物质，而且具有特殊的生物学功能，可防治血栓、高血脂、高血压、延缓衰老，抗疲劳，提高机体免疫力，促进人体对蛋白质、维生素、氨基酸等营养物质和钙、铁、锌、硒、镁、铜等多种有益的微量元素的吸收。经酶解鲍鱼蛋白产生的鲍鱼肽更易吸收利用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种鲍鱼肽的制备方法。具体地，该方法包括如下步骤：1)取鲍鱼肉，加入去离子水通过打浆得含粗蛋白的浆液；2)向所得浆液中加入去离子水，以得到蛋白浓度为1mg/ml-5mg/ml的蛋白溶液；3)向所得蛋白溶液中加入4000-8000U/g的蛋白酶，在45-65℃的温度下酶解1-5h，得鲍鱼肽粗品。优选地，所述蛋白酶选自以下中的一种或多种：中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶.优选地，所述蛋白酶为胰蛋白酶和碱性蛋白酶以重量比1-2:1(优选为1.5:1)组成的复合酶。该复合酶的水解能力最大，因此将该复合酶作为酶解法制备鲍鱼肽的最佳酶制剂。优选地，所述蛋白酶的加入量为5000-7000U/g，更优选为6000U/g。在该加入量下，能够得到最大的肽得率，之后随着酶加量的增加肽得率的变化趋势趋于缓慢。优选地，所述酶解在50-60℃的温度下进行，优选为55℃。该温度下，鲍鱼肽的得率最大，具有维持复合酶分子结构次级键稳定的优点，进一步维持复合酶的活力。优选地，所述酶解的时间为2-4h，优选为3h。酶解时间会影响蛋白的酶解反应，时间短酶解反应不彻底，时间过长又有可能出现过度水解，因此确定酶解时间很重要，在该酶解时间内，随着酶解时间的延长，鲍鱼肽得率逐渐升高，在3h时肽得率的变化趋势趋于缓慢。所以，从肽得率和成本两方面考虑，酶解时间优选为3h。优选地，步骤2)中，当所述蛋白酶为中性蛋白酶时，所述蛋白溶液的pH为7-8；当所述蛋白酶为碱性蛋白酶时，所述蛋白溶液的pH为9-12；当所述蛋白酶为风味蛋白酶时，所述蛋白溶液的pH为6-8；当所述蛋白酶为胃蛋白酶时，所述蛋白溶液的pH为2-3；当所述蛋白酶为木瓜蛋白酶时，所述蛋白溶液的pH为7-9；当所述蛋白酶为胰蛋白酶时，所述蛋白溶液的pH为7-9。优选地，步骤2)中，所述pH用HCl和/或NaOH进行调整。优选地，所述方法还包括对步骤3)所得鲍鱼肽粗品进行纯化的步骤。优选地，所述纯化步骤具体为：酶解完成后，在80-120℃的热水浴中保持10-20min使所述蛋白酶失活，将所得酶解液经过2000-6000r/min离心10-30min，得到酶解上清液，冷冻干燥，即得所述鲍鱼肽。本专利技术同时提供了上述方法制备得到的鲍鱼肽，所述鲍鱼肽的分子量范围为：1#分子量0.5kDa-1.0kDa，2#分子量1.0kDa-1.5kDa，3#分子量1.5kDa-2.0kDa或4#分子量2.0kDa-，优选所述鲍鱼肽的分子量为1.5kDa-2.0kDa(具有更理想的应用活性)。本专利技术同时提供了上述鲍鱼肽在提高机体免疫力和应激能力的应用，尤其是在制备提高机体免疫力和应激能力的食品、药品及保健品中的应用。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。本专利技术所用到的材料及设备的名称及来源如下：蛋白酶：实验仪器：①指标的测定a.蛋白质的总氮含量测定(采用GE/T5009.5-2003)准确称取鲍鱼粗蛋白0.5-1.0g，置于干燥洁净的500ml凯氏定氮消化管中。然后加入经过研磨的硫酸铜0.2g、硫酸钾6g和浓硫酸10ml，轻轻摇匀后，把消化管放入消化炉进行消化操作。首先设定250℃，待全部炭化消化管中内容物，泡沫几乎不再产生，然后再改为450℃，保持瓶内液体微沸进行消化处理，使液体变为蓝绿色透明后，再继续加热微沸30min后停止加热(特别注意：这里继续通冷却水直至完全冷却)。冷却，把消化管放在自动凯氏定氮仪进行自动蒸馏操作，蒸馏结束后，然后用少量去离子水清洗氨气和硫酸出口管下端外部，接着取下接收瓶，再向接收瓶内加入1-2滴混合指示剂(甲基红和溴甲酚绿)。然后用盐酸标准溶液(0.1mol/L)滴定至粉红色为终点，记录所滴定的盐酸标准溶液体积。同时，准确吸取相同量的试剂空白消化液按上述方法操作。计算公式如下：X(100％)＝(V1-V2)*C*0.014*6.25*100/W式中：X：粗蛋白中蛋白质总氮的百分含量；V1：粗蛋白试样消耗盐酸标准溶液的体积，mL；V2：试剂空白消耗盐酸标准溶液的体积，mL；C：盐酸标准溶液的浓度，mol/L；0.014：与1.0mL盐酸标准滴定溶液(1.000mol/L)相当的氮质量b.氨基态氮的测定酸度计甲醛滴定法的原理；氨基酸含有氨基和羧基，具有酸碱两性，加入甲醛的氨基酸中的氨基作用，可消除其碱性，使羧基显示出酸性，然后用氨氧化钠标准溶液滴定，以酸度计指示为终点，即可对氨基酸的含量进行测定。反应式如下：R-CH(NH2)-COOH+HCHO→R-CH(NH2-CH2OH)+H2O试剂：36％甲醛溶液；0.05mol/L氢氧化钠标准溶液仪器：酸度计；磁为揽拌器；10ml微量碱式滴定管具体操作步骤：取5ml酶解溶液的上清液置于50ml的容量瓶中，加去离子水至刻度线，即得到待测溶液。准确量取20ml的溶液置于200ml烧杯中，加去离子水60ml，然后插入pH计的玻璃电极，启动磁力揽拌器使溶液揽拌均匀，再用0.05mol/L氢氧化钠标准溶液滴定到酸度计指示到pH值8.2，然后再向上述液体中加入36％甲醛溶液10ml，混匀半分钟，再用0.05mol/L氢氧化钠标准溶液滴定到pH值9.2，记录后一操作用去的氢氧化钠标准溶液的体积，用作计算氨基酸态氮含量。同时，做一空白组实验，除不加样液外，其他同上。计算：式中：V1：测定用的样品稀释液加入甲醛后本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种鲍鱼肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)取鲍鱼肉，加入去离子水通过打浆得含粗蛋白的浆液；2)向所述浆液中加入去离子水，以得到蛋白浓度为1mg/ml‑5mg/ml的蛋白溶液；3)向所述蛋白溶液中加入4000‑8000U/g的蛋白酶，在45‑65℃的温度下酶解1‑5h，得鲍鱼肽粗品。
【技术特征摘要】
1.一种鲍鱼肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)取鲍鱼肉，加入去离子水通过打浆得含粗蛋白的浆液；2)向所述浆液中加入去离子水，以得到蛋白浓度为1mg/ml-5mg/ml的蛋白溶液；3)向所述蛋白溶液中加入4000-8000U/g的蛋白酶，在45-65℃的温度下酶解1-5h，得鲍鱼肽粗品。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述蛋白酶选自以下中的一种或多种：中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述蛋白酶为胰蛋白酶和碱性蛋白酶以重量比1-2:1组成的复合酶。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述蛋白酶的加入量为5000-7000U/g。5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述酶解在50-60℃的温度下进行。6.根据权利要求1-5...
【专利技术属性】
技术研发人员：鲍隆，杨赛，
申请(专利权)人：鲍隆，杨赛，
类型：发明
国别省市：山东,37
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