全过程靶向多肽及其在构建肿瘤靶向诊治递药系统中的应用技术方案

本发明专利技术属药学领域，具体涉及一种具有靶向脑毛细血管内皮细胞、肿瘤新生血管内皮细胞、肿瘤拟态血管、肿瘤细胞与肿瘤干细胞的全过程靶向多肽分子及其稳定优化多肽分子，以及其修饰的复合物、递药系统在肿瘤诊断和治疗中的用途。本发明专利技术制备了全过程靶向多肽WVAP及WVAP修饰的药物和高分子载体材料的制备，以及其在肿瘤影像和靶向治疗用递药系统构建中的应用，结果显示：WVAP可跨越血‑脑屏障，靶向肿瘤新生血管和跨血‑肿瘤屏障，靶向肿瘤拟态血管、肿瘤细胞及肿瘤干细胞；WVAP修饰的高分子载体材料所构建的纳米递药系统可有效地将所包载药物递送至脑内，靶向肿瘤组织，显著提高抗肿瘤药效。

Whole-process Targeted Peptide and Its Application in Construction of Tumor Targeted Diagnosis and Treatment Delivery System

The invention belongs to the field of pharmacy, in particular to a whole process targeting polypeptide molecule with targeting brain capillary endothelial cells, tumor neovascular endothelial cells, tumor mimetic vessels, tumor cells and cancer stem cells, and its stable optimized polypeptide molecule, as well as its modified complex and drug delivery system for cancer diagnosis and treatment. The present invention has prepared the whole process target polypeptide WVAP and WVAP modified drug and polymer carrier material, and its application in the construction of tumor imaging and drug delivery system for targeted therapy. The results show that WVAP can cross the blood-brain barrier, target tumor neovascularization and blood-tumor barrier, target tumor mimetic vessels, tumor cells and cancer stem cells. The nano-drug delivery system constructed by molecular carrier materials can effectively deliver the drug into the brain, target the tumor tissue, and significantly improve the anti-tumor efficacy.

【技术实现步骤摘要】
全过程靶向多肽及其在构建肿瘤靶向诊治递药系统中的应用
本专利技术属药学领域，涉及全过程靶向多肽及其用途，具体涉及具有跨血-脑屏障和跨血-肿瘤屏障，靶向肿瘤新生血管、肿瘤拟态血管、肿瘤细胞和肿瘤干细胞的全过程靶向多肽分子，及其药物复合物和修饰的纳米递药系统。
技术介绍
现有技术公开了肿瘤死亡率高居所有疾病死亡率首位，已是严重威胁人类生命和健康的疾病。临床治疗中，传统的化疗作为肿瘤药物治疗的主要手段，存在对肿瘤组织选择性差、毒性大、治疗窗窄、易产生多药耐药等缺陷。因此，为克服传统治疗手段的局限性，近年来，主动靶向成为提高肿瘤组织靶向效率的重要策略。主动靶向策略主要针对肿瘤组织中高表达的受体或转运体，利用与特异性受体或转运体具有识别、结合能力的对应配体，将药物或纳米递药系统递送至肿瘤组织或细胞中。研究显示，配体修饰后的药物或纳米递药系统可通过细胞表面受体或转运体与配体的特异性识别、结合、内化，将药物递送至肿瘤组织和细胞内，从而实现对肿瘤的主动靶向。据资料显示，目前的配体大多只是针对某一受体或某一细胞的靶向，然而肿瘤组织有肿瘤细胞，还有肿瘤干细胞、肿瘤拟态血管、肿瘤新生血管和血-肿瘤屏障(BTB)等，脑部肿瘤还存在血-脑屏障(BBB)，使约98％小分子化疗药物和几乎100％蛋白类等大分子药物无法透过BBB进入脑内，导致药物治疗几乎无效，因此，开发对肿瘤尤其是脑部肿瘤生长发展全过程均具有靶向功能的配体具有重要现实意义。VAP(LVAP1(L型氨基酸序列为SNTRVAP)及其稳定优化多肽DVAP(D型氨基酸序列DPDADVDRDTDNDS)、LVAP2(L型氨基酸序列为PAVRTNS)及其稳定优化多肽SVAP(D型氨基酸序列DSDNDTDRDVDADP))是本申请研究前期验证的与葡萄糖调节蛋白GRP78具有高度结合活性的7肽，其能靶向肿瘤新生血管内皮细胞和跨越BTB、靶向肿瘤细胞和肿瘤干细胞，在体内具有良好的寻靶能力，但不能跨越BBB。WSW(LWSW(L型氨基酸序列为SYPGWSW)的及其稳定优化多肽DWSW(D型氨基酸序列DWDSDWDGDPDYDS))也是本申请前期验证的与群体感应受体具有高度结合活性的7肽，其能够靶向脑毛细血管内皮细胞和穿透BBB、靶向肿瘤新生血管内皮细胞和穿透BTB，并靶向肿瘤细胞，但无肿瘤干细胞靶向功能。基于现有技术现状及基础，本申请的专利技术人拟提供全过程靶向多肽及其在构建肿瘤靶向诊治递药系统中的应用，使更为有效地发挥对脑部肿瘤或具有脑转移特征外周肿瘤的靶向诊治作用，并将包载肿瘤治疗药物的递药系统联合用药，发挥协同增效抗肿瘤的作用进一步将已有靶向多肽分子进行改造，利用融合蛋白原理，将VAP与WSW通过合适的桥联结构(linker)拼接成WVAP(LWVAP：PAVRTNS-linker-SYPGWSW(LWVAP1)、SNTRVAP-linker-SYPGWSW(LWVAP2)、SYPGWSW-linker-PAVRTNS(LWVAP3)和SYPGWSW-linker-SNTRVAP(LWVAP4)；DWVAP：DSDNDTDRDVDADP-linker-DWDSDWDGDPDYDS(DWVAP1)、DPDADVDRDTDNDS-linker-DWDSDWDGDPDYDS(DWVAP2)、DWDSDWDGDPDYDS-linker-DSDNDTDRDVDADP(DWVAP3)和DWDSDWDGDPDYDS-linker-DPDADVDRDTDNDS(DWVAP4)；LDWVAP：PAVRTNS-linker-DWDSDWDGDPDYDS(LDWVAP1)、SNTRVAP-linker-DWDSDWDGDPDYDS(LDWVAP2)、DWDSDWDGDPDYDS-linker-PAVRTNS(LDWVAP3)、DWDSDWDGDPDYDS-linker-SNTRVAP(LDWVAP4)、DSDNDTDRDVDADP-linker-SYPGWSW(LDWVAP5)、DPDADVDRDTDNDS-linker-SYPGWSW(LDWVAP6)、SYPGWSW-linker-DSDNDTDRDVDADP(LDWVAP7)和SYPGWSW-linker-DPDADVDRDTDNDS(LDWVAP8))，使其拥有对脑部肿瘤或具有脑转移特征外周肿瘤生长发展全过程靶向功能。同时，构建WVAP修饰的诊断和治疗药物复合物、修饰的高分子载体材料及其所构建的递药系统，从而更为有效地发挥对脑部肿瘤或具有脑转移特征外周肿瘤的靶向诊治作用，并将包载肿瘤治疗药物的WVAP递药系统开展联合用药，发挥协同增效抗肿瘤的作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是基于现有技术现状及基础，提供全过程靶向多肽及其在构建肿瘤靶向诊治递药系统中的应用，具体涉及具有跨血-脑屏障和跨血-肿瘤屏障，靶向肿瘤新生血管、肿瘤拟态血管、肿瘤细胞和肿瘤干细胞的全过程靶向多肽分子，及其药物复合物和修饰的纳米递药系统。本专利技术提供了全过程靶向多肽WVAP及其修饰的诊断和治疗药物复合物、修饰的高分子载体材料及其所构建的脂质体、聚合物胶束、聚合物圆盘、纳米粒等纳米递药系统，及其在脑部肿瘤或具有脑转移特征的外周肿瘤诊断和靶向治疗中的应用；以及WVAP修饰的递药系统包载肿瘤治疗药物在联合用药的协同增效抗肿瘤中的应用。具体的，本专利技术的具有跨越血-脑屏障和血-肿瘤屏障，并靶向肿瘤新生血管、肿瘤拟态血管、肿瘤细胞和肿瘤干细胞的全过程靶向多肽分子WVAP，其由桥联结构(linker)将WSW与VAP共价连接形成(LWVAP：PAVRTNS-linker-SYPGWSW(LWVAP1)、SNTRVAP-linker-SYPGWSW(LWVAP2)、SYPGWSW-linker-PAVRTNS(LWVAP3)和SYPGWSW-linker-SNTRVAP(LWVAP4)；DWVAP：DSDNDTDRDVDADP-linker-DWDSDWDGDPDYDS(DWVAP1)、DPDADVDRDTDNDS-linker-DWDSDWDGDPDYDS(DWVAP2)、DWDSDWDGDPDYDS-linker-DSDNDTDRDVDADP(DWVAP3)和DWDSDWDGDPDYDS-linker-DPDADVDRDTDNDS(DWVAP4)；LDWVAP：PAVRTNS-linker-DWDSDWDGDPDYDS(LDWVAP1)、SNTRVAP-linker-DWDSDWDGDPDYDS(LDWVAP2)、DWDSDWDGDPDYDS-linker-PAVRTNS(LDWVAP3)、DWDSDWDGDPDYDS-linker-SNTRVAP(LDWVAP4)、DSDNDTDRDVDADP-linker-SYPGWSW(LDWVAP5)、DPDADVDRDTDNDS-linker-SYPGWSW(LDWVAP6)、SYPGWSW-linker-DSDNDTDRDVDADP(LDWVAP7)和SYPGWSW-linker-DPDADVDRDTDNDS(LDWVAP8))；本专利技术中，用WVAP修饰药物分子和高分子载体材料，构建WVAP-药物复合物、WVAP修饰的纳米递药系统，能提高药物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种全过程靶向多肽WVAP，其特征在于，该全过程靶向多肽WVAP靶向脑毛细血管内皮细胞并跨越血‑脑屏障、靶向肿瘤新生血管内皮细胞并跨越血‑肿瘤屏障，同时靶向肿瘤拟态血管、肿瘤细胞和肿瘤干细胞，其由桥联结构(linker)将WSW与VAP共价连接形成(LWVAP：PAVRTNS‑linker‑SYPGWSW(LWVAP1)、SNTRVAP‑linker‑SYPGWSW(LWVAP2)、SYPGWSW‑linker‑PAVRTNS(LWVAP3)和SYPGWSW‑linker‑SNTRVAP(LWVAP4)；DWVAP：DSDNDTDRDVDADP‑linker‑DWDSDWDGDPDYDS(DWVAP1)、DPDADVDRDTDNDS‑linker‑DWDSDWDGDPDYDS(DWVAP2)、DWDSDWDGDPDYDS‑linker‑DSDNDTDRDVDADP(DWVAP3)和DWDSDWDGDPDYDS‑linker‑DPDADVDRDTDNDS(DWVAP4)；LDWVAP：PAVRTNS‑linker‑DWDSDWDGDPDYDS(LDWVAP1)、SNTRVAP‑linker‑DWDSDWDGDPDYDS(LDWVAP2)、DWDSDWDGDPDYDS‑linker‑PAVRTNS(LDWVAP3)、DWDSDWDGDPDYDS‑linker‑SNTRVAP(LDWVAP4)、DSDNDTDRDVDADP‑linker‑SYPGWSW(LDWVAP5)、DPDADVDRDTDNDS‑linker‑SYPGWSW(LDWVAP6)、SYPGWSW‑linker‑DSDNDTDRDVDADP(LDWVAP7)和SYPGWSW‑linker‑DPDADVDRDTDNDS(LDWVAP8))。...

【技术特征摘要】
1.一种全过程靶向多肽WVAP，其特征在于，该全过程靶向多肽WVAP靶向脑毛细血管内皮细胞并跨越血-脑屏障、靶向肿瘤新生血管内皮细胞并跨越血-肿瘤屏障，同时靶向肿瘤拟态血管、肿瘤细胞和肿瘤干细胞，其由桥联结构(linker)将WSW与VAP共价连接形成(LWVAP：PAVRTNS-linker-SYPGWSW(LWVAP1)、SNTRVAP-linker-SYPGWSW(LWVAP2)、SYPGWSW-linker-PAVRTNS(LWVAP3)和SYPGWSW-linker-SNTRVAP(LWVAP4)；DWVAP：DSDNDTDRDVDADP-linker-DWDSDWDGDPDYDS(DWVAP1)、DPDADVDRDTDNDS-linker-DWDSDWDGDPDYDS(DWVAP2)、DWDSDWDGDPDYDS-linker-DSDNDTDRDVDADP(DWVAP3)和DWDSDWDGDPDYDS-linker-DPDADVDRDTDNDS(DWVAP4)；LDWVAP：PAVRTNS-linker-DWDSDWDGDPDYDS(LDWVAP1)、SNTRVAP-linker-DWDSDWDGDPDYDS(LDWVAP2)、DWDSDWDGDPDYDS-linker-PAVRTNS(LDWVAP3)、DWDSDWDGDPDYDS-linker-SNTRVAP(LDWVAP4)、DSDNDTDRDVDADP-linker-SYPGWSW(LDWVAP5)、DPDADVDRDTDNDS-linker-SYPGWSW(LDWVAP6)、SYPGWSW-linker-DSDNDTDRDVDADP(LDWVAP7)和SYPGWSW-linker-DPDADVDRDTDNDS(LDWVAP8))。2.按权利要求1所述的全过程靶向多肽WVAP，其特征是，所述的桥联结构是氨基脂肪酸及其衍生物、氨基芳香酸及其衍生物或寡肽。3.按权利要求1所述的全过程靶向多肽WVAP，其特征是，该全过程靶向多肽WVAP用于介导药物分子或纳米递药系统的跨越血-脑屏障和血-肿瘤屏障，靶向肿瘤新生血管、肿瘤拟态血管、肿瘤细胞和肿瘤干细胞，实现药物分子或纳米载药系统对脑、脑部肿瘤或具有脑转移特征外周肿瘤的靶向递送。4.按权利要求1所述的全过程靶向多肽WVAP，其特征是，该全过程靶向多肽WVAP用于在分子中通过引入活性官能团构建其修饰的药物复合物、高分子载体材料，引入官能团的位点为WVAP的氮端、碳端或桥联结构。5.按权利要求1所述的全过程靶向多肽WVAP，其特征是，引入巯基后与含有马来酰亚胺基团的影像物质反应，制得WVAP-X复合物。6.按权利要求5所述的全过程靶向多肽WVAP，其特征是，所述的WVAP-X复合物中，X是荧光物质Fluorescein，近红外染料Cy7、IR820、DiR，磁共振影像剂Gd-DTPA，放射影像剂99mTc-DTPA。7.按权利要求1所述的全过程靶向多肽WVAP，其特征是，通过pH敏感的腙键、pH敏感的硼酸脂键、二硫键与治疗药物连接，或直接与多肽药物缩合，制得WVAP-Y复合物。8.按权利要求7所述的全过程靶向多肽，其特征是，所述的WVAP-Y复合物中，Y是抗肿瘤药物中的阿霉素和表阿霉素类蒽环类药物、紫杉醇和多烯紫杉醇和卡巴他赛紫杉...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆伟跃，冉丹妮，谢操，占昌友，毛佳妮，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海,31