一种促血小板生成素的融合蛋白及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于基因工程制药领域，涉及一种促血小板生成素的融合蛋白及其制备方法和应用，具体涉及一种人血清白蛋白分子（Human serum Albumin，HSA）与酵母偏好密码子编码的促血小板生成素模拟肽（Thrombopoietin Mimetic Peptide，TMP）二联体的融合蛋白及其制备方法和应用。所述融合蛋包含一个HSA分子和一个酵母偏好密码子编码的TMP二联体，所述融合蛋白能在酵母体内高水平的稳定表达，可应用于工业生产；同时，该融合蛋白具有显著促进血小板生成的特性，在人体内具有较长的半衰期，可用于制备治疗多种原发性或继发性血小板减少症等疾病的药物。

A fusion protein of thrombopoietin and its preparation and Application

The invention belongs to the field of genetic engineering pharmacy, and relates to a fusion protein of thrombopoietin and its preparation method and application, in particular to a fusion protein of human serum albumin (HSA) and a thrombopoietin mimetic Peptide (TMP) coded by yeast preference codon, and its preparation method and application. Application. The fusion egg contains a HSA molecule and a TMP dimer encoded by a yeast preference codon. The fusion protein can be expressed stably at a high level in yeast and can be used in industrial production. At the same time, the fusion protein has a remarkable characteristic of promoting platelet production and has a long half-life in human body, and can be used to prepare and treat various primary or secondary thrombocytopenia. Drugs for diseases such as oligopathy.

【技术实现步骤摘要】
一种促血小板生成素的融合蛋白及其制备方法和应用
本专利技术属于基因工程制药领域，涉及一种促血小板生成素的融合蛋白及其制备方法和应用，具体涉及一种人血清白蛋白分子(HumanserumAlbumin，HSA)与酵母偏好密码子编码的促血小板生成素模拟肽(ThrombopoietinMimeticPeptide，TMP)二联体的融合蛋白。
技术介绍
在临床上常会遇到由各种原因引起的原发性和继发性血小板减少症，如原发性血小板减少性紫癜、再生障碍性贫血以及肿瘤化/放疗造成的血小板减少等。对于这类疾病，比较适合应用长效升血小板药物进行救治，一方面，可以减少用药次数，减少病人的针痛之苦；另一方面，可以减少药物用量，降低治疗费用。血小板由巨核细胞产生，促进巨核细胞的增殖、分化是提高血小板水平的主要手段。促血小板生成素(Thrombopoietin，TPO)，是骨髓巨核细胞增殖、分化和血小板生成的最重要调控因子。首先，人们利用研制出一种聚乙二醇(PEG)化的重组人巨核细胞生长和发展因子PEG-rHuMGDF。动物实验结果表明，PEG-rHuMGDF不仅具有突出的促血小板生成活性，而且在体内具有较长的半本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种促血小板生成素的融合蛋白，包括人血清白蛋白HSA分子、促血小板生成素模拟肽TMP二联体，所述的人血清白蛋白HSA分子的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示，或该氨基酸序列经突变后具有同样功能的序列，编码所述HSA分子的氨基酸序列的 DNA 序列如SEQ ID NO：3所示，所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，或该氨基酸序列经突变后具有同样功能的序列，其特征在于，所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体是由酵母偏好密码子编码而成的，编码所述促血小板生成素模拟肽TMP二联体的氨基酸序列的DNA 序列如SEQ ID NO：1所示，该融合蛋白还包括可...

【技术特征摘要】
1.一种促血小板生成素的融合蛋白，包括人血清白蛋白HSA分子、促血小板生成素模拟肽TMP二联体，所述的人血清白蛋白HSA分子的氨基酸序列如SEQIDNO：4所示，或该氨基酸序列经突变后具有同样功能的序列，编码所述HSA分子的氨基酸序列的DNA序列如SEQIDNO：3所示，所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体的氨基酸序列如SEQIDNO：2所示，或该氨基酸序列经突变后具有同样功能的序列，其特征在于，所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体是由酵母偏好密码子编码而成的，编码所述促血小板生成素模拟肽TMP二联体的氨基酸序列的DNA序列如SEQIDNO：1所示，该融合蛋白还包括可形成二聚体化结构域的肽段。2.根据权利要求1所述的一种促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，所述的可形成二聚体化结构域的肽段中含有至少两个半胱氨酸。3.根据权利要求1所述的一种促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，所述的可形成二聚体化结构域的肽段中含有两个半胱氨酸。4.根据权利要求3所述的一种促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，所述的可形成二聚体化结构域的肽段为H肽段，其氨基酸序列如SeqIDNo:8所示。5.根据权利要求4所述的促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，所述HSA连接于融合蛋白的N-末端，结构式表示为HSA-L2-H-L3-TMP-L1-TMP，L1、L3、L3表示肽接头，L1的氨基酸序列为GGPSG，L2的氨基酸序列为GGGGSGL，L3的氨基酸序列为EFGGGGS，H表示可形成二聚体化结构域的H肽段；所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：6所示，编码所述融合蛋白的核苷酸序列的DNA序列如SEQIDNO：5所示。6.权利要求5所述的一种促血小板生成素的融合蛋白形成的二聚体化融合蛋白。7.一种促血小板生成素的融合蛋白，包括人血清白蛋白HSA、促血小板生成素模拟肽TMP二联体，所述的人血清白蛋白HSA的氨基酸序列如SEQIDNO：4所示，或该氨基酸序列经突变后具有同样功能的序列，编码所述HSA的氨基酸序列的DNA序列如SEQIDNO：3所示，所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体的氨基酸序列如SEQIDNO：2所示，或该氨基酸序列经突变后具有同样功能的序列，其特征在于，所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体是由一个酵母偏好密码子编码而成的，编码所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体的氨基酸序列的DNA序列如SEQIDNO：1所示，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李红玉，张丽芸，支德娟，王梅竹，李洋，赵晶，戴志娟，王亚亚，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：甘肃,62