The invention discloses a phenylalanine aminotransferase mutant, which belongs to the field of enzyme engineering technology. The mutant sequence of the phenylalanine aminotransferase of the present invention is shown as SEQ ID NO.2. The specific enzyme activity of the mutant enzyme is 1.13 times higher than that of the wild type, and 50% residual enzyme activity is still present in the mutant enzyme after being treated at 50 ~C for 1 hour, and the temperature stability is greatly improved compared with that of the wild type enzyme. At the same time, the mutant also has better pH stability, which is conducive to future industrial production.
【技术实现步骤摘要】
一种苯丙氨酸氨基变位酶突变体
本专利技术涉及一种苯丙氨酸氨基变位酶突变体，属于酶工程
技术介绍
苯丙氨酸氨基变位酶(PAM)可用于催化苯丙氨酸发生异构化，催化α-苯丙氨酸转氨基变为药用价值更高的β-苯丙氨酸，β-苯丙氨酸是合成抗癌药物紫杉醇的重要前体，具有广阔的市场前景。但是，该反应是一个放热反应，生产过程中高温会影响酶的结构，导致酶活下降，进而产生了大量的能耗，提高了生产成本。此外，该酶在催化过程中酶活相对较低，不利于β苯丙氨酸的生成。在生产催化过程中，提高该的热稳定性以及酶活尤为重要。目前，苯丙氨酸氨基变位酶主要来源于成团泛菌(Pantoeaagglomerans)、海洋链霉菌(Streptomycesmaritimus)和中华红豆杉(Taxuschinensis)。中华红豆杉来源的目的基因在原核生物中表达不够理想，海洋链霉菌来源的基因在温度较高时表现出苯丙氨酸裂解酶活性，而野生型成团泛菌来源的苯丙氨酸氨基变位酶活力和热稳定性也有限。因此，获得一种酶活提高、稳定性增强的苯丙氨酸氨基变位酶对于β-苯丙氨酸的工业化生产具有重要的应用价值。在公开号为CN1...
【技术保护点】
1.一种苯丙氨酸氨基变位酶突变体，其特征在于，含有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。
【技术特征摘要】
1.一种苯丙氨酸氨基变位酶突变体，其特征在于，含有SEQIDNO.2所示的氨基酸序列。2.编码权利要求1所述苯丙氨酸氨基变位酶突变体的基因。3.含有权利要求2所述基因的载体。4.表达权利要求1所述苯丙氨酸氨基变位酶突变体的细胞。5.一种基因工程菌，其特征在于，是以大肠杆菌为宿主，表达SEQIDNO.2所示的苯丙氨酸氨基变位酶突变体。6.根据权利要求5所述的基因工程菌，其特征在于，以大肠杆菌BL21为宿主，以pET系列质粒为载体。7.一种提高苯丙氨酸氨基变位酶稳定性的方...
【专利技术属性】
技术研发人员：周哲敏，刘辉，周丽，崔文璟，刘中美，郭军玲，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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