The present invention provides a recombinant dextran sucrase and its preparation method and application. The recombinant dextran sucrase is synthesized by a recombinant expression strain of dextran sucrase. The dextran sucrase has an amino acid sequence as shown in SEQ ID No.1. The present invention provides a novel recombinant glucan sucrase. The gene encoding glucan sucrase is amplified from Leuconostoc mesenterica CGMCC10064, and its expression is realized by constructing the recombinant bacteria. A large amount of alpha-glucan can be obtained by using the recombinant sucrase. The alpha-glucan has the effect of oxygen pressure exclusion and can promote the growth of oxygen-sensitive probiotics under aerobic conditions. It has important application value in probiotics and related industries.
【技术实现步骤摘要】
一种重组型葡聚糖蔗糖酶及其制备方法与应用
本专利技术属于微生物工程
，具体涉及一种重组型葡聚糖蔗糖酶及其制备方法与应用。
技术介绍
葡聚糖蔗糖酶(glucansucrase，葡聚糖蔗糖酶)是GH70家族的一类葡聚糖蔗糖酶，能以蔗糖为底物，催化从头合成α-葡聚糖，释放游离的果糖。α-葡聚糖在食品医疗工业中有广泛的应用价值。例如，右旋糖苷因其良好的特性而被用作临床上的代血浆。因其产物在食品及医药工业中良好的应用前景，葡聚糖蔗糖酶及其编码基因一直受到广泛关注。目前已经有多个葡聚糖蔗糖酶编码基因被克隆鉴定，其催化合成的多糖产物的结构也得到解析。所得的多糖产物在食品医疗工业中有广泛的应用价值。葡聚糖蔗糖酶及其编码基因主要存在于乳酸菌中，如常见的链球菌(Streptococcus)、明串珠菌(Leuconostoc)等。肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesenteroidessubsp.mesenteroides)是被我国卫生部列入可食用菌种目录(卫生部公告2012年第8号)的菌种，由其来源的多糖产物也被公认为安全的。因此，肠膜明串珠菌，尤其是肠膜亚种来源...
【技术保护点】
1.一种重组型葡聚糖蔗糖酶，其特征在于，所述重组型葡聚糖蔗糖酶由葡聚糖蔗糖酶重组表达菌株合成，葡聚糖蔗糖酶具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。
【技术特征摘要】
1.一种重组型葡聚糖蔗糖酶，其特征在于，所述重组型葡聚糖蔗糖酶由葡聚糖蔗糖酶重组表达菌株合成，葡聚糖蔗糖酶具有如SEQIDNo.1所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的重组型葡聚糖蔗糖酶，其特征在于，所述葡聚糖蔗糖酶的编码基因具有如SEQIDNo.2所示的核苷酸序列。3.根据权利要求2所述的重组型葡聚糖蔗糖酶，其特征在于，所述葡聚糖蔗糖酶的编码基因来源于肠膜明串珠菌CGMCC10064。4.权利要求1所述的重组型葡聚糖蔗糖酶的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)以肠膜明串珠菌CGMCC10064基因组DNA为模板，使用SEQIDNO.3、SEQIDNO.4所示的引物进行PCR扩增；(2)将扩增产物、表达载体进行酶切，酶切产物使用连接酶连接；(3)将连接的重组载体转化入宿主菌株，得重...
【专利技术属性】
技术研发人员：鄢明辉，刘振民，游春苹，罗力文，
申请(专利权)人：光明乳业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31
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