基于POCT模式的SLCO1B1基因型快速检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种基于POCT模式的SLCO1B1基因型快速检测试剂盒，所述试剂盒含有用于检测SLCO1B1基因型的荧光定量PCR引物和探针以及细胞裂解液，所述PCR引物的序列如SEQ ID NO.1‑2和SEQ ID NO.5‑6所示，所述探针的序列如SEQ ID NO.3‑4和SEQ ID NO.7‑8所示。本试剂盒可实现即时检测，无需DNA提纯，可将样本直接加入试剂中进行PCR反应，特别适合DNA含量较低样本(如口腔脱落细胞)的快速、准确检测，检测准确率达99％以上，检测灵敏度高，可以准确检测低至0.125ng基因组DNA；整个检测耗时短，1小时内可得检测结果，能在第一时间给医生提供用药依据，降低患者用药风险。

Rapid Detection Kit of SLCO1B1 Genotype Based on POCT Model

The present invention provides a rapid detection kit for SLCO1B1 genotype based on POCT mode. The kit contains fluorescent quantitative PCR primers and probes for detecting SLCO1B1 genotype and cell lysate. The sequence of the PCR primers is shown as SEQ ID NO.1_2 and SEQ ID NO.5_6, and the sequence of the probe is shown as SEQ ID NO.3_4 and SEQ ID NO.7_8. This kit can be used for real-time detection without DNA purification. It can directly add samples to the reagent for PCR reaction. It is especially suitable for rapid and accurate detection of samples with low DNA content (such as oral exfoliated cells). The detection accuracy is over 99%, and the detection sensitivity is high. It can accurately detect genomic DNA as low as 0.125 ng. The whole detection time is short, and the detection results can be obtained within one hour. The first time to provide the basis for doctors to use drugs, reduce the risk of patients using drugs.

【技术实现步骤摘要】
基于POCT模式的SLCO1B1基因型快速检测试剂盒
本专利技术涉及分子生物学领域，具体地说，涉及一种基于POCT模式的SLCO1B1基因型快速检测试剂盒。
技术介绍
SLCO1B1基因是有机阴离子转运多肽(organicaniontransportingpolypeptides，简称OATPs)家族编码基因中的重要一员，包括15个外显子和14个内含子，共编码691个氨基酸，在人体药物代谢方面具有重要作用。研究发现，OATP1B1可与环孢素、贝特类药物、利福平等互作，也可参与他汀类药物的转运。其中他汀药物是临床公认的最有效的高效降脂药，它能够通过竞争性抑制内源性胆固醇合成限速HMG-CoA还原酶(β-羟甲基戊二酰单酰辅酶A还原酶)，阻断细胞内羟甲戊酸代谢途径，使细胞内胆固醇合成减少，降低血脂，从而被广泛用于防治冠心病、脑中风、高血脂等疾病。但是当他汀类药物在体内不能够被及时清除时，会引起严重的不良反应，如横纹肌溶解症等，对人体造成极大危害。研究表明，SLCO1B1基因具有单核苷酸多态性(SNP)，其中SLCO1B1T521C(rs4149056)和SLCO1B1A388G(rs230本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测SLCO1B1基因多态性的引物组合，其特征在于，检测SLCO1B1基因的引物组合包括：检测SLCO1B1T521C位点位点的引物：上游引物：5’‑ATAGGTTGTTTAAAGGAATCTGGGT‑3’；下游引物：5’‑CCAATGGTACTATGGGAGTCT‑3’；检测SLCO1B1A388G位点位点的引物：上游引物：5’‑ACAAGTGGATAAGGTCGATGTTG‑3’；下游引物：5’‑TCAGTGATGTTCTTACAGTTACAGG‑3’。

【技术特征摘要】
1.一种检测SLCO1B1基因多态性的引物组合，其特征在于，检测SLCO1B1基因的引物组合包括：检测SLCO1B1T521C位点位点的引物：上游引物：5’-ATAGGTTGTTTAAAGGAATCTGGGT-3’；下游引物：5’-CCAATGGTACTATGGGAGTCT-3’；检测SLCO1B1A388G位点位点的引物：上游引物：5’-ACAAGTGGATAAGGTCGATGTTG-3’；下游引物：5’-TCAGTGATGTTCTTACAGTTACAGG-3’。2.与权利要求1所述引物组合配套使用的探针组合，其特征在于，所述探针组合中的探针如SEQIDNO.3-4或SEQIDNO.7-8所示。3.根据权利要求2所述的探针组合，其特征在于，所述探针组合包括：检测SLCO1B1T521C位点的探针:野生型探针：5’-ATATATG+TGTTCATG-3’；突变型探针：5’-ATATATG+CGTTCATG-3’；检测SLCO1B1A388G位点的探针:野生型探针：5’-CTGATGAAT+TGATATT-3’；突变型探针：5’-CTGATGAAT+CGATATT-3’；其中，“+”表示右侧的单碱基为LNA修饰。4.含有权利要求1所述引物组合和权利要求2或3所述探针组合的检测试剂或试剂盒。5.一种检测SLCO1B1基因多态性的PCR反应液，其特征在于，所述PCR反应液包括权利要求1所述的引物组合与权利要求2或3所述的探针组合。6.根据权利要求5所述的PCR反应液，其特征在于，所述PCR反应液还包括DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液、MgCl2和细胞裂解液。7.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗德朋，贺庭祯，向霄，熊伟，黎帮勇，钟越，刘黎，崔奇新，董锐，
申请(专利权)人：重庆京因生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50