基于POCT模式的CYP2C19*2或*3基因型快速检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种基于POCT模式的CYP2C19*2或*3基因型快速检测试剂盒，所述试剂盒至少含有用于检测CYP2C19*2(rs4244285，SEQ ID NO:1‑4)或*3(rs4986893，SEQ ID NO:5‑8)基因型的荧光定量PCR引物和探针及细胞裂解液，此外还可包括dNTPs、DNA聚合酶、Mg

CYP2C19*2 or*3 Genotype Rapid Detection Kit Based on POCT Model

The present invention provides a rapid detection kit for CYP2C19*2 or*3 genotypes based on POCT mode, which contains at least fluorescent quantitative PCR primers and probes and cell lysate for detecting CYP2C19*2 (rs4244285, SEQ ID NO:1*4) or *3 (rs4986893, SEQ ID NO:5*8) genotypes, in addition to dNTPs, DNA polymerase and Mg.

【技术实现步骤摘要】
基于POCT模式的CYP2C19*2或*3基因型快速检测试剂盒
本专利技术涉及分子生物学领域，具体地说，涉及一种基于POCT模式的CYP2C19*2或*3基因型快速检测试剂盒。
技术介绍
细胞色素P450(CytochromeP450)同工酶，是由一系列结构和功能相关的酶组成的超家族，包括CYP1、2、3家族。CYP2C19是CYP2C家族的重要酶，在体内药物代谢反应中发挥重要作用。CYP2C19基因具有遗传多样性，酶活性在不同个体间存在差异，使得不同个体对于药物的代谢能力存在较大差异，使得人群出现快代谢型、中间代谢型和慢代谢型3种表型。CYP2C19基因多态性主要由两种突变引起：一种突变降低酶活性；一种突变增强酶活性。其中，CYP2C19*2(681G>A，rs4244285)和CYP2C19*3(636G>A，rs4986893)突变是最主要的两种突变类型，引起CYP2C19酶活性降低。研究表明，慢代谢型个体携带两个降低CYP2C19酶活性的突变位点，如CYP2C19*2/*2、CYP2C19*3/*3和CYP2C19*2/*3；中间代谢型个体携带一个本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于检测CYP2C19*2及*3基因型的荧光定量PCR引物和探针，其特征在于，包括上游引物、下游引物、野生型探针和突变型探针，它们的核苷酸序列分别如下：用于检测CYP2C19*2基因型的荧光定量PCR引物和探针：上游引物：5’‑CAGAGCTTGGCATATTGTATCTATA‑3’下游引物：5’‑CGAGGGTTGTTGATGTCCATC‑3’野生型探针：5’‑F1‑TTTCCCGGGAACC‑Q‑3’突变型探针：5’‑F2‑TTCCCAGGAACCC‑Q‑3’用于检测CYP2C19*3基因型的荧光定量PCR引物和探针：上游引物：5’‑CAGCAATTTCTTAACTTGATGGA‑3’...

【技术特征摘要】
1.用于检测CYP2C19*2及*3基因型的荧光定量PCR引物和探针，其特征在于，包括上游引物、下游引物、野生型探针和突变型探针，它们的核苷酸序列分别如下：用于检测CYP2C19*2基因型的荧光定量PCR引物和探针：上游引物：5’-CAGAGCTTGGCATATTGTATCTATA-3’下游引物：5’-CGAGGGTTGTTGATGTCCATC-3’野生型探针：5’-F1-TTTCCCGGGAACC-Q-3’突变型探针：5’-F2-TTCCCAGGAACCC-Q-3’用于检测CYP2C19*3基因型的荧光定量PCR引物和探针：上游引物：5’-CAGCAATTTCTTAACTTGATGGA-3’下游引物：5’-CAATATAGAATTTTGGATTTCCCAG-3’野生型探针：5’-F1-CCCCTGGATCCAG-Q-3’突变型探针：5’-F2-ACCCCCTGAATCCA-Q-3’其中，F1和F2为不同的荧光报告基团，Q为荧光淬灭基团。2.根据权利要求1所述的引物和探针，其特征在于，所述探针如下：CYP2C19*2探针：野生型探针：5’-F1-TTTCCCGGGAACC-Q-3’突变型探针：5’-F2-TTCCCAG+GAACCC-Q-3’CYP2C19*3探针：野生型探针：5’-F1-CCCCTGG+ATCCAG-Q-3’突变型探针：5’-F2-ACCCCCTG+AATCCA-Q-3’其中，+表示LNA修饰碱基。3.含有权利要求1或2所述引物和探针的检测试剂或试剂盒。4.用于荧光定量PCR检测CYP2C19*2或*3基因型的反应体系，其特征在于，所述反应体系包括权利要求1或2所述引物和探针、DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液和细胞裂解液；其中，所述细胞裂解液由十二烷基硫酸钠和聚乙二醇辛基苯基醚组成。5.根据权利要求4所述的反应体系，其特征在于，所述反应体系中各组分的终浓度为：0.5-1.5×PCR反应缓冲液、DNA聚合酶0....

【专利技术属性】
技术研发人员：贺庭祯，罗德朋，黎帮勇，向霄，熊伟，钟越，刘黎，董锐，崔奇新，杨园，
申请(专利权)人：重庆京因生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50