一种HANK细胞培养上清液的制备及其在化妆品中的应用制造技术

本发明专利技术属于医药化妆品技术领域，具体涉及一种HANK细胞培养上清液制备及其在化妆品中的应用。HANK细胞培养上清液的制备方法包括以下步骤：(1)采集自体或异体健康人抗凝外周血或脐带血；(2)用淋巴细胞分离液分离单个核细胞；(3)把所得外周血单核细胞悬浮在NK细胞无血清培养液中，添加IL‑2及膜嵌合细胞因子，37℃及CO2孵箱中培养10‑16天，常温条件下离心分离HANK细胞及其上清液，分别收集HANK细胞及其培养上清液；(4)上清液作为化妆品原料，直接使用，或冻干后备用；HANK细胞另作它用。

Preparation of HANK cell culture supernatant and its application in cosmetics

The invention belongs to the technical field of pharmaceutical cosmetics, in particular to the preparation of HANK cell culture supernatant and its application in cosmetics. The preparation method of HANK cell culture supernatant includes the following steps: (1) collecting anticoagulant peripheral blood or umbilical cord blood from autologous or allogeneic healthy people; (2) separating mononuclear cells with lymphocyte separation fluid; (3) suspending the obtained peripheral blood mononuclear cells in NK cell serum-free culture medium, adding IL_2 and membrane chimeric cytokines, incubating at 37 C and CO2 incubator for 10_16 days, and centrifuging at room temperature. HANK cells and their supernatants were separated, and HANK cells and their culture supernatants were collected respectively; (4) HANK cells were used as cosmetics raw materials directly or after freeze-drying, and HANK cells were used for other purposes.

【技术实现步骤摘要】
一种HANK细胞培养上清液的制备及其在化妆品中的应用
本专利技术属于医药化妆品
，具体涉及一种HANK细胞培养上清液，还涉及其制备方法和在化妆品中的应用。
技术介绍
高活性NK(HANK)细胞不但具有直接杀灭并清除衰老、癌变、感染、死亡细胞的杀伤作用，而且还可通过其分泌的多种活性因子发挥重要的免疫调节功能。在临床研究及临床应用中已经充分证明，HANK细胞不但可以有效地预防早早癌发生及癌症治疗后复发，而且对白血病及多种实体瘤的有效率高达80％以上；不但可以消减癌症负荷，使原发癌及转移癌缩小或消失，而且还能解除癌症疼痛，缓解癌症疲劳；不但可增强机体免疫力，提升T细胞及NK细胞活性及含量，而且还能抑制自身免疫反应，缓解糖尿病、结肠炎及类风湿等多种自身免疫性疾病；不但能治疗亚健康，改善睡眠、提高精力、增强性功能，而且还有显著的美容及美体效果，大多数患者皮肤变得白里透红、面部拉提紧致、容光焕发；增加食欲，减小腰围。CIK细胞是最早用于临床治疗的免疫细胞。随着近年来免疫细胞治疗技术的发展，其技术上的滞后性也日渐凸显。欧美等发达国家基本上已经全面停止了CIK的应用。在国内，CIK细胞治疗技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种HANK细胞培养上清液，其特征在于，其制备方法包括以下步骤：(1)采集自体或异体健康人抗凝外周血，或脐带血；(2)用淋巴细胞分离液分离单个核细胞；(3)把所得单核细胞悬浮在NK细胞无血清培养液中，添加IL‑2及膜嵌合细胞因子，37℃及CO2孵箱中培养10‑16天，常温条件下离心分离HANK细胞及其上清液，分别收集HANK细胞及其培养上清液。

【技术特征摘要】
1.一种HANK细胞培养上清液，其特征在于，其制备方法包括以下步骤：(1)采集自体或异体健康人抗凝外周血，或脐带血；(2)用淋巴细胞分离液分离单个核细胞；(3)把所得单核细胞悬浮在NK细胞无血清培养液中，添加IL-2及膜嵌合细胞因子，37℃及CO2孵箱中培养10-16天，常温条件下离心分离HANK细胞及其上清液，分别收集HANK细胞及其培养上清液。2.根据权利要求1所述的HANK细胞培养上清液，其特征在于，所述的无血清培养液是X-Vivo15无血清培养液。3.根据权利要求1所述的HANK细胞培养上清液，其特征在于，其培养的HANK细胞每升≥4×1010个。4.根据权利要求1所述的HANK细胞培养上清液，其特征在于，其培养的CD56+CD3-NK细胞纯度≥80％。5.根据权利要求1所述的HANK细胞培养上清液，其特征在于，其培养的HANK细胞对K562靶细胞杀伤率≥80％，效靶比例为10:1。6.根据权利要求1所述的HANK细胞培养上清液，与可接受的辅料在加工制剂中的应用。7.根据权利要求6所述的制剂，其特征在于，可以为水剂和冻干粉剂。8.根据权利要求7所述的制剂，其特征在于，水剂的制备方法为...

【专利技术属性】
技术研发人员：张明杰，
申请(专利权)人：深圳市汉科生命工程有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44