The invention provides a preparation method of in vitro placental hematopoietic stem cells, and a preparation method of in vitro placental hematopoietic stem cells, which is characterized by: placental pretreatment; placental perfusion and cleaning after pretreatment; further collection of liquid using enzymatic hydrolysate; and preparation of placental hematopoietic stem cells. Compared with the existing technology, the invention has the following beneficial effects: The operation process is simple and effective, the experimental operation time is short, the separation and extraction efficiency is significantly improved, the number of cells obtained is large, the content of hematopoietic stem cells is greatly increased, the number of cells is relatively stable; at the same time, the extraction and separation conditions are optimized to improve the survival rate of hematopoietic stem cells as far as possible, and the cell contamination rate is very low.
【技术实现步骤摘要】
一种离体胎盘造血干细胞的制备方法
本专利技术是一种离体胎盘造血干细胞的制备方法，属于生物
技术介绍
最新研究表明，胎盘中含有大量造血干细胞，同脐带血中的造血干细胞一样，胎盘造血干细胞是高度未分化细胞，也可以说它是一切血细胞（其中大多数是免疫细胞）的原始细胞，可以用来治疗多种血液系统疾病和免疫系统疾病，包括血液系统恶性肿瘤（如白血病、多发性骨髓瘤、骨髓异常增生综合症、淋巴瘤等）、血红蛋白病、骨髓造血功能衰竭（如再生障碍性贫血）、先天性代谢性疾病、先天性免疫缺陷疾患、自身免疫性疾患等多种疾病。胎盘中造血干细胞的含量是脐带血中造血干细胞含量的10倍，足可供小孩自用几次或1～2个成人患者使用1一次，有效解决了移植时骨髓或动员后外周血来源不足，脐带血数量不够等技术难题，将有望取代骨髓、动员后外周血和脐带血用于造血干细胞移植。目前，从胎盘中提取造血干细胞的流程为：（1）先将整个胎盘或胎盘绒毛膜组织用机械法分解成小块；（2）然后采用一种或几种酶进行消化，消化后过滤；（3）最后采用羟乙基淀粉(HES)法或淋巴分离液法回收含有造血干细胞的单个核细胞，有些还会在离心分离后采...
【技术保护点】
1.一种离体胎盘造血干细胞的制备方法，其特征在于：包括：胎盘预处理；对预处理之后的胎盘进行灌注清洗；使用酶解液进一步的收集液体；制作胎盘造血干细胞。
【技术特征摘要】
1.一种离体胎盘造血干细胞的制备方法，其特征在于：包括：胎盘预处理；对预处理之后的胎盘进行灌注清洗；使用酶解液进一步的收集液体；制作胎盘造血干细胞。2.根据权利要求1所述的一种离体胎盘造血干细胞的制备方法，其特征在于：所述胎盘预处理的具体步骤为：在无菌手术室环境下采集正常顺产或剖腹产者的健康胎盘，分离出脐动脉和脐静脉，用清洗液清洗胎盘，收集清洗液。3.根据权利要求2所述的一种离体胎盘造血干细胞的制备方法，其特征在于：所述健康胎盘需经过造血干/祖细胞定性检测，判断是否健康，若健康则分离出脐动脉和脐静脉，用清洗液清洗胎盘，收集清洗液，若不健康则放弃处理，所述清洗液为抗生素含量100～1000mg/L的溶液。4.根据权利要求1所述的一种离体胎盘造血干细胞的制备方法，其特征在于：对预处理之后的胎盘进行灌注清洗的具体步骤为：用灌注装置的第一...
【专利技术属性】
技术研发人员：王亚力，沈珎宇，
申请(专利权)人：深圳市宝迪生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44
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