一种大豆多肽的修饰方法技术

本发明专利技术公开了一种大豆多肽的修饰方法，包括如下步骤：将大豆分离蛋白与蒸馏水混匀得到大豆分离蛋白浆液，并加入碱性蛋白酶进行酶解，待灭酶结束后静置冷却经离心后取上清液；将所述上清液进行超滤处理，收集透过液，再将所述透过液进行干燥处理，即得大豆多肽；将所述大豆多肽与蒸馏水、无水乙醇按比例混匀制得大豆多肽混合液，加入一定量的游离氨基酸制得大豆多肽浆液，并加入氨肽酶进行催化修饰反应，待灭酶结束后静置冷却经离心后取上层清液；再对所述上层清液进行离心喷雾干燥处理，即得修饰后的大豆多肽。该大豆多肽的修饰方法可显著降低大豆多肽的苦味和改善抗氧化活性。

A Modification Method of Soybean Peptide

The invention discloses a method for modifying soybean polypeptide, which comprises the following steps: mixing soybean protein isolate with distilled water to obtain soybean protein isolate slurry, adding alkaline protease for enzymatic hydrolysis, cooling after inactivation, centrifuging and extracting supernatant after centrifugation; ultrafiltration of the supernatant, collecting the permeate, and drying the permeate. The soybean polypeptide is mixed with the distilled water and the absolute alcohol in proportion to prepare the soybean polypeptide mixture, and a certain amount of free amino acids is added to prepare the soybean polypeptide slurry, and the aminopeptidase is added to carry out the catalytic modification reaction. After the enzyme is finished, the cooling is cooled after centrifugation, and the upper layer clear liquid is obtained after centrifugation. Soybean polypeptide. The modification method of soybean polypeptide can significantly reduce the bitterness of soybean polypeptide and improve its antioxidant activity.

【技术实现步骤摘要】
一种大豆多肽的修饰方法
本专利技术涉及大豆多肽
，具体涉及一种大豆多肽的修饰方法。
技术介绍
蛋白酶水解主要是催化蛋白质的肽键在不同的地方断裂，酶解得到的多肽序列本质上主要是原料蛋白质的氨基酸序列的部分肽片段，其氨基酸序列结构必然会受到原料蛋白质一级结构的限制，同时也会受到蛋白酶酶切位点的限制，对酶解产物进行修饰是改善其生物活性的重要途径。蛋白质酶解产物的修饰主要是利用生物-化学方法，使酶解物中的氨基酸残基和多肽链发生某种变化，引起多肽分子空间结构和组成的改变，导致其生物化学性质发生变化，从而获得较好的功能特性、营养特性及生物活性。目前，多肽的修饰主要有内切蛋白酶催化的plastein反应、美拉德反应、矿质元素螯合及氧化修饰等方法。目前用于催化修饰蛋白质酶解产物的主要是内切蛋白酶，如中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等。
技术实现思路
针对上述技术中存在的不足之处，本专利技术提供了一种可改善大豆多肽的苦味和抗氧化活性的大豆多肽的修饰方法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种大豆多肽的修饰方法，包括如下步骤：步骤一、将大豆分离蛋白与蒸馏水按料液比1g：10～15ml混匀得到大豆分离蛋白浆液，调节所述大豆分离蛋白浆液的pH至8～9，并加入碱性蛋白酶进行酶解，待酶解反应结束灭酶，待灭酶结束后静置冷却，经离心后取上清液；步骤二、将所述上清液进行超滤处理，收集透过液，再将所述透过液进行干燥处理，即得大豆多肽；步骤三、将所述大豆多肽与蒸馏水、无水乙醇按比例混匀制得大豆多肽混合液；步骤四、向所述大豆多肽混合液中加入一定量的游离氨基酸制得大豆多肽浆液，调节所述大豆多肽浆液的pH至8～9，并加入氨肽酶进行催化修饰反应，待修饰反应结束后灭酶，待灭酶结束后静置冷却，经离心后取上层清液；步骤五、再对所述上层清液进行离心喷雾干燥处理，即得修饰后的大豆多肽。优选的，所述步骤一中所述碱性蛋白酶的加酶量为大豆分离蛋白用量的1.0g/100g，酶解反应温度为50～60℃，酶解反应时间为18～24小时。优选的，所述步骤二中超滤处理的条件为：超滤膜的截留分子量为5KDa，超滤压力为0.1～0.4MPa。优选的，所述步骤二中所述大豆多肽的水解度为8～20%。优选的，所述步骤三中所述大豆多肽混合液由如下重量百分比的组分组成：大豆多肽占30～50%、无水乙醇占0～50%、蒸馏水占10～70%，上述组分的百分比之和为100%。优选的，所述步骤三中所述大豆多肽混合液由如下重量百分比的组分组成：大豆多肽占40%、无水乙醇占40%、蒸馏水占20%。优选的，所述步骤四中向所述大豆多肽混合液中加入0～1.0mol/mol游离氨基的游离氨基酸制得大豆多肽浆液。优选的，所述游离氨基酸为酪氨酸或色氨酸，所述氨肽酶为肽酶R。优选的，所述步骤四中所述氨肽酶的加酶量为大豆多肽用量的1.0～3.0g/100g，修饰反应温度为25℃～40℃，修饰反应时间为4～8小时。优选的，所述步骤五中离心喷雾干燥处理条件为：进口温度为180～220℃，出口温度为80～90℃，喷雾盘直径为100～120mm，水份蒸发量为40～50kg/h，电加热功率为60～70kw。本专利技术与现有技术相比，其有益效果是：本专利技术提供的大豆多肽的修饰方法，通过在催化修饰反应中加入无水乙醇，可有效促进氨肽酶的催化反应，降低修饰后的大豆多肽的苦味；通过在催化修饰反应中加入一定量的游离氨基酸，可显著提高修饰后的大豆多肽的抗氧化活性；该大豆多肽的修饰方法，反应条件温和、过程安全可控，且可促进大豆多肽在食品配料及保健食品基料中的广泛应用。具体实施方式下面对本专利技术做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。本专利技术提供了一种大豆多肽的修饰方法，包括如下步骤：步骤一、将大豆分离蛋白与蒸馏水按料液比1g：10～15ml混匀得到大豆分离蛋白浆液，调节所述大豆分离蛋白浆液的pH至8～9，并加入碱性蛋白酶进行酶解，所述碱性蛋白酶的加酶量为大豆分离蛋白用量的1.0g/100g，酶解反应温度为50～60℃，酶解反应时间为18～24小时，待酶解反应结束将其加热至95～100℃灭酶10～20分钟，待灭酶结束后静置冷却25～35分钟，经离心后取上清液；步骤二、将所述上清液进行超滤处理，超滤膜的截留分子量为5KDa，超滤压力为0.1～0.4MPa，收集透过液，再将所述透过液进行干燥处理，即得大豆多肽，所述大豆多肽的水解度为8～20%；步骤三、将所述大豆多肽与蒸馏水、无水乙醇按比例混匀制得大豆多肽混合液，所述大豆多肽混合液由如下重量百分比的组分组成：大豆多肽占30～50%、无水乙醇占0～50%、蒸馏水占10～70%，上述组分的百分比之和为100%；步骤四、向所述大豆多肽混合液中加入0～1.0mol/mol游离氨基的游离氨基酸（所述游离氨基酸为酪氨酸或色氨酸）制得大豆多肽浆液，调节所述大豆多肽浆液的pH至8～9，并加入氨肽酶（所述氨肽酶为肽酶R）进行催化修饰反应，所述氨肽酶的加酶量为大豆多肽用量的1.0～3.0g/100g，修饰反应温度为25℃～40℃，修饰反应时间为4～8小时，待修饰反应结束后将其加热至95～100℃灭酶10～20分钟，待灭酶结束后静置冷却25～35分钟，经离心后取上层清液；步骤五、再对所述上层清液进行离心喷雾干燥处理，离心喷雾干燥处理条件为：进口温度为180～220℃，出口温度为80～90℃，喷雾盘直径为100～120mm，水份蒸发量为40～50kg/h，电加热功率为60～70kw，即得修饰后的大豆多肽。实施例将大豆分离蛋白与蒸馏水按料液比1g：12.5ml混匀得到大豆分离蛋白浆液，调节所述大豆分离蛋白浆液的pH至8，并加入碱性蛋白酶进行酶解，所述碱性蛋白酶的加酶量为大豆分离蛋白用量的1.0g/100g，酶解反应温度为55℃，酶解反应时间为20小时，待酶解反应结束将其加热至100℃灭酶15分钟，待灭酶结束后静置冷却30分钟，经离心后取上清液；将所述上清液进行超滤处理，超滤膜的截留分子量为5KDa，超滤压力为0.25MPa，收集透过液，再将所述透过液进行干燥处理，即得大豆多肽（记为SPHs）；将所述大豆多肽与蒸馏水、无水乙醇按比例混匀制得大豆多肽混合液，所述大豆多肽混合液由如下重量百分比的组分组成：大豆多肽占40%、无水乙醇占40%、蒸馏水占20%；（1）向所述大豆多肽混合液中不添加游离氨基酸制得大豆多肽浆液，调节所述大豆多肽浆液的pH至8，并加入氨肽酶（所述氨肽酶为肽酶R）进行催化修饰反应，所述氨肽酶的加酶量为大豆多肽用量的2.0g/100g，修饰反应温度为40℃，修饰反应时间为6小时，待修饰反应结束后将其加热至100℃灭酶15分钟，待灭酶结束后静置冷却30分钟，经离心后取上层清液；再对所述上层清液进行离心喷雾干燥处理，即得不添加游离氨基酸修饰后的大豆多肽（记为MSPHs）；（2）向所述大豆多肽混合液中加入0.5mol/mol游离氨基的酪氨酸（Tyr）制得大豆多肽浆液，调节所述大豆多肽浆液的pH至8，并加入氨肽酶（所述氨肽酶为肽酶R）进行催化修饰反应，所述氨肽酶的加酶量为大豆多肽用量的2.0g/100g，修饰反应温度为40℃，修饰反应时间为6小时，待修饰反应结束后将其加热至100℃本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种大豆多肽的修饰方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、将大豆分离蛋白与蒸馏水按料液比1g：10～15ml混匀得到大豆分离蛋白浆液，调节所述大豆分离蛋白浆液的pH至8～9，并加入碱性蛋白酶进行酶解，待酶解反应结束灭酶，待灭酶结束后静置冷却，经离心后取上清液；步骤二、将所述上清液进行超滤处理，收集透过液，再将所述透过液进行干燥处理，即得大豆多肽；步骤三、将所述大豆多肽与蒸馏水、无水乙醇按比例混匀制得大豆多肽混合液；步骤四、向所述大豆多肽混合液中加入一定量的游离氨基酸制得大豆多肽浆液，调节所述大豆多肽浆液的pH至8～9，并加入氨肽酶进行催化修饰反应，待修饰反应结束后灭酶，待灭酶结束后静置冷却，经离心后取上层清液；步骤五、再对所述上层清液进行离心喷雾干燥处理，即得修饰后的大豆多肽。

【技术特征摘要】
1.一种大豆多肽的修饰方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、将大豆分离蛋白与蒸馏水按料液比1g：10～15ml混匀得到大豆分离蛋白浆液，调节所述大豆分离蛋白浆液的pH至8～9，并加入碱性蛋白酶进行酶解，待酶解反应结束灭酶，待灭酶结束后静置冷却，经离心后取上清液；步骤二、将所述上清液进行超滤处理，收集透过液，再将所述透过液进行干燥处理，即得大豆多肽；步骤三、将所述大豆多肽与蒸馏水、无水乙醇按比例混匀制得大豆多肽混合液；步骤四、向所述大豆多肽混合液中加入一定量的游离氨基酸制得大豆多肽浆液，调节所述大豆多肽浆液的pH至8～9，并加入氨肽酶进行催化修饰反应，待修饰反应结束后灭酶，待灭酶结束后静置冷却，经离心后取上层清液；步骤五、再对所述上层清液进行离心喷雾干燥处理，即得修饰后的大豆多肽。2.如权利要求1所述大豆多肽的修饰方法，其特征在于，所述步骤一中所述碱性蛋白酶的加酶量为大豆分离蛋白用量的1.0g/100g，酶解反应温度为50～60℃，酶解反应时间为18～24小时。3.如权利要求1所述大豆多肽的修饰方法，其特征在于，所述步骤二中超滤处理的条件为：超滤膜的截留分子量为5KDa，超滤压力为0.1～0.4MPa。4.如权利要求1所述大豆多肽的修饰方法，其特征在于，所述步骤二...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷芬芬，何东平，胡传荣，张四红，
申请(专利权)人：武汉轻工大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42