The invention relates to the field of veterinary biological products, in particular to a preparation method of chicken interferon alpha. The invention discloses a preparation method of chicken interferon alpha. The preparation method of the present invention utilizes the optimized gene sequence and the expression amount is higher than the existing gene, obtains the chicken interferon alpha gene, constructs the expression vector and transforms the E.coli engineering bacteria, screens, cultures and induces the expression, and purifies the chicken interferon alpha by chromatography after collecting, breaking the bacteria and washing, lysis and renaturation of the inclusion body. The method of the invention has great value for the production of chicken interferon alpha.
【技术实现步骤摘要】
一种鸡干扰素-α的制备方法
本专利技术涉及兽用生物制品领域，尤其涉及一种鸡干扰素α的制备方法。
技术介绍
传染性疾病是目前危害我国养禽业健康发展的重要疾病，尤其是病毒性疾病，如水泡性口炎病毒、劳斯肉瘤病毒、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性支气管炎病毒、马立克病毒、禽流感病毒等，这些传染性疾病一旦爆发，传播非常迅速，造成的危害十分严重。鸡传染性支气管炎是病毒引起的一种急性高度接触性传染病，每年的冬春季节时有发生，由于该病发病急、死亡快，常给养殖户造成较大的经济损失。禽流感是另一种高发的传染性疾病，对多种动物具有感染性，高致病性禽流感最为严重，发病率和死亡率高，感染的鸡群常常全部死亡。在禽病防治中，各种药物的应用对降低禽病的发生和禽病的治疗起到了积极的作用，如以往治疗肉鸡肾型传染性支气管炎常用抗病毒药物，如病毒灵、金刚烷胺、利巴韦林、阿昔洛韦等及其复方制剂，均收到一定效果。随着食品安全问题越来越引起重视，许多药物残留于家禽制品中，对人类的健康产生潜在的危害。许多国家食品进口采用了比较严格的药物残留检测标准。我国自2005年10月28日，农业部第560号公告，公布...
【技术保护点】
1.一种鸡干扰素‑α的制备方法，其特征在于：(1)鸡干扰素‑α基因的获得；(2)表达载体的构建及转化大肠杆菌工程菌：将鸡干扰素‑α基因序列插入到表达载体质粒的酶切位点，然后转化大肠杆菌宿主菌；(3)阳性克隆的筛选、培养、诱导表达：筛选出阳性克隆在培养基上进行培养，经诱导使目标蛋白表达；(4)鸡干扰素‑α的分离、纯化：首先将大肠杆菌菌体收集、破菌，经离心收集包含体，然后进行包含体的洗涤、裂解和复性，再采用层析技术纯化得到鸡干扰素‑α。
【技术特征摘要】
1.一种鸡干扰素-α的制备方法，其特征在于：(1)鸡干扰素-α基因的获得；(2)表达载体的构建及转化大肠杆菌工程菌：将鸡干扰素-α基因序列插入到表达载体质粒的酶切位点，然后转化大肠杆菌宿主菌；(3)阳性克隆的筛选、培养、诱导表达：筛选出阳性克隆在培养基上进行培养，经诱导使目标蛋白表达；(4)鸡干扰素-α的分离、纯化：首先将大肠杆菌菌体收集、破菌，经离心收集包含体，然后进行包含体的洗涤、裂解和复性，再采用层析技术纯化得到鸡干扰素-α。2.根据权利要求1所述的一种鸡干扰素-α的制备方法，其特征在于：表达基因是SEQ.1的鸡干扰素-αDNA序列。3.根据权利要求1所述的一种鸡干扰素-α的制备方法，其特征在于：表达载体是pET系列载体质粒。4.根据权利要求1所述的一种鸡干扰素-α的制备方法，其特征在于：步骤(3)中培养的温度控制在25℃～40℃，优选在30℃～37℃。5.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：叶楠，吴燕，龚岳斌，
申请(专利权)人：杭州俊丰生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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