新颖的B7-H3-结合分子、其抗体药物缀合物及其使用方法技术

本发明专利技术涉及能够结合人和非人B7‑H3的新颖的B7‑H3‑结合分子，尤其涉及与非人灵长类动物(例如食蟹猴)的B7‑H3具有交叉反应性的这样的分子。本发明专利技术还涉及包含可变轻链结构域和/或可变重链(VH)结构域的B7‑H3‑结合分子，所述可变轻链结构域和/或可变重链(VH)结构域已经被人源化和/或去免疫化，以便在施用至接受受试者后显示减少的免疫原性。本发明专利技术尤其涉及包括双特异性双抗体、BiTE、双特异性抗体、三价结合分子等的双特异性、三特异性或多特异性B7‑H3‑结合分子，其包含(i)这类结合B7‑H3的可变结构域和(ii)能够结合至存在于效应细胞表面上的分子的表位的结构域。本发明专利技术还尤其涉及一种分子，所述分子包含缀合至至少一个药物部分的人源化的抗人B7‑H3抗体的人B7‑H3结合结构域(“B7‑H3‑ADC”)。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新颖的B7-H3-结合分子、其抗体药物缀合物及其使用方法相关申请的交叉引用本申请要求美国专利申请系列号62/432,314(2016年12月9日提交；待决)、62/323,249(2016年4月15日提交；待决)、62/323,228(2016年4月15日提交；待决)的优先权，其每一篇申请通过引用以其整体并入本文。序列表的参考根据37C.F.R.1.821以及下面的条款，本申请包括一个或多个序列表，其以计算机-可读介质公开(文件名：1301_0143-0144PCT_ST25.txt，2017年3月28日创建，并且大小为104,762字节)，该文件通过引用以其整体并入本文。
本专利技术涉及能够结合人和非人B7-H3的新颖的B7-H3-结合分子，尤其涉及与非人灵长类动物(例如食蟹猴)的B7-H3具有交叉反应性的这样的分子。本专利技术还涉及包含可变轻链结构域和/或可变重链(VH)结构域的B7-H3-结合分子，所述可变轻链结构域和/或可变重链(VH)结构域已经被人源化和/或去免疫化，以便在施用至接受受试者后显示减少的免疫原性。本专利技术尤其涉及包括双特异性双抗体、BiTE、双特异性抗体、三价结合分子等的双特异性、三特异性或多特异性B7-H3-结合分子，其包含(i)这类结合B7-H3的可变结构域和(ii)能够结合至存在于效应细胞表面上的分子的表位的结构域。本专利技术也涉及含有任何这类B7-H3-结合分子的药物组合物，并涉及包括使用任何这类B7-H3-结合分子治疗癌症和其他疾病和病况的方法。本专利技术还尤其涉及一种分子，所述分子包含缀合至至少一个药物部分的人源化的抗人B7-H3抗体的人B7-H3结合结构域(“B7-H3-ADC”)。本专利技术还涉及含有这类B7-H3-ADC的药物组合物，并涉及包括使用任何这类B7-H3-ADC治疗癌症和其他疾病和病况的方法。专利技术背景肿瘤的生长和转移在很大程度上取决于它们逃避宿主免疫监视和战胜宿主防御的能力。大多数肿瘤表达可被宿主免疫系统在不同程度上识别的抗原，但是在许多情况下，由于效应T细胞的无效激活会引起免疫应答不足(Khawli,L.A.等(2008)“Cytokine,Chemokine,andCo-StimulatoryFusionProteinsfortheImmunotherapyofSolidTumors,”Exper.Pharmacol.181:291-328)。I.B7超家族和B7-H3B7-H3是B7-CD28超家族的成员，在抗原提呈细胞上表达。B7-H3结合T细胞，但是在这类T细胞表面上的B7-H3反受体(counter-receptor)还没有被完全表征。B7-H3是独特的，因为主要的人形式包含两个细胞外串联的IgV-IgC结构域(即IgV–IgC–IgV–IgC)(Collins,M.等(2005)“TheB7FamilyOfImmune-RegulatoryLigands,”GenomeBiol.6:223.1-223.7)。尽管最初认为仅包含2个Ig结构域(IgV-IgC)，但已经鉴定出四免疫球蛋白细胞外结构域变体(“4Ig-B7-H3”)，并且发现其是更常见的人形式的蛋白质(Sharpe,A.H.等(2002)“TheB7-CD28Superfamily,”NatureRev.Immunol.2:116-126)。然而，天然的鼠科形式(2Ig)和人类4Ig形式显示类似的功能(Hofmeyer,K.等(2008)“TheContrastingRoleOfB7-H3,”Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)105(30):10277-10278)。4Ig-B7-H3分子抑制NK细胞介导的癌症细胞的裂解(Castriconi,R.等“IdentificationOf4Ig-B7-H3AsANeuroblastoma-AssociatedMoleculeThatExertsAProtectiveRoleFromAnNKCell-MediatedLysis,”Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)101(34):12640-12645)。据报道，人B7-H3(2Ig形式)通过与激活的T细胞上的推定受体结合来促进T细胞激活和IFN-γ产生(Chapoval,A.等(2001)“B7-H3:ACostimulatoryMoleculeForTCellActivationandIFN-γProduction,”NatureImmunol.2:269–274)。然而，最近的研究指出鼠科B7-H3和人B7-H3的抑制作用(Prasad,D.V.,等(2004)“MurineB7-H3IsANegativeRegulatorOfTCells,JImmunol.173:2500-2506；Leitner,J.,等(2009)“B7-H3IsAPotentInhibitorOfHumanT-CellActivation:NoEvidenceForB7-H3AndTREML2Interaction.”Eur.J.Immunol.39:1754-1764；Veenstra,R.G.,等(2015)“B7-H3expressioninDnorTCellsandHostCellsNegativelyRegulatesAcuteGraft-Versus-HostDiseaseLethality,”Blood125:3335-3346.)。已经在心脏、肾脏、睾丸、肺、肝脏、胰腺、前列腺、结肠和成骨细胞中发现B7-H3mRNA表达(Collins,M.等(2005)“TheB7FamilyOfImmune-RegulatoryLigands,”GenomeBiol.6:223.1-223.7)。在蛋白质水平，在人肝脏、肺、膀胱、睾丸、前列腺、乳腺、胎盘和淋巴器官中发现B7-H3(Hofmeyer,K.等(2008)“TheContrastingRoleOfB7-H3,”Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)105(30):10277-10278)。尽管B7-H3不在静息B细胞或T细胞、单核细胞或树突细胞上表达，但是其在树突细胞上被IFN-γ诱导和在单核细胞上被GM-CSF诱导(Sharpe,A.H.等(2002)“TheB7-CD28Superfamily,”NatureRev.Immunol.2:116-126)。B7-H3的作用方式很复杂，据报道蛋白质介导T细胞共刺激和共抑制(Hofmeyer,K.等(2008)“TheContrastingRoleOfB7-H3,”Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)105(30):10277-10278；Martin-Orozco,N.等(2007)“InhibitoryCostimulationAndAnti-TumorImmunity,”Semin.CancerBiol.17(4):288-298；Subudhi,S.K.等(2005)“TheBalanceOfImmuneResponses:CostimulationVerseCoinhibition,”J.Mol.Med.8本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含下式的抗B7‑H3抗体药物缀合物(B7‑H3‑ADC)：Ab‑(LM)m‑(D)n,其中：Ab是抗体或其B7‑H3结合片段，所述抗体结合至包含人源化的可变重链(VH)结构域和人源化的可变轻链(VL)结构域的B7‑H3，并且；D是细胞毒性药物部分；LM是键或连接分子，其共价连接Ab和D；m是0和n之间的整数，且表示B7‑H3‑ADC的连接分子的数目；并且n是1和10之间的整数，且表示共价连接至B7‑H3‑ADC分子的细胞毒性药物部分的数目。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.04.15 US 62/323,228;2016.04.15 US 62/323,249;1.一种包含下式的抗B7-H3抗体药物缀合物(B7-H3-ADC)：Ab-(LM)m-(D)n,其中：Ab是抗体或其B7-H3结合片段，所述抗体结合至包含人源化的可变重链(VH)结构域和人源化的可变轻链(VL)结构域的B7-H3，并且；D是细胞毒性药物部分；LM是键或连接分子，其共价连接Ab和D；m是0和n之间的整数，且表示B7-H3-ADC的连接分子的数目；并且n是1和10之间的整数，且表示共价连接至B7-H3-ADC分子的细胞毒性药物部分的数目。2.根据权利要求1所述的B7-H3-ADC，其中：(A)(i)所述人源化的VL结构域包含SEQIDNO:99的氨基酸序列，并且(ii)所述人源化的VH结构域包含SEQIDNO:104的氨基酸序列；或(B)(i)所述人源化的VL结构域包含SEQIDNO:20的氨基酸序列，并且(ii)所述人源化的VH结构域包含SEQIDNO:21的氨基酸序列；或(C)(i)所述人源化的VL结构域包含SEQIDNO:30的氨基酸序列，并且(ii)所述人源化的VH结构域包含SEQIDNO:31的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的B7-H3-ADC，其中所述人源化的VL结构域包含SEQIDNO:99的氨基酸序列，且所述人源化的VH结构域包含SEQIDNO:104的氨基酸序列。4.根据权利要求1所述的B7-H3-ADC，其中所述人源化的VL结构域包含SEQIDNO:20的氨基酸序列，且所述人源化的VH结构域包含SEQIDNO:21的氨基酸序列。5.根据权利要求1所述的B7-H3-ADC，其中所述人源化的VL结构域包含SEQIDNO:30的氨基酸序列，且所述人源化的VH结构域包含SEQIDNO:31的氨基酸序列。6.根据权利要求1-5中任一项所述的B7-H3-ADC，其中所述Ab是抗体。7.根据权利要求1-5中任一项所述的B7-H3-ADC，其中所述Ab是抗体的抗原结合片段。8.根据权利要求1-7中任一项所述的B7-H3-ADC，其中所述B7-H3-ADC包含人IgG的Fc结构域。9.根据权利要求8所述的B7-H3-ADC，其中所述人IgG是人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。10.根据权利要求8或9所述的B7-H3-ADC，其中所述Fc结构域是变异的Fc结构域，其包含：(a)一个或多个氨基酸修饰，其减少变异的Fc结构域对FcγR的亲和力；和/或(b)一个或多个氨基酸修饰，其提高变异的Fc结构域的血清半衰期。11.根据权利要求10所述的B7-H3-ADC，其中减少变异的Fc结构域对FcγR的亲和力的所述修饰包括以下的取代：L234A；L235A；或L234A和L235A，其中所述编号是如Kabat中的EU索引的编号。12.根据权利要求10或11所述的B7-H3-ADC，其中提高变异的Fc结构域的血清半衰期的所述修饰包括以下取代：M252Y；M252Y和S254T；M252Y和T256E；M252Y、S254T和T256E；或K288D和H435K，其中所述编号是如Kabat中的EU索引的编号。13.根据权利要求1-12中任一项所述的B7-H3-ADC，其中至少一个所述LM是连接分子。14.根据权利要求13所述的B7-H3-ADC，其中所述LM连接分子是肽连接体。15.根据权利要求13所述的B7-H3-ADC，其中所述LM连接分子是可裂解的连接体。16.根据权利要求15所述的B7-H3-ADC，其中所述分子包含式：Ab–[V-(W)k-(X)1-A]–D其中：V是所述可裂解的LM连接分子，(W)k-(X)1-A是延长的、自我消去的间隔体系统，其通过l,(4+2n)-消去而自我消去，W和X各自是l,(4+2n)电子级联间隔体，是相同的或不同的，A是式(Y)m的间隔体基团，其中Y是l,(4+2n)电子级联间隔体，或者A是式U的基团，其是环化作用消去间隔体，K、1和m独立地是0(包括0)至5(包括5)的整数，n是0(包括0)至10(包括10)的整数，条件是：当A是(Y)m时：那么k+l+m≥1，并且如果k+l+m＝l，那么n>l；当A是U时：那么k+1≥1，W、X和Y独立地选自具有下式的化合物：其中：Q是-R5C＝CR6-、S、O、NR5、-R5C＝N-或-N＝CR5-，P是NR7、O或S，a、b和c独立地为0(包括0)至5(包括5)的整数；I、F和G独立地选自具有下式的化合物：其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9独立地代表H、C1-6烷基、C3-20杂环基、C5-20芳基、C1-6烷氧基、羟基(OH)、氨基(NH2)、单基取代的氨基(NRxH)、双基取代的氨基(NRx1Rx2)、硝基(NO2)、卤素、CF3、CN、CONH2、SO2Me、CONHMe、环状C1-5烷基氨基、咪唑基、C1-6烷基哌嗪基、吗啉代、巯基(SH)、硫醚(SRx)、四唑、羧基(COOH)、羧酸酯(COORx)、磺酸基(S(＝O)2OH)、磺酸酯(S(＝O)2ORx)、磺酰基(S(＝O)2Rx)、亚磺酸基(S(＝O)OH)、亚磺酸酯(S(＝O)ORx)、亚硫酰基(S(＝O)Rx)、膦酰氧基(OP(＝O)(OH)2)和磷酸酯(OP(＝O)(ORx)2)，其中Rx、Rx1和Rx2独立地选自C1-6烷基基团、C3-20杂环基基团或C5-20芳基基团，取代基R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8或R9中的两个或更多个任选地彼此相连接形成一个或多个脂肪族的环状结构或芳香族的环状结构；U选自具有下式的化合物：其中：a、b和c独立地被选择为整数0或1；条件是a+b+c＝2或3；R1和/或R2独立地代表H、C1-6烷基，所述烷基任选地被一个或多个以下基团取代：羟基(OH)、醚(ORx)、氨基(NH2)、单基取代的氨基(NRxH)、双基取代的氨基(NRx1Rx2)、硝基(NO2)、卤素、CF3、CN、CONH2、SO2Me、CONHMe、环状C1-5烷基氨基、咪唑基、C1-6烷基哌嗪基、吗啉代、巯基(SH)、硫醚(SRX)、四唑、羧基(COOH)、羧酸酯(COORx)、磺酸基(S(＝O)2OH)、磺酸酯(S(＝O)2ORX)、磺酰基(S(＝O)2Rx)、亚磺酸基(S(＝O)OH)、亚磺酸酯(S(＝O)ORx)、亚硫酰基(S(＝O)Rx)、膦酰氧基(OP(＝O)(OH)2)和磷酸酯(OP(＝O)(ORx)2)，其中Rx、Rx1和Rx2选自C1-6烷基基团、C3-20杂环基基团或C5-20芳基基团；并且R3、R4、R5、R6、R7和R8独立地代表H、C1-6烷基、C3-20杂环基、C5-20芳基、C1-6烷氧基、羟基(OH)、氨基(NH2)、单基取代的氨基(NRxH)、双基取代的氨基(NRx1Rx2)、硝基(NO2)、卤素、CF3、CN、CONH2、SO2Me、CONHMe、环状C1-5烷基氨基、咪唑基、C1-6烷基哌嗪基、吗啉代、巯基(SH)、硫醚(SRx)、四唑、羧基(COOH)、羧酸酯(COORx)、磺酸基(S(＝O)2OH)、磺酸酯(S(＝O)2ORx)、磺酰基(S(＝O)2Rx)、亚磺酸基(S(＝O)OH)、亚磺酸酯(S(＝O)ORx...

【专利技术属性】
技术研发人员：德瑞克·T·卢，黄菱，L·S·约翰逊，T·索恩，J·斯克里布纳，E·本维尼，
申请(专利权)人：宏观基因有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US