一种磁性稀土荧光微球的制备方法和用途技术

一种磁性稀土荧光微球的制备方法，所述磁性稀土荧光微球为高分子材料包裹磁性稀土荧光复合物的纳米微球，所述磁性稀土荧光微球的直径为10~500nm，荧光发射波长范围为400~800nm；所述磁性稀土荧光微球包括高分子纳米微球、纳米微球表面修饰活性基团、磁性荧光复合物与磁性荧光纳米微球。本发明专利技术所述的磁性稀土荧光微球具有磁性荧光双标记功能、荧光强度高、稳定性好等优点，并且可以与免疫层析技术相结合，实现快速与定量的完美结合。

【技术实现步骤摘要】
一种磁性稀土荧光微球的制备方法和用途
本专利技术属于纳米材料、检测
，具体涉及一种磁性稀土荧光微球的制备方法和用途。
技术介绍
磁性标记和荧光标记技术在生物分析、分离纯化、医学检验等领域有着广泛的应用。基于磁性纳米材料的磁性标记技术使得被标记物在外加磁场作用下具有良好的磁响应性能，一方面可以作为磁分离的介质，另一方面也可进行磁信号检测。而以镧系稀土元素、上转换荧光材料、量子点等为代表的荧光纳米材料标记技术，在荧光示踪、定量荧光分析等领域有着广泛的应用。制备荧光-磁性双标记微球，将这两种标记技术的优势合二为一，一直是各国科研工作者共同关注的研究热点。
技术实现思路
为解决以上问题，本专利技术提供一种兼备磁性和荧光功能的微球简便制备方法，以及应用该磁性荧光双标记微球结合免疫层析技术进行荧光免疫层析试纸条的制造使用方法。为了达到本专利技术的目的，本专利技术技术方案如下：一种磁性稀土荧光微球的制备方法，所述磁性稀土荧光微球为高分子材料包裹磁性稀土荧光复合物的纳米微球，所述磁性稀土荧光微球的直径为10~500nm，荧光发射波长范围为400~800nm；所述磁性稀土荧光微球包括高分子纳米微球、纳米微球表面修饰活性基团、磁性荧光复合物与磁性荧光纳米微球。进一步，高分子材料为聚苯乙烯或聚烷基氰基丙烯酸酯。进一步，磁性稀土荧光微球表面修饰活性基团为为氨基、羧基或巯基。进一步，磁性荧光复合物为铁氧化物和镧系稀土元素复合物；所述所述铁氧化物为四氧化三铁、三氧化二铁、氧化铁、铁氧体中任意一种或几种混合；所述镧系稀土元素为Eu3+、Sm3+、Tb3+、Nd3+或Dy3+中任意一种或几种混合。一种磁性稀土荧光微球免疫层析定量检测的方法，所述磁性稀土荧光微球免疫层析定量检测步骤如下:1)用化学交联分别将分析物对应的配体，以及质控分子，偶联至磁性稀土荧光微球表面，得到标记液；2)以样品垫、层析膜、吸水垫、PVC底板以及卡盒组装免疫层析所用试纸条，其中层析膜上设定有测试线和质控线，测试线固定有能与分析物结合或与步骤1)所述标记液竞争结合分析物的抗体，质控线固定有能与所述质控分子特异性结合的生物分子；3)将标记液与样本混合，反应结束后进行磁分离，去上清并将富集物洗涤、复溶，获得富集液；4)将富集液滴加于试纸条的样品垫处，进行免疫层析，当富集液流经测试线和质控线后，检测测试线和质控线的荧光信号强度，并以质控线荧光信号强度校正测试线的荧光信号强度，进而实现对目标分析物的定量检测。进一步，配体包含抗原、半抗原、单克隆抗体、多克隆抗体和激素受体。进一步，所述层析膜包含一条或一条以上质控线和一条或一条以上一条测试线，通过设置多条测试线和质控线分别测定一个样本里的多种分析物。进一步，所述目标分析物包括小分子、抗原、抗体、激素、抗生素、细菌、病毒及其他生化标志物。进一步，其他生化标志物包括心血管标志物、肿瘤标志物或自身免疫性疾病标志物。进一步，层析膜、PVC底板和卡盒在大于300nm时荧光很弱或不含荧光剂。进一步，PVC底板表面附有不干胶，且两者均不含荧光剂。进一步，检测样本可包含血清、血浆、全血、唾液、尿液和粪便等。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：一种磁性稀土荧光微球的制备方法，磁性稀土荧光微球作为示踪物标记在食品检测、医学临床检测、生物学科研检测以及环境检测方面的用途。1)本专利技术的磁性稀土荧光微球同时具备磁分离和荧光信号放大的作用，有助于微球制备过程的纯化，以及检测过程中目标分析物与干扰物质的分离，进而可达到降低样本基质差异、提高系统检测灵敏度的目的。2)本专利技术采用镧系稀土元素为荧光信号指示物质，与有机荧光染料相比，具有发光强度高、激发光谱宽、发射光谱窄、荧光寿命长等优势。3)本专利技术只需改变镧系稀土元素的种类，即可得到不同发射波长的荧光，采用不同镧系稀土元素构建磁性稀土荧光微球，可实现多组分的定量检测，方法简单快速，灵敏度高。4)本专利技术既可进行定性分析又可实现对目标分析物的定量检测。本专利技术所述的磁性稀土荧光微球具有磁性荧光双标记功能、荧光强度高、稳定性好等优点，并且可以与免疫层析技术相结合，实现快速与定量的完美结合。附图说明图1为本专利技术HCG测试曲线；图2为本专利技术人绒毛膜促性腺激素测定方法精密度试验结果。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。除非上下文另有特定清楚的描述，本专利技术中的检测物名称和参数，数量既可以单个的形式存在，也可以多个的形式存在，本专利技术并不对此进行限定。本专利技术中的步骤虽然用标号进行了排列，但并不用于限定步骤的先后次序，除非明确说明了步骤的次序或者某步骤的执行需要其他步骤作为基础，否则步骤的相对次序是可以调整的。可以理解，本文中所使用的术语“和/或”涉及且涵盖相关联的所列项目中的一者或一者以上的任何和所有可能的组合。一种磁性稀土荧光微球的制备方法，所述磁性稀土荧光微球为高分子材料包裹磁性稀土荧光复合物的纳米微球，所述磁性稀土荧光微球的直径为10~500nm，荧光发射波长范围为400~800nm；所述磁性稀土荧光微球包括高分子纳米微球、纳米微球表面修饰活性基团、磁性荧光复合物与磁性荧光纳米微球。高分子材料为聚苯乙烯或聚烷基氰基丙烯酸酯。磁性稀土荧光微球表面修饰活性基团为为氨基、羧基或巯基。在本专利技术实施例中选为羧基；磁性荧光复合物为铁氧化物和镧系稀土元素复合物；所述所述铁氧化物为四氧化三铁、三氧化二铁、氧化铁、铁氧体中任意一种或几种混合；在本专利技术实施例中选为四氧化三铁，所述镧系稀土元素为Eu3+、Sm3+、Tb3+、Nd3+或Dy3+中任意一种或几种混合，在本专利技术实施例中选为Eu3+。实施例1，磁性稀土荧光微球免疫层析定量检测试纸条所用检测样本为血清，检测样本可包含全血、血浆、唾液、尿液和粪便等。磁性稀土荧光微球免疫层析定量检测试纸条的检测方式为：首先将待测样本与适量标记液混合，当反应一定时间后，对其进行磁分离，收集试管内部沉淀，并采用缓冲液进行洗涤及重悬，进而获得富集液，然后将混匀的富集液滴加于试纸条的样品垫位置处，进行免疫层析。层析结束后，可通过荧光定量仪对试纸条进行检测，获取测试线及质控线的荧光信号强度，并依据标准曲线实现对目标分析物的定量检测。磁性稀土荧光微球免疫层析定量检测试纸条检测结果的定性判定方法：因磁性稀土荧光微球本身在自然光下具有颜色特性，故可对检测试纸条进行初步定性评估，即当试纸条质控线不显色时，说明试验无效；反之试验有效，且当测试线呈现特性颜色时，说明检测样本中含有目标分析物，并随着测试线颜色的加深，样本中目标分析物的含量亦增加，但若测试线不显色，则说明样本中不含或目标分析物低于该试纸条的检测灵敏度。实施例2，磁性稀土荧光微球的制备1.1聚苯乙烯微球的制备1.1.1量取100ml的苯乙烯与分液漏斗中，用1MNaOH反复洗涤3次，除去苯乙烯中的杂质，然后用纯化水洗涤至中性，然后置入干燥皿中干燥24h以上；1.1.2将氩气充入反应装置中，除去装置中的氧气；1.1.3在反应装置中加入100ml的乙醇，然后加入5gPVP，搅拌30min；1.1.4加入40ml已洗涤过的苯乙本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种磁性稀土荧光微球的制备方法，其特征在于：所述磁性稀土荧光微球为高分子材料包裹磁性稀土荧光复合物的纳米微球，所述磁性稀土荧光微球的直径为10~500nm，荧光发射波长范围为 400~ 800nm；所述磁性稀土荧光微球包括高分子纳米微球、纳米微球表面修饰活性基团、磁性荧光复合物与磁性荧光纳米微球。

【技术特征摘要】
1.一种磁性稀土荧光微球的制备方法，其特征在于：所述磁性稀土荧光微球为高分子材料包裹磁性稀土荧光复合物的纳米微球，所述磁性稀土荧光微球的直径为10~500nm，荧光发射波长范围为400~800nm；所述磁性稀土荧光微球包括高分子纳米微球、纳米微球表面修饰活性基团、磁性荧光复合物与磁性荧光纳米微球。2.根据权利要求1所述的一种磁性稀土荧光微球的制备方法，其特征在于：所述高分子材料为聚苯乙烯或聚烷基氰基丙烯酸酯。3.根据权利要求1所述的一种磁性稀土荧光微球的制备方法，其特征在于：所述磁性稀土荧光微球表面修饰活性基团为为氨基、羧基或巯基。4.根据权利要求1所述的一种磁性稀土荧光微球的制备方法，其特征在于：所述磁性荧光复合物为铁氧化物和镧系稀土元素复合物；所述所述铁氧化物为四氧化三铁、三氧化二铁、氧化铁、铁氧体中任意一种或几种混合；所述镧系稀土元素为Eu3+、Sm3+、Tb3+、Nd3+或Dy3+中任意一种或几种混合。5.一种磁性稀土荧光微球免疫层析定量检测的方法，其特征在于：所述磁性稀土荧光微球免疫层析定量检测步骤如下:1）用化学交联分别将分析物对应的配体，以及质控分子，偶联至磁性稀土荧光微球表面，得...

【专利技术属性】
技术研发人员：于龙波，于永涛，黎权，刘日俊，
申请(专利权)人：广州华澳生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44