【技术实现步骤摘要】
优化的人凝血因子IX基因表达盒及其应用优先权声明本申请要求于2017年5月31日提交的美国临时申请第62/512,833号的权益，其全部内容通过引用并入本文。
本专利技术涉及用于在受试者的肝脏中生成多肽和功能性核酸的合成肝脏特异性启动子和表达构建体。本专利技术还涉及编码因子IX(FactorIX)蛋白的优化的多核苷酸序列、包含所述优化的多核苷酸序列的载体以及使用这些组合物以治疗出血性疾病的方法。
技术介绍
通过加速因子X转化为因子Xa，因子IX(FIX)在凝血级联中起关键作用。FIX活性不足是出血性疾病血友病B的原因。血友病B的现有治疗方法是静脉输注血浆来源或重组的FIX蛋白。尽管这种治疗在控制出血事件方面很有效，但是由于FIX半衰期短(8-12小时)，进行频繁输注使该方法自身成本高昂。基因疗法已经成为最终治愈这种疾病的有吸引力的策略。然而，由于FIX表达水平不足，因此使用最有前景的病毒载体之一腺病毒伴随病毒(adeno-associatedvirus)(AAV)递送FIX基因的进展不太理想。通过提供适于在AAV载体上使用的的短的合成肝脏特异性启动子和表达构建体，...
【技术保护点】
1.一种多核苷酸，其包含合成的肝特异性启动子，其中所述启动子包含核苷酸序列SEQ ID NO:1或者与其具有至少约90％同一性的序列。
【技术特征摘要】
2017.05.31 US 62/512,8331.一种多核苷酸，其包含合成的肝特异性启动子，其中所述启动子包含核苷酸序列SEQIDNO:1或者与其具有至少约90％同一性的序列。2.根据权利要求1所述的多核苷酸，其中所述启动子可操作地连接至目标多核苷酸。3.根据权利要求2所述的多核苷酸，其中所述目标多核苷酸编码多肽或功能性核酸。4.根据权利要求3所述的多核苷酸，其中所述目标多核苷酸编码凝血因子。5.根据权利要求4所述的多核苷酸，其中所述目标多核苷酸编码因子IX。6.根据权利要求5所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸序列已进行密码子优化，以在人体中表达。7.根据权利要求5-6中任一项所述的多核苷酸，其中所述编码因子IX的目标多核苷酸包含导致R338L突变(相对于人因子IX的编号)的错义突变。8.根据权利要求2-7中任一项所述的多核苷酸，进一步包含在所述启动子和目标多核苷酸之间的合成的5’-非翻译区。9.根据权利要求8所述的多核苷酸，其中所述合成的5’-非翻译区包含核苷酸序列SEQIDNO:3或者与其具有至少约90％同一性的序列。10.根据权利要求8或9所述的多核苷酸，其中所述合成的5’-非翻译区包含合成的内含子。11.根据权利要求10所述的多核苷酸，其中所述合成的内含子包含核苷酸序列SEQIDNO:13或者与其具有至少约90％同一性的序列。12.根据权利要求11所述的多核苷酸，其中所述合成的5’-非翻译区和合成的内含子包含核苷酸序列SEQIDNO:4或者与其具有至少约90％同一性的序列。13.根据权利要求11或12所述的多核苷酸，其中所述启动子、合成的5’-非翻译区和合成的内含子包含核苷酸序列SEQIDNO:2或者与其具有至少约90％同一性的序列。14.根据权利要求2-13中任一项所述的多核苷酸，其中所述目标多核苷酸包含合成的内含子。15.根据权利要求14所述的多核苷酸，其中所述合成的内含子包含核苷酸序列SEQIDNO:5或者与其具有至少约90％同一性的序列。16.根据权利要求14或15所述的多核苷酸，其中所述密码子优化的因子IX编码序列和合成的内含子包含核苷酸序列SEQIDNO:6或者与其具有至少约90％同一性的序列。17.根据权利要求14或15所述的多核苷酸，其中所述密码子优化的因子IX编码序列和合成的内含子包含核苷酸序列SEQIDNO:7或者与其具有至少约90％同一性的序列。18.根据权利要求14或15所述的多核苷酸，其中所述密码子优化的因子IX编码序列和合成的内含子包含核苷酸序列SEQIDNO:8或者与其具有至少约90％同一性的序列。19.根据权利要求1-18中任一项所述的多核苷酸，其可操作地连接至聚腺苷酸化位点。20.根据权利要求19所述的多核苷酸，其中所述聚腺苷酸化位点是双向聚腺苷酸化位点。21.根据权利要求20所述的多核苷酸，其中所述聚腺苷酸化位点包含核苷酸序列SEQIDNO:9或者与其具有至少约90％同一性的序列。22.根据权利要求1-21中任一项所述的多核苷酸，包含核苷酸序列SEQIDNO:10或者与其具有至少约90％同一性的序列。23.根据权利要求1-21中任一项所述的多核苷酸，包含核苷酸序列SEQIDNO:11或者与其具...
【专利技术属性】
技术研发人员：肖啸，李娟，
申请(专利权)人：北卡罗来纳大学教堂山分校，
类型：发明
国别省市：美国,US
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。